摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
1 引言 | 第11-19页 |
1.1 质膜研究进展 | 第11-15页 |
1.1.1 质膜的组成与结构 | 第11-12页 |
1.1.2 质膜的物质运输 | 第12-13页 |
1.1.3 质膜提取与纯化 | 第13页 |
1.1.4 质膜蛋白抽提与溶解 | 第13-14页 |
1.1.5 质膜蛋白分离与鉴定 | 第14页 |
1.1.6 质膜蛋白生物信息学分析 | 第14-15页 |
1.2 乙烯研究进展 | 第15-17页 |
1.2.1 乙烯及其生物学功能 | 第15页 |
1.2.2 乙烯信号转导途径 | 第15-16页 |
1.2.3 乙烯促进橡胶树产排胶的机制 | 第16-17页 |
1.3 研究意义和目的 | 第17-18页 |
1.4 实验设计和技术路线 | 第18-19页 |
2 材料与方法 | 第19-29页 |
2.1 两相分配法分离纯化橡胶树树皮质膜 | 第19-21页 |
2.1.1 实验材料 | 第19页 |
2.1.2 实验仪器 | 第19页 |
2.1.3 实验试剂 | 第19-20页 |
2.1.4 实验方法 | 第20-21页 |
2.2 Bradford法测定蛋白浓度 | 第21-22页 |
2.2.1 实验仪器 | 第21页 |
2.2.2 实验试剂 | 第21页 |
2.2.3 实验方法 | 第21-22页 |
2.3 酶活检测 | 第22-23页 |
2.3.1 实验仪器 | 第22页 |
2.3.2 实验试剂 | 第22页 |
2.3.3 实验方法 | 第22-23页 |
2.4 透射电镜切片制作 | 第23-24页 |
2.4.1 实验仪器 | 第23页 |
2.4.2 实验试剂 | 第23页 |
2.4.3 实验方法 | 第23-24页 |
2.5 质膜翻转洗脱 | 第24页 |
2.5.1 实验仪器 | 第24页 |
2.5.2 实验试剂 | 第24页 |
2.5.3 实验方法 | 第24页 |
2.6 质膜蛋白质的抽提和溶解 | 第24-25页 |
2.6.1 实验仪器 | 第24页 |
2.6.2 实验试剂 | 第24页 |
2.6.3 实验方法 | 第24-25页 |
2.7 BCA法测定蛋白浓度 | 第25页 |
2.7.1 实验仪器 | 第25页 |
2.7.2 实验试剂 | 第25页 |
2.7.3 实验方法 | 第25页 |
2.8 蛋白质酶解 | 第25-26页 |
2.8.1 实验仪器 | 第25页 |
2.8.2 实验试剂 | 第25-26页 |
2.8.3 实验方法 | 第26页 |
2.9 蛋白质样品脱盐 | 第26-27页 |
2.9.1 实验仪器 | 第26页 |
2.9.2 实验试剂 | 第26-27页 |
2.9.3 实验方法 | 第27页 |
2.10 LC-MS/MS分析 | 第27页 |
2.10.1 实验仪器 | 第27页 |
2.10.2 实验试剂 | 第27页 |
2.10.3 实验方法 | 第27页 |
2.11 生物信息学和统计学分析 | 第27-28页 |
2.12 实时定量PCR | 第28-29页 |
2.12.1 实验仪器 | 第28页 |
2.12.2 实验试剂 | 第28页 |
2.12.3 实验方法 | 第28-29页 |
3 结果与分析 | 第29-44页 |
3.1 橡胶树树皮质膜提取方法的优化 | 第29-32页 |
3.1.1 聚合物浓度的筛选 | 第29-30页 |
3.1.2 KCl浓度的筛选 | 第30-31页 |
3.1.3 酶活检测法鉴定质膜纯度 | 第31页 |
3.1.4 电镜观察法鉴定质膜纯度 | 第31-32页 |
3.2 橡胶树树皮细胞杂蛋白去除方法的确立 | 第32-34页 |
3.3 橡胶树树皮质膜蛋白溶解方法的筛选 | 第34-35页 |
3.4 不同时间乙烯胁迫橡胶树树皮及表达差异蛋白分析 | 第35-42页 |
3.4.1 表达差异蛋白GO分析 | 第35-41页 |
3.4.2 表达差异蛋白韦恩分析 | 第41-42页 |
3.5 乙烯胁迫对质膜H~+-ATPase基因表达水平的影响 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-49页 |
4.1 橡胶树树皮质膜的提取方法 | 第44-45页 |
4.2 橡胶树树皮质膜蛋白的抽提溶解方法 | 第45页 |
4.3 乙烯胁迫橡胶树树皮质膜蛋白差异表达 | 第45-49页 |
4.3.1 乙烯胁迫物质运输相关蛋白差异表达 | 第45页 |
4.3.2 乙烯胁迫糖代谢相关蛋白差异表达 | 第45-46页 |
4.3.3 乙烯胁迫水运输相关蛋白差异表达 | 第46页 |
4.3.4 乙烯胁迫氮代谢相关蛋白差异表达 | 第46-47页 |
4.3.5 乙烯胁迫细胞壁合成与结构变化相关蛋白差异表达 | 第47页 |
4.3.6 乙烯胁迫细胞内pH变化相关蛋白差异表达 | 第47-48页 |
4.3.7 乙烯胁迫信号通路相关蛋白差异表达 | 第48页 |
4.3.8 乙烯胁迫其它生物过程相关蛋白差异表达 | 第48-49页 |
5 结论 | 第49-50页 |
参考文献 | 第50-57页 |
附录 | 第57-67页 |
致谢 | 第67-68页 |
个人简历 | 第68页 |