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PARP-1依赖parthanatos在脱氧鬼臼毒素诱导神经胶质瘤细胞死亡中的作用及机制研究

前言第4-6页
中文摘要第6-10页
Abstract第10-13页
英文缩写词第18-19页
第1章 绪论第19-21页
第2章 文献综述第21-31页
    2.1 胶质瘤治疗的现状第21-24页
        2.1.1 手术治疗第21-22页
        2.1.2 放射治疗第22页
        2.1.3 化学治疗第22-23页
        2.1.4 新疗法第23-24页
    2.2 PARP-1 依赖的PARTHANATOS死亡第24-28页
        2.2.1 PAR第24-25页
        2.2.2 PARP-1第25-26页
        2.2.3 AIF第26-28页
    2.3 ROS第28页
    2.4 脱氧鬼臼毒素研究现状第28-31页
第3章 实验材料与方法第31-51页
    3.1 主要器材与试剂第31-33页
        3.1.1 主要实验器材第31-32页
        3.1.2 主要实验试剂第32-33页
    3.2 细胞系及细胞培养第33-34页
    3.3 实验液体及配制方法第34-35页
    3.4 细胞复苏、传代及冻存第35-36页
    3.5 实验技术第36-51页
        3.5.1 MTT法检测细胞增殖活性第36页
        3.5.2 平板克隆形成实验第36-37页
        3.5.3 乳酸脱氢酶(LDH)释放法第37-39页
        3.5.4 Western Blot法第39-43页
        3.5.5 si RNA沉默PARP-1 基因第43-44页
        3.5.6 线粒体膜电位检测第44-46页
        3.5.7 单细胞凝胶电泳法(SCGE)第46-47页
        3.5.8 DNA琼脂糖凝胶电泳第47-48页
        3.5.9 细胞内ROS水平测定第48-49页
        3.5.10 统计学分析第49-51页
第4章 实验结果第51-79页
    4.1 DPT对C6和SHG-44胶质瘤细胞增殖和毒性作用第51-54页
        4.1.1 MTT法检测DPT作用时间梯度和浓度梯度对C6和SHG-44胶质瘤细胞抑制增殖作用第51-52页
        4.1.2 LDH法检测DPT对C6和SHG-44胶质瘤细胞细胞毒作用第52-53页
        4.1.3 平板克隆形成实验检测低浓度DPT对C6和SHG-44肿瘤细胞长时程增殖的影响第53-54页
    4.2 WESTERN BLOT法检测DPT诱导C6和SHG-44细胞蛋白表达的变化第54-57页
        4.2.1 DPT时间梯度、浓度梯度诱导SHG-44细胞胞浆、胞核内PAR、PARP-1、AIF蛋白表达变化第55-56页
        4.2.2 DPT作用时间梯度和浓度梯度诱导C6细胞胞浆、胞核内PAR、PARP-1、AIF蛋白表达变化第56-57页
    4.3 应用PARP-1 抑制剂 3AB预处理后对DPT诱导的胶质瘤细胞死亡以及胞浆中PAR集聚的影响第57-61页
        4.3.1 PARP-1 抑制剂 3AB预处理对DPT诱导C6细胞表达PAR、PARP-1、AIF表达变化第59-60页
        4.3.2 PARP-1 抑制剂 3AB预处理对DPT诱导SHG-44细胞胞浆胞表达PAR和细胞胞浆、核内PARP-1、AIF表达变化第60-61页
    4.4 SIRNA沉默PARP-1 基因对DPT诱导胶质瘤细胞毒性作用及相关蛋白表达的影响第61-65页
        4.4.1 si RNA沉默PARP-1 后对DPT诱导C6和SHG-44细胞毒性的影响第61-62页
        4.4.2 Western Blot法检测PARP-1 基因沉默后C6和SHG-44细胞PARP-1、PAR、AIF蛋白表达变化。第62-65页
    4.5 DPT诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位变化及应用PARP-1 抑制剂 3AB预处理后变化第65-68页
        4.5.1 荧光显微镜观察DPT诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位(JC-1染色)变化第65-66页
        4.5.2 流式细胞术检测DPT诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位(JC-1染色)变化第66-67页
        4.5.3 PARP-1 抑制剂 3AB预处理对DPT诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位的影响。第67-68页
    4.6 DPT诱导的胶质瘤细胞DNA损伤与断裂第68-71页
        4.6.1 单细胞凝胶电泳(SCGE)(彗星试验)法检测DPT诱导胶质瘤细胞DNA损伤与断裂第68-70页
        4.6.2 DNA琼脂糖凝胶电泳法检测DPT诱导胶质瘤细胞DNA损伤与断裂第70-71页
    4.7 ROS与DPT诱导胶质瘤细胞死亡的关系第71-79页
        4.7.1 荧光定量法检测DPT诱导胶质瘤细胞ROS第71-73页
        4.7.2 荧光显微镜观察DPT诱导C6和SHG-44胶质瘤细胞 12h后ROS变化第73-74页
        4.7.3 抗氧化剂NAC预处理后引起DPT作用于胶质瘤细胞的ROS荧光强度变化分析第74-75页
        4.7.4 抗氧化剂NAC预处理对DPT诱导C6和SHG-44脑胶质瘤细胞ROS的影响第75-76页
        4.7.5 抗氧化剂NAC预处理对DPT诱导脑胶质瘤细胞PAR、PARP-1 和AIF表达变化第76-79页
第5章 讨论第79-91页
第6章 结论第91-93页
参考文献第93-109页
作者简介及在学期间所取得的科研成果第109-111页
致谢第111页

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