前言 | 第4-6页 |
中文摘要 | 第6-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
英文缩写词 | 第18-19页 |
第1章 绪论 | 第19-21页 |
第2章 文献综述 | 第21-31页 |
2.1 胶质瘤治疗的现状 | 第21-24页 |
2.1.1 手术治疗 | 第21-22页 |
2.1.2 放射治疗 | 第22页 |
2.1.3 化学治疗 | 第22-23页 |
2.1.4 新疗法 | 第23-24页 |
2.2 PARP-1 依赖的PARTHANATOS死亡 | 第24-28页 |
2.2.1 PAR | 第24-25页 |
2.2.2 PARP-1 | 第25-26页 |
2.2.3 AIF | 第26-28页 |
2.3 ROS | 第28页 |
2.4 脱氧鬼臼毒素研究现状 | 第28-31页 |
第3章 实验材料与方法 | 第31-51页 |
3.1 主要器材与试剂 | 第31-33页 |
3.1.1 主要实验器材 | 第31-32页 |
3.1.2 主要实验试剂 | 第32-33页 |
3.2 细胞系及细胞培养 | 第33-34页 |
3.3 实验液体及配制方法 | 第34-35页 |
3.4 细胞复苏、传代及冻存 | 第35-36页 |
3.5 实验技术 | 第36-51页 |
3.5.1 MTT法检测细胞增殖活性 | 第36页 |
3.5.2 平板克隆形成实验 | 第36-37页 |
3.5.3 乳酸脱氢酶(LDH)释放法 | 第37-39页 |
3.5.4 Western Blot法 | 第39-43页 |
3.5.5 si RNA沉默PARP-1 基因 | 第43-44页 |
3.5.6 线粒体膜电位检测 | 第44-46页 |
3.5.7 单细胞凝胶电泳法(SCGE) | 第46-47页 |
3.5.8 DNA琼脂糖凝胶电泳 | 第47-48页 |
3.5.9 细胞内ROS水平测定 | 第48-49页 |
3.5.10 统计学分析 | 第49-51页 |
第4章 实验结果 | 第51-79页 |
4.1 DPT对C6和SHG-44胶质瘤细胞增殖和毒性作用 | 第51-54页 |
4.1.1 MTT法检测DPT作用时间梯度和浓度梯度对C6和SHG-44胶质瘤细胞抑制增殖作用 | 第51-52页 |
4.1.2 LDH法检测DPT对C6和SHG-44胶质瘤细胞细胞毒作用 | 第52-53页 |
4.1.3 平板克隆形成实验检测低浓度DPT对C6和SHG-44肿瘤细胞长时程增殖的影响 | 第53-54页 |
4.2 WESTERN BLOT法检测DPT诱导C6和SHG-44细胞蛋白表达的变化 | 第54-57页 |
4.2.1 DPT时间梯度、浓度梯度诱导SHG-44细胞胞浆、胞核内PAR、PARP-1、AIF蛋白表达变化 | 第55-56页 |
4.2.2 DPT作用时间梯度和浓度梯度诱导C6细胞胞浆、胞核内PAR、PARP-1、AIF蛋白表达变化 | 第56-57页 |
4.3 应用PARP-1 抑制剂 3AB预处理后对DPT诱导的胶质瘤细胞死亡以及胞浆中PAR集聚的影响 | 第57-61页 |
4.3.1 PARP-1 抑制剂 3AB预处理对DPT诱导C6细胞表达PAR、PARP-1、AIF表达变化 | 第59-60页 |
4.3.2 PARP-1 抑制剂 3AB预处理对DPT诱导SHG-44细胞胞浆胞表达PAR和细胞胞浆、核内PARP-1、AIF表达变化 | 第60-61页 |
4.4 SIRNA沉默PARP-1 基因对DPT诱导胶质瘤细胞毒性作用及相关蛋白表达的影响 | 第61-65页 |
4.4.1 si RNA沉默PARP-1 后对DPT诱导C6和SHG-44细胞毒性的影响 | 第61-62页 |
4.4.2 Western Blot法检测PARP-1 基因沉默后C6和SHG-44细胞PARP-1、PAR、AIF蛋白表达变化。 | 第62-65页 |
4.5 DPT诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位变化及应用PARP-1 抑制剂 3AB预处理后变化 | 第65-68页 |
4.5.1 荧光显微镜观察DPT诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位(JC-1染色)变化 | 第65-66页 |
4.5.2 流式细胞术检测DPT诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位(JC-1染色)变化 | 第66-67页 |
4.5.3 PARP-1 抑制剂 3AB预处理对DPT诱导胶质瘤细胞线粒体膜电位的影响。 | 第67-68页 |
4.6 DPT诱导的胶质瘤细胞DNA损伤与断裂 | 第68-71页 |
4.6.1 单细胞凝胶电泳(SCGE)(彗星试验)法检测DPT诱导胶质瘤细胞DNA损伤与断裂 | 第68-70页 |
4.6.2 DNA琼脂糖凝胶电泳法检测DPT诱导胶质瘤细胞DNA损伤与断裂 | 第70-71页 |
4.7 ROS与DPT诱导胶质瘤细胞死亡的关系 | 第71-79页 |
4.7.1 荧光定量法检测DPT诱导胶质瘤细胞ROS | 第71-73页 |
4.7.2 荧光显微镜观察DPT诱导C6和SHG-44胶质瘤细胞 12h后ROS变化 | 第73-74页 |
4.7.3 抗氧化剂NAC预处理后引起DPT作用于胶质瘤细胞的ROS荧光强度变化分析 | 第74-75页 |
4.7.4 抗氧化剂NAC预处理对DPT诱导C6和SHG-44脑胶质瘤细胞ROS的影响 | 第75-76页 |
4.7.5 抗氧化剂NAC预处理对DPT诱导脑胶质瘤细胞PAR、PARP-1 和AIF表达变化 | 第76-79页 |
第5章 讨论 | 第79-91页 |
第6章 结论 | 第91-93页 |
参考文献 | 第93-109页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第109-111页 |
致谢 | 第111页 |