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云南腾冲热泉嗜热原核微生物资源挖掘和高温木聚糖酶筛选

摘要第3-5页
Abstract第5-7页
第一章 文献综述第12-26页
    1.1 高温菌与高温酶的筛选第12-14页
        1.1.1 嗜热菌概述与研究现状第12-14页
        1.1.2 热泉生境中高温酶的研究第14页
    1.2 木聚糖和木聚糖酶第14-23页
        1.2.1 木聚糖第14页
        1.2.2 木聚糖酶与来源第14-15页
        1.2.3 木聚糖酶的结构第15-16页
        1.2.4 木聚糖酶的应用第16-20页
        1.2.5 木聚糖酶的研究现状与问题第20-21页
        1.2.6 耐高温木聚糖酶的筛选与研究第21-23页
    1.3 云南腾冲地热区特征及嗜热菌研究现状第23-25页
    1.4 研究目的和意义第25-26页
第二章 Biolog ECO法研究腾冲部分热泉嗜热微生物的代谢特征第26-45页
    2.1 实验材料第26-27页
        2.1.1 样点的采集及样点基本信息第26-27页
        2.1.2 Biolog微孔板与主要仪器第27页
    2.2 实验方法第27-30页
        2.2.1 热泉样品悬浮液的制备、接种培养与实时检测第27页
        2.2.2 AWCD值的计算第27-29页
        2.2.3 微生物群落代谢多样性指数分析第29页
        2.2.4 各个样点代谢结构特征的聚类分析第29页
        2.2.5 各个样点代谢结构特征的主成分分析第29-30页
    2.3 结果与分析第30-42页
        2.3.1 不同热泉环境微生物群落对全部碳源的利用第30-31页
        2.3.2 不同热泉环境微生物群落对同一类型底物的代谢能力差异分析第31-35页
        2.3.3 各个热泉环境微生物群落对不同类型底物的代谢能力差异分析第35-38页
        2.3.4 不同热泉环境微生物群落代谢功能多样性分析第38-39页
        2.3.5 不同热泉环境微生物功能多样性主成分分析第39-41页
        2.3.6 不同热泉环境微生物群落利用碳源的聚类分析第41-42页
    2.4 讨论与小结第42-45页
第三章 部分热泉可培养嗜热原核微生物的分离与鉴定第45-66页
    3.1 材料与方法第45-51页
        3.1.1 热泉样品来源及样点信息第45页
        3.1.2 分离培养基的设计第45-47页
        3.1.3 样品的处理与分离培养第47页
        3.1.4 菌株的分离、纯化与保藏第47页
        3.1.5 纯化菌株基因组DNA的提取第47-48页
        3.1.6 纯化菌株16S rRNA基因的PCR扩增及测序第48-49页
        3.1.7 纯化菌株基于16S rRNA基因序列的系统发育分析第49页
        3.1.8 候选新物种多相分类鉴定第49-51页
    3.2 结果与分析第51-63页
        3.2.1 六个腾冲热泉环境嗜热原核微生物分离结果与多样性分析第51-53页
        3.2.2 不同热泉样点嗜热微生物多样性比较分析第53-55页
        3.2.3 不同分离培养基对热泉嗜热原核微生物分离的影响第55-56页
        3.2.4 新物种Laceyella calidiresistens YIM 79486~T sp.nov.的多相分类研究第56-63页
    3.3 小结与讨论第63-66页
第四章 富集处理分离、筛选木聚糖酶活性菌株及酶学性质初探第66-87页
    4.1 材料与方法第66-70页
        4.1.1 热泉样品来源及样点信息第66页
        4.1.2 样品富集处理设计与分离培养基第66-67页
            4.1.2.1 样品富集处理1第66-67页
            4.1.2.2 样品S集处理2第67页
        4.1.3 样品的处理与分离培养第67页
        4.1.4 菌株的分离、纯化与保藏第67页
        4.1.5 纯化菌株基因组DNA的提取、PCR扩增、测序和系统发育分析第67页
        4.1.6 木聚糖酶活性菌株的初筛第67-68页
        4.1.7 木聚糖酶活性菌株的复筛第68页
        4.1.8 木聚糖酶活力的测定与计算第68页
        4.1.9 菌株Geobacillus sp.YIM 71344发酵产酶第68-69页
        4.1.10 菌株Geobacillus sp.YIM 71344所产木聚糖酶酶学性质初探第69-70页
    4.2 结果与分析第70-84页
        4.2.1 直接分离得到的嗜热原核微生物中木聚糖酶活性菌株的筛选第70-72页
        4.2.2 富集1处理热泉样品的分离与木聚糖酶活性菌株筛选第72-74页
        4.2.3 富集处理2热泉样品的分离与木聚糖酶活性菌株筛选第74-78页
        4.2.4 热泉样品不同分离方式下木聚糖酶活性菌株筛选比较分析第78-79页
        4.2.5 Geobacillus sp.YIM 71344发酵产酶第79-80页
        4.2.6 Geobacillus sp.YIM 71344所产木聚糖酶酶学性质初探第80-84页
    4.3 小结与讨论第84-87页
第五章 两株高温木聚糖酶活性菌株的基因组学分析第87-111页
    5.1 材料与方法第87-92页
        5.1.1 实验菌株的培养和菌体细胞收集第87页
        5.1.2 菌株基因组DNA的提取第87-88页
        5.1.3 菌株Meiothermus sp.YIM 71147和Geobacillus sp.YIM 71344的全基因组测序第88页
        5.1.4 基因组测序数据的生物信息分析第88-92页
    5.2 结果与分析第92-108页
        5.2.1 基因组DNA的提取第92页
        5.2.2 基因组测序数据组装结果评价第92-96页
        5.2.3 基因预测与非编码RNA预测第96-98页
        5.2.4 基因功能注释第98-101页
        5.2.5 YIM71147和YIM 71344基因组分布图第101-102页
        5.2.6 菌株YIM 71147和YIM 71344基因组中木聚糖酶相关基因的信息分析第102-104页
        5.2.7 Meiothermus sp.YIM 71147和Geobacillus sp.YIM 71344基因组中木聚糖酶基因序列的分析第104-108页
    5.3 小结与讨论第108-111页
第六章 两个热泉环境宏基因组中高温木聚糖酶基因的挖掘第111-130页
    6.1 材料与方法第111-113页
        6.1.1 样品采集与样点信息第111页
        6.1.2 热泉样品中微生物细胞的收集第111页
        6.1.3 热泉环境样品宏基因组DNA的提取第111-112页
        6.1.4 宏基因组测序第112-113页
        6.1.5 宏基因组数据的组装与生物信息分析第113页
        6.1.6 木聚糖酶基因序列的分析第113页
    6.2 结果与分析第113-126页
        6.2.1 金泽和供销社热泉环境样品宏基因组DNA的提取第113-114页
        6.2.2 金泽和供销社热泉宏基因组组装、基因预测和基因注释评价第114-115页
        6.2.3 金泽与供销社热泉中基于功能基因的微生物物种多样性分析第115-116页
        6.2.4 基因功能注释第116-118页
        6.2.5 两个热泉宏基因组中木聚糖酶基因的注释与分析第118-126页
    6.3 小结与讨论第126-130页
总结与展望第130-134页
参考文献第134-156页
博士期间成果第156-161页
致谢第161-162页

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