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章鱼胺介导的粘虫幼虫密度依赖的抗病免疫机制研究

摘要第3-5页
Abstract第5-6页
第一章 文献综述第9-14页
    1 昆虫密度依赖的抗病性第9-10页
        1.1 昆虫密度依赖的抗病性现象第9-10页
        1.2 昆虫密度依赖的抗病免疫功能机制第10页
    2 生物胺第10-13页
        2.1 昆虫中的三种生物胺及其功能第10-12页
            2.1.1 章鱼胺第10-11页
            2.1.2 5-羟色胺第11页
            2.1.3 多巴胺第11-12页
        2.2 生物胺响应昆虫的压力反应第12页
        2.3 生物胺对甲壳动物及昆虫免疫反应的调控作用第12-13页
    3 粘虫幼虫密度依赖的抗病性免疫机制研究第13页
    4 研究目的与意义第13-14页
第二章 幼虫密度对粘虫抗病能力及免疫功能的影响第14-22页
    1 材料与方法第14-16页
        1.1 虫源与幼虫密度设置第14页
        1.2 苏云金芽孢杆菌亚致死剂量测定第14-15页
        1.3 不同密度粘虫幼虫对苏云金芽孢杆菌抵抗能力的测定第15页
        1.4 不同密度粘虫幼虫对球孢白僵菌抵抗能力的测定第15页
        1.5 不同密度粘虫幼虫免疫指标的测定第15-16页
            1.5.1 粘虫幼虫血淋巴的制备第15页
            1.5.2 血淋巴酚氧化酶活力的测定第15-16页
            1.5.3 血细胞总数的计数第16页
            1.5.4 溶菌酶含量的测定第16页
        1.6 数据分析第16页
    2 结果与分析第16-20页
        2.1 苏云金芽孢杆菌对4龄幼虫的亚致死浓度第16-17页
        2.2 不同密度粘虫幼虫对苏云金芽孢杆菌的抵抗能力第17-18页
        2.3 不同密度粘虫幼虫对球孢白僵菌的抵抗能力第18页
        2.4 不同密度粘虫幼虫免疫功能的变化规律第18-20页
            2.4.1 血淋巴酚氧化酶活力第18-19页
            2.4.2 血细胞总数第19页
            2.4.3 溶菌酶活性第19-20页
    3 讨论第20-22页
第三章 章鱼胺对粘虫幼虫密度依赖的抗病免疫的调节第22-31页
    1 材料与方法第22-25页
        1.1 虫源与幼虫密度设置第22-23页
        1.2 不同密度粘虫幼虫生物胺含量的测定第23-24页
            1.2.1 粘虫幼虫血淋巴的制备第23页
            1.2.2 幼虫血淋巴章鱼胺、多巴胺、五羟色胺含量的测定第23-24页
        1.3 注射外源章鱼胺后,粘虫幼虫免疫指标的测定第24页
        1.4 注射章鱼胺受体拮抗剂(依匹斯汀)后,粘虫幼虫免疫指标的测定第24页
        1.5 注射外源多巴胺后,粘虫幼虫免疫指标的测定第24页
        1.6 注射外源章鱼胺后,粘虫幼虫对球孢白僵菌抵抗能力的测定第24-25页
        1.7 数据分析第25页
    2 结果与分析第25-28页
        2.1 密度对粘虫幼虫血淋巴章鱼胺、多巴胺、五羟色胺含量的影响第25-26页
        2.2 外源章鱼胺对粘虫幼虫免疫功能的影响第26页
        2.3 章鱼胺受体拮抗剂(依匹斯汀)对粘虫幼虫免疫功能的影响第26-27页
        2.4 外源多巴胺对粘虫幼虫免疫功能的影响第27页
        2.5 外源章鱼胺对粘虫幼虫抵抗球孢白僵菌能力的影响第27-28页
    3 讨论第28-31页
第四章 幼虫密度对粘虫章鱼胺合成酶活性及基因表达量的影响第31-43页
    1 材料与方法第31-37页
        1.1 虫源与幼虫密度设置第31页
        1.2 不同密度饲养的粘虫幼虫酪氨酸脱羧酶(Tdc)和酪胺-β羟化酶(Tβh)活力的测定第31-33页
            1.2.1 酶液的制备第31-32页
            1.2.2 酪氨酸脱羧酶(Tdc)和酪胺-β羟化酶(Tβh)活力的测定第32-33页
        1.3 不同密度粘虫幼虫酪胺-P羟化酶(Tph)基因表达量的测定第33-37页
            1.3.1 酪胺-β羟化酶(Tβh)基因片段的克隆第33-36页
                1.3.1.1 所用试剂第33页
                1.3.1.2 RNA的提取第33-34页
                1.3.1.3 RNA的反转录第34-35页
                1.3.1.4 引物设计第35页
                1.3.1.5 片段的扩增第35页
                1.3.1.6 回收与纯化第35-36页
                1.3.1.7 连接和转化第36页
                1.3.1.8 序列分析第36页
            1.3.2 不同密度粘虫幼虫酪胺-β羟化酶(Tβh)基因mRNA表达水平分析第36-37页
                1.3.2.2 RNA的提取第36-37页
                1.3.2.3 反转录第37页
                1.3.2.4 引物设计与合成第37页
                1.3.2.5 实时荧光定量PCR检测第37页
        1.4 数据分析第37页
    2 结果与分析第37-42页
        2.1 幼虫密度对幼虫酪氨酸脱羧酶(Tdc)和酪胺-β羟化酶(Tβh)活力的影响第37-39页
            2.1.1 幼虫密度对粘虫头部Tdc和Tβh活力的影响第38页
            2.1.2 幼虫密度对粘虫幼虫腹部Tdc和Tβh活力的影响第38-39页
        2.2 不同密度粘虫幼虫酪胺-β羟化酶(Tβh)基因mRNA表达水平分析第39-42页
            2.2.1 酪胺-β羟化酶(Tβh)基因片段序列的克隆第39-41页
            2.2.2 幼虫密度对粘虫酪胺-β羟化酶(Tβ h)基因表达的影响第41-42页
    3 讨论第42-43页
参考文献第43-51页
致谢第51-52页
攻读硕士学位期间发表的论文第52-53页

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