摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-6页 |
第一章 文献综述 | 第9-14页 |
1 昆虫密度依赖的抗病性 | 第9-10页 |
1.1 昆虫密度依赖的抗病性现象 | 第9-10页 |
1.2 昆虫密度依赖的抗病免疫功能机制 | 第10页 |
2 生物胺 | 第10-13页 |
2.1 昆虫中的三种生物胺及其功能 | 第10-12页 |
2.1.1 章鱼胺 | 第10-11页 |
2.1.2 5-羟色胺 | 第11页 |
2.1.3 多巴胺 | 第11-12页 |
2.2 生物胺响应昆虫的压力反应 | 第12页 |
2.3 生物胺对甲壳动物及昆虫免疫反应的调控作用 | 第12-13页 |
3 粘虫幼虫密度依赖的抗病性免疫机制研究 | 第13页 |
4 研究目的与意义 | 第13-14页 |
第二章 幼虫密度对粘虫抗病能力及免疫功能的影响 | 第14-22页 |
1 材料与方法 | 第14-16页 |
1.1 虫源与幼虫密度设置 | 第14页 |
1.2 苏云金芽孢杆菌亚致死剂量测定 | 第14-15页 |
1.3 不同密度粘虫幼虫对苏云金芽孢杆菌抵抗能力的测定 | 第15页 |
1.4 不同密度粘虫幼虫对球孢白僵菌抵抗能力的测定 | 第15页 |
1.5 不同密度粘虫幼虫免疫指标的测定 | 第15-16页 |
1.5.1 粘虫幼虫血淋巴的制备 | 第15页 |
1.5.2 血淋巴酚氧化酶活力的测定 | 第15-16页 |
1.5.3 血细胞总数的计数 | 第16页 |
1.5.4 溶菌酶含量的测定 | 第16页 |
1.6 数据分析 | 第16页 |
2 结果与分析 | 第16-20页 |
2.1 苏云金芽孢杆菌对4龄幼虫的亚致死浓度 | 第16-17页 |
2.2 不同密度粘虫幼虫对苏云金芽孢杆菌的抵抗能力 | 第17-18页 |
2.3 不同密度粘虫幼虫对球孢白僵菌的抵抗能力 | 第18页 |
2.4 不同密度粘虫幼虫免疫功能的变化规律 | 第18-20页 |
2.4.1 血淋巴酚氧化酶活力 | 第18-19页 |
2.4.2 血细胞总数 | 第19页 |
2.4.3 溶菌酶活性 | 第19-20页 |
3 讨论 | 第20-22页 |
第三章 章鱼胺对粘虫幼虫密度依赖的抗病免疫的调节 | 第22-31页 |
1 材料与方法 | 第22-25页 |
1.1 虫源与幼虫密度设置 | 第22-23页 |
1.2 不同密度粘虫幼虫生物胺含量的测定 | 第23-24页 |
1.2.1 粘虫幼虫血淋巴的制备 | 第23页 |
1.2.2 幼虫血淋巴章鱼胺、多巴胺、五羟色胺含量的测定 | 第23-24页 |
1.3 注射外源章鱼胺后,粘虫幼虫免疫指标的测定 | 第24页 |
1.4 注射章鱼胺受体拮抗剂(依匹斯汀)后,粘虫幼虫免疫指标的测定 | 第24页 |
1.5 注射外源多巴胺后,粘虫幼虫免疫指标的测定 | 第24页 |
1.6 注射外源章鱼胺后,粘虫幼虫对球孢白僵菌抵抗能力的测定 | 第24-25页 |
1.7 数据分析 | 第25页 |
2 结果与分析 | 第25-28页 |
2.1 密度对粘虫幼虫血淋巴章鱼胺、多巴胺、五羟色胺含量的影响 | 第25-26页 |
2.2 外源章鱼胺对粘虫幼虫免疫功能的影响 | 第26页 |
2.3 章鱼胺受体拮抗剂(依匹斯汀)对粘虫幼虫免疫功能的影响 | 第26-27页 |
2.4 外源多巴胺对粘虫幼虫免疫功能的影响 | 第27页 |
2.5 外源章鱼胺对粘虫幼虫抵抗球孢白僵菌能力的影响 | 第27-28页 |
3 讨论 | 第28-31页 |
第四章 幼虫密度对粘虫章鱼胺合成酶活性及基因表达量的影响 | 第31-43页 |
1 材料与方法 | 第31-37页 |
1.1 虫源与幼虫密度设置 | 第31页 |
1.2 不同密度饲养的粘虫幼虫酪氨酸脱羧酶(Tdc)和酪胺-β羟化酶(Tβh)活力的测定 | 第31-33页 |
1.2.1 酶液的制备 | 第31-32页 |
1.2.2 酪氨酸脱羧酶(Tdc)和酪胺-β羟化酶(Tβh)活力的测定 | 第32-33页 |
1.3 不同密度粘虫幼虫酪胺-P羟化酶(Tph)基因表达量的测定 | 第33-37页 |
1.3.1 酪胺-β羟化酶(Tβh)基因片段的克隆 | 第33-36页 |
1.3.1.1 所用试剂 | 第33页 |
1.3.1.2 RNA的提取 | 第33-34页 |
1.3.1.3 RNA的反转录 | 第34-35页 |
1.3.1.4 引物设计 | 第35页 |
1.3.1.5 片段的扩增 | 第35页 |
1.3.1.6 回收与纯化 | 第35-36页 |
1.3.1.7 连接和转化 | 第36页 |
1.3.1.8 序列分析 | 第36页 |
1.3.2 不同密度粘虫幼虫酪胺-β羟化酶(Tβh)基因mRNA表达水平分析 | 第36-37页 |
1.3.2.2 RNA的提取 | 第36-37页 |
1.3.2.3 反转录 | 第37页 |
1.3.2.4 引物设计与合成 | 第37页 |
1.3.2.5 实时荧光定量PCR检测 | 第37页 |
1.4 数据分析 | 第37页 |
2 结果与分析 | 第37-42页 |
2.1 幼虫密度对幼虫酪氨酸脱羧酶(Tdc)和酪胺-β羟化酶(Tβh)活力的影响 | 第37-39页 |
2.1.1 幼虫密度对粘虫头部Tdc和Tβh活力的影响 | 第38页 |
2.1.2 幼虫密度对粘虫幼虫腹部Tdc和Tβh活力的影响 | 第38-39页 |
2.2 不同密度粘虫幼虫酪胺-β羟化酶(Tβh)基因mRNA表达水平分析 | 第39-42页 |
2.2.1 酪胺-β羟化酶(Tβh)基因片段序列的克隆 | 第39-41页 |
2.2.2 幼虫密度对粘虫酪胺-β羟化酶(Tβ h)基因表达的影响 | 第41-42页 |
3 讨论 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
攻读硕士学位期间发表的论文 | 第52-53页 |