| 目录 | 第5-7页 |
| 英文缩写词说明 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-36页 |
| 一 甲型流感病毒研究综述 | 第11-17页 |
| 1 甲型流感病毒研究进展 | 第11-15页 |
| 1.1 流感概述 | 第11页 |
| 1.2 流感病毒概述 | 第11-12页 |
| 1.3 流感病毒的结构 | 第12页 |
| 1.4 流感病毒的基因组及编码的蛋白 | 第12-13页 |
| 1.5 流感病毒的生命周期 | 第13-15页 |
| 2 神经氨酸酶(Neuraminidase,NA)研究进展 | 第15-17页 |
| 2.1 神经氨酸酶NA的概述 | 第15页 |
| 2.2 神经氨酸酶NA的结构 | 第15-16页 |
| 2.3 神经氨酸酶NA的功能 | 第16-17页 |
| 二 小分子G蛋白Cdc42研究综述 | 第17-23页 |
| 1 小G蛋白Rho GTPases研究概述 | 第17-19页 |
| 1.1 Rho GTPases的概述 | 第17-18页 |
| 1.2 Rho GTPases生物活性及功能 | 第18-19页 |
| 2 小分子G蛋白Cdc42研究进展 | 第19-23页 |
| 2.1 小G蛋白Cdc42的概述 | 第19-20页 |
| 2.2 小G蛋白Cdc42的生物学功能 | 第20-22页 |
| 2.3 Cdc42在胞内运输中的作用 | 第22-23页 |
| 三 研究的目的和意义 | 第23-24页 |
| 参考文献 | 第24-36页 |
| 第二章 试验研究 | 第36-70页 |
| 一 材料与方法 | 第36-47页 |
| 1 质粒、菌种及细胞株 | 第36页 |
| 1.1 质粒 | 第36页 |
| 1.2 菌种 | 第36页 |
| 1.3 细胞株 | 第36页 |
| 2 仪器与设备 | 第36-37页 |
| 3 试验主要试剂 | 第37页 |
| 4 实验方法 | 第37-47页 |
| 4.1 感受态菌体制备(CaCl_2法) | 第37-38页 |
| 4.2 质粒构建 | 第38-41页 |
| 4.3 定点突变 | 第41-42页 |
| 4.4 细胞培养及转染 | 第42-43页 |
| 4.5 蛋白免疫印迹(Western blot) | 第43-44页 |
| 4.6 免疫荧光实验(Confocal) | 第44-45页 |
| 4.7 神经氨酸酶活力测定 | 第45-46页 |
| 4.8 GST-pull down实验 | 第46-47页 |
| 二 结果与分析 | 第47-67页 |
| 1 NA蛋白胞内转运研究体系的建立 | 第47-49页 |
| 1.1 真核表达质粒NA-WT和NA(H274Y)的构建 | 第47-48页 |
| 1.2 NA-WT和NA(H274Y)表达蛋白在胞内定位的变化 | 第48-49页 |
| 1.3 NA-WT和NA(H274Y)细胞表面活力的改变 | 第49页 |
| 2 筛选NA蛋白修饰与转运中起重要的作用的宿主蛋白 | 第49-51页 |
| 2.1 ToxinB处理NA蛋白在细胞内定位的变化 | 第50-51页 |
| 2.2 ToxinB处理NA蛋白细胞表面酶活力的改变 | 第51页 |
| 3 Rho GTPases家族成员对NA蛋白胞内转运的影响 | 第51-60页 |
| 3.1 真核表达质粒EGFP-(Cdc42、RhoA、Rac1)的构建 | 第52-53页 |
| 3.2 Cdc42、RhoA和Rac1对NA蛋白在细胞内定位的影响 | 第53-56页 |
| 3.3 药物C3 Transferase处理对NA蛋白胞内转运的影响 | 第56-58页 |
| 3.4 外源转入Cdc42对NA蛋白转运的影响 | 第58页 |
| 3.5 宿主细胞内源Cdc42对NA蛋白转运的影响 | 第58-60页 |
| 4 Cdc42与NA蛋白作用方式的探究 | 第60-63页 |
| 4.1 GST-pulldown实验验证Cdc42与NA蛋白之间的作用 | 第60页 |
| 4.2 NA蛋白通过Golgi途径向膜转运 | 第60-62页 |
| 4.3 Cytochalasin D对NA蛋白转运的影响 | 第62-63页 |
| 5 NA非极性跨膜区氨基酸的缺失对转运的影响 | 第63-67页 |
| 5.1 真核表达质粒NA缺失突变体的构建 | 第64页 |
| 5.2 真核表达质粒NA缺失突变体的蛋白表达 | 第64-66页 |
| 5.3 Cdc42对NA_Δ11AA蛋白转运的影响 | 第66-67页 |
| 三 试验结果总结与讨论 | 第67-68页 |
| 参考文献 | 第68-70页 |
| 附录 | 第70-75页 |
| 致谢 | 第75页 |
