| 摘要 | 第6-8页 |
| abstract | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第15-35页 |
| 第一章 猪瘟病毒研究进展 | 第15-22页 |
| 1.1 猪瘟病毒概述 | 第15页 |
| 1.2 CSFV基因组及其编码的蛋白在病毒侵染与增殖中的作用 | 第15-18页 |
| 1.2.1 CSFV囊膜蛋白介导病毒粒子的吸附和入侵 | 第15-17页 |
| 1.2.2 CSFV非编码区与非结构蛋白对病毒增殖的调控 | 第17-18页 |
| 1.3 CSFV与宿主的相互作用 | 第18-22页 |
| 1.3.1 宿主细胞内成分对CSFV复制的调控 | 第18-20页 |
| 1.3.2 CSFV调控宿主的天然免疫 | 第20页 |
| 1.3.3 CSFV与宿主的相互作用对病毒毒力的影响 | 第20-21页 |
| 1.3.4 CSFV对细胞凋亡与细胞周期的影响 | 第21-22页 |
| 第二章 Rab蛋白研究进展 | 第22-35页 |
| 2.1 Rab蛋白概述 | 第22-27页 |
| 2.1.1 Rab基因结构与进化 | 第22-24页 |
| 2.1.2 Rab蛋白的结构特点 | 第24-25页 |
| 2.1.3 Rab蛋白活性调控机制 | 第25-26页 |
| 2.1.4 Rab蛋白的定位与功能 | 第26-27页 |
| 2.2 Rab蛋白与病毒增殖 | 第27-32页 |
| 2.2.1 Rab蛋白与病毒相互作用的一般原则 | 第27-28页 |
| 2.2.2 Rab蛋白与病毒的宿主入侵 | 第28-29页 |
| 2.2.3 Rab蛋白与病毒粒子的组装 | 第29-30页 |
| 2.2.4 Rab蛋白与病毒粒子的包膜 | 第30-32页 |
| 2.2.5 Rab蛋白与病毒粒子的成熟与释放 | 第32页 |
| 2.3 Rab1A与病毒增殖 | 第32-33页 |
| 2.4 Rab5与病毒增殖 | 第33-35页 |
| 试验研究 | 第35-90页 |
| 第三章 Rab1A对猪瘟病毒增殖的影响 | 第35-51页 |
| 3.1 材料 | 第35-36页 |
| 3.1.1 细胞、病毒与质粒 | 第35页 |
| 3.1.2 主要试剂、试剂盒与抗体 | 第35-36页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第36页 |
| 3.2 方法 | 第36-42页 |
| 3.2.1 主要溶液的配制 | 第36-37页 |
| 3.2.2 载体扩增 | 第37-38页 |
| 3.2.3 细胞培养 | 第38页 |
| 3.2.4 MTT检测CI-976 对PK-15 细胞的毒性 | 第38页 |
| 3.2.5 Rab1A基因干扰慢病毒载体构建 | 第38-39页 |
| 3.2.6 重组慢病毒包装及测定其滴度 | 第39-40页 |
| 3.2.7 Rab1A基因干扰细胞系建立 | 第40页 |
| 3.2.8 实时荧光定量PCR测定Rab1A的mRNA水平 | 第40-41页 |
| 3.2.9 Western blot检测目Rab1A表达情况 | 第41-42页 |
| 3.2.10 Rab1A对猪瘟病毒增殖的影响 | 第42页 |
| 3.2.11 数据统计分析 | 第42页 |
| 3.3 结果 | 第42-48页 |
| 3.3.1 慢病毒干扰载体的鉴定 | 第42-44页 |
| 3.3.2 重组慢病毒的包装 | 第44页 |
| 3.3.3 Rab1A稳定干扰细胞系的建立 | 第44页 |
| 3.3.4 Rab1A有效干扰序列的筛选 | 第44-45页 |
| 3.3.5 Rab1A对猪瘟病毒增殖的影响 | 第45-47页 |
| 3.3.6 CI-976 抑制内质网到高尔基体运输对猪瘟病毒增殖的影响 | 第47-48页 |
| 3.4 讨论 | 第48-50页 |
| 3.5 小结 | 第50-51页 |
| 第四章 Rab1A促进猪瘟病毒粒子的组装 | 第51-66页 |
| 4.1 材料 | 第51-52页 |
| 4.1.1 细胞、病毒与质粒 | 第51页 |
| 4.1.2 主要试剂、试剂盒与抗体 | 第51页 |
| 4.1.3 主要仪器设备 | 第51-52页 |
| 4.2 方法 | 第52-55页 |
| 4.2.1 主要溶液的配制 | 第52页 |
| 4.2.2 载体的构建 | 第52-53页 |
| 4.2.3 实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA水平 | 第53页 |
| 4.2.4 间接免疫荧光与猪瘟病毒滴度的测定 | 第53页 |
| 4.2.5 猪瘟病毒增殖一个周期所需时间的测定 | 第53-54页 |
| 4.2.6 Western blot检测目蛋白的表达水平 | 第54页 |
