缩略语表 | 第4-5页 |
摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-9页 |
第一章 文献综述 | 第12-21页 |
1 PED的流行 | 第12-15页 |
1.1 国外流行情况 | 第12-13页 |
1.1.1 欧洲流行情况 | 第12-13页 |
1.1.2 亚洲流行情况 | 第13页 |
1.2 国内流行情况 | 第13-15页 |
2 PEDV的病原学特性 | 第15-18页 |
2.1 PEDV病毒学分类地位与生物学特征 | 第15页 |
2.2 PEDV的分子生物学特征 | 第15-18页 |
2.2.1 基因组结构 | 第15-16页 |
2.2.2 5'非编码区和3'非编码区 | 第16页 |
2.2.3 复制酶基因 | 第16-17页 |
2.2.4 结构基因及其产物 | 第17-18页 |
2.3 PEDV的病原性 | 第18页 |
3. PED的诊断 | 第18-19页 |
4. PED的治疗 | 第19-20页 |
5. 本研究的目的与意义 | 第20-21页 |
第二章 猪流行性腹泻病毒RT-PCR检测方法的建立应用 | 第21-33页 |
1. 材料 | 第21-23页 |
1.1 病毒 | 第21页 |
1.2 主要试剂 | 第21页 |
1.3 主要仪器 | 第21页 |
1.4 引物的设计 | 第21页 |
1.5 试验方法 | 第21-23页 |
1.5.1 病毒RNA的提取 | 第21-22页 |
1.5.2 病毒cDNA模板的制备 | 第22页 |
1.5.3 PCR反应体系和条件的确定 | 第22页 |
1.5.4 RT-PCR的特异性实验 | 第22页 |
1.5.5 RT-PCR的敏感性实验 | 第22-23页 |
1.5.6 PEDV的流行病学调查 | 第23页 |
2 结果 | 第23-31页 |
2.1 PEDV反应体系扩增结果 | 第23页 |
2.2 RT-PCR退火温度优化结果 | 第23-24页 |
2.3 RT-PCR各反应成分浓度优化结果 | 第24-27页 |
2.4 RT-PCR特异性试验结果 | 第27-28页 |
2.5 RT-PCR敏感性试验结果 | 第28-29页 |
2.6 四川地区临床病料的RT-PCR检测结果 | 第29页 |
2.7 PEDV的流行病学调查结果 | 第29-31页 |
3 讨论 | 第31-33页 |
第三章 四川部分PEDV的S基因克隆与序列分析 | 第33-43页 |
1 材料 | 第33页 |
1.1 病料 | 第33页 |
1.2 主要试剂 | 第33页 |
1.3 仪器设备 | 第33页 |
1.4 引物 | 第33页 |
2 试验方法 | 第33-35页 |
2.1 病料的采集与保存 | 第33-34页 |
2.2 病料的处理 | 第34页 |
2.3 部分PEDV的S基因的克隆及鉴定 | 第34-35页 |
2.3.1 PCR产物目的片段的回收 | 第34页 |
2.3.2 序列测定 | 第34页 |
2.3.3 参考毒株 | 第34-35页 |
3 结果 | 第35-41页 |
3.1 部分S基因的RT-PCR扩增结果 | 第35-36页 |
3.2 部分S基因序列分析结果 | 第36-40页 |
3.3 部分S基因遗传进化树分析 | 第40-41页 |
4 讨论 | 第41-43页 |
4.1 PEDV部分S基因的序列分析 | 第41-43页 |
全文结论 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
致谢 | 第49-50页 |
附录 | 第50-53页 |