| 4.2.7 免疫共沉淀检测Rab1A是否与NS5A相结合 | 第54页 |
| 4.2.8 激光共聚焦研究NS5A与Rab1A的细胞共定位 | 第54-55页 |
| 4.2.9 数据统计分析 | 第55页 |
| 4.3 结果 | 第55-64页 |
| 4.3.1 载体的鉴定 | 第55-56页 |
| 4.3.2 CSFV增殖周期的确定 | 第56-57页 |
| 4.3.3 Rab1A干扰抑制CSFV病毒颗粒的组装 | 第57-59页 |
| 4.3.4 抑制病毒扩散消除Rab1A干扰对CSFV增殖的影响 | 第59-61页 |
| 4.3.5 Rab1A与CSFV NS5A相结合 | 第61-62页 |
| 4.3.6 Rab1A与CSFV NS5A共定位 | 第62-63页 |
| 4.3.7 CSFV感染不调节Rab1A表达 | 第63-64页 |
| 4.4 讨论 | 第64-65页 |
| 4.5 小结 | 第65-66页 |
| 第五章 Rab5对猪瘟病毒增殖的影响 | 第66-78页 |
| 5.1 材料 | 第66页 |
| 5.1.1 细胞、病毒与质粒 | 第66页 |
| 5.1.2 主要试剂、试剂盒与抗体 | 第66页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第66页 |
| 5.2 方法 | 第66-69页 |
| 5.2.1 主要溶液的配制 | 第66页 |
| 5.2.2 细胞培养 | 第66页 |
| 5.2.3 载体扩增及构建 | 第66-68页 |
| 5.2.4 重组慢病毒包装及测定其滴度 | 第68页 |
| 5.2.5 Rab5基因干扰或过表达细胞系的建立 | 第68页 |
| 5.2.6 实时荧光定量PCR测定目的基因mRNA水平 | 第68页 |
| 5.2.7 Western blot检测目的蛋白的表达情况 | 第68页 |
| 5.2.8 Rab5对猪瘟病毒增殖的影响 | 第68-69页 |
| 5.2.9 数据统计分析 | 第69页 |
| 5.3 结果 | 第69-76页 |
| 5.3.1 载体的鉴定 | 第69-70页 |
| 5.3.2 重组慢病毒的包装 | 第70-71页 |
| 5.3.3 Rab5稳定过表达或干扰细胞系的建立 | 第71-72页 |
| 5.3.4 Rab5的表达检测 | 第72-74页 |
| 5.3.5 过表达Rab5对猪瘟病毒增殖的影响 | 第74-75页 |
| 5.3.6 干扰Rab5表达对CSFV增殖的影响 | 第75-76页 |
| 5.4 讨论 | 第76-77页 |
| 5.5 小结 | 第77-78页 |
| 第六章 Rab5与猪瘟病毒NS4B相互作用并促进NS4B相关复合物的形成 | 第78-90页 |
| 6.1 材料 | 第78-79页 |
| 6.1.1 细胞、病毒与质粒 | 第78页 |
| 6.1.2 主要试剂、试剂盒与抗体 | 第78页 |
| 6.1.3 主要仪器设备 | 第78-79页 |
| 6.2 方法 | 第79-81页 |
| 6.2.1 主要溶液的配制 | 第79页 |
| 6.2.2 载体的构建 | 第79-80页 |
| 6.2.3 GST-Rab5的原核诱导表达 | 第80页 |
| 6.2.4 实时荧光定量PCR检测目的基因mRNA水平 | 第80页 |
| 6.2.5 Western blot检测目蛋白的表达水平 | 第80页 |
| 6.2.6 免疫共沉淀验证Rab5与NS4B的相互作用 | 第80页 |
| 6.2.7 GST-Pulldown验证Rab5与NS4B的相互作用 | 第80-81页 |
| 6.2.8 激光共聚焦 | 第81页 |
| 6.2.9 数据统计分析 | 第81页 |
| 6.3 结果 | 第81-87页 |
| 6.3.1 载体鉴定 | 第81-83页 |
| 6.3.2 Co-IP验证Rab5与NS4B的相互作用 | 第83页 |
| 6.3.3 GST-Pulldown验证Rab5与NS4B的相互作用 | 第83-84页 |
| 6.3.4 激光共聚焦研究NS4B与Rab5在细胞中的共定位 | 第84-85页 |
| 6.3.5 Rab5促进NS4B诱导复合物的形成 | 第85-86页 |
| 6.3.6 NS4B与NS3、NS5A的共定位 | 第86页 |
| 6.3.7 CSFV增殖对 Rab5表达的影响 | 第86-87页 |
| 6.4 讨论 | 第87-89页 |
| 6.5 小结 | 第89-90页 |
| 结论 | 第90页 |
| 本论文的创新点 | 第90-91页 |
| 参考文献 | 第91-108页 |
| 主要缩略词与中英文对照表（Abbreviation Index） | 第108-110页 |
| 致谢 | 第110-111页 |
| 作者简介 | 第111页 |
