| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第一章 绪论 | 第9-33页 |
| 1.1 引言 | 第9-11页 |
| 1.2 诱导多能性干细胞的诞生背景和研究现状 | 第11-18页 |
| 1.2.1 诱导多能性干细胞诞生的历史背景 | 第11页 |
| 1.2.2 诱导多能性干细胞旳创新诱导方法 | 第11-14页 |
| 1.2.3 诱导多能性干细胞的机制研究 | 第14-16页 |
| 1.2.4 诱导多能性干细胞的应用前景 | 第16-18页 |
| 1.3 自噬的功能和研究进展 | 第18-30页 |
| 1.3.1 自噬的概念 | 第18页 |
| 1.3.2 自噬的发生过程及其调控机制 | 第18-22页 |
| 1.3.3 自噬在生理和病理水平的功能 | 第22-25页 |
| 1.3.4 自噬受体蛋白P62的功能简介 | 第25-26页 |
| 1.3.5 自噬与干细胞的关系 | 第26-30页 |
| 1.4 自噬的主要负调控者MTORC1的功能和研究现状 | 第30-33页 |
| 1.4.1 mTORC1的概念和主要功能 | 第30-31页 |
| 1.4.2 mTORC1和干细胞的关系 | 第31-33页 |
| 第二章 材料与方法 | 第33-50页 |
| 2.1 本课题实验材料汇总 | 第33-39页 |
| 2.1.1 使用的细胞及其来源汇总 | 第33页 |
| 2.1.2 主要材料和试剂汇总 | 第33-35页 |
| 2.1.3 本课题所有引物汇总 | 第35-36页 |
| 2.1.4 本课题所有抗体汇总 | 第36页 |
| 2.1.5 主要实验仪器 | 第36-37页 |
| 2.1.6 实验用试剂以及培养基配方汇总 | 第37-39页 |
| 2.2 实验方法 | 第39-50页 |
| 2.2.1 小鼠胚胎成纤维细胞(MEF)和小鼠尾尖细胞(TTF)的分离培养 | 第39-40页 |
| 2.2.2 制备饲养层细胞的方法 | 第40页 |
| 2.2.3 iPSCs以及ES的复苏方法 | 第40-41页 |
| 2.2.4 iPSCs和ES的传代及日常培养方法 | 第41页 |
| 2.2.5 冻存iPSCs和ES细胞的方法 | 第41页 |
| 2.2.6 小鼠iPS诱导方法 | 第41-43页 |
| 2.2.7 小鼠iPSCs的挑取,日常培养及克隆鉴定 | 第43-44页 |
| 2.2.8 免疫荧光实验步骤 | 第44-45页 |
| 2.2.9 免疫蛋白印迹 | 第45-47页 |
| 2.2.10 RNA提取步骤及RT-PCR | 第47-48页 |
| 2.2.11 提取基因组DNA | 第48页 |
| 2.2.12 碱裂解法提取质粒 | 第48-50页 |
| 第三章 ：实验结果 | 第50-73页 |
| 3.1 重编程早期自噬显著激活 | 第50-54页 |
| 3.2 重编程因子KLF4和c-MYc通过不依赖于P53的途径促进自噬发生 | 第54-58页 |
| 3.3 自噬的发生抑制重编程效率 | 第58-65页 |
| 3.3.1 抑制自噬发生的shRNA促进重编程效率 | 第58-61页 |
| 3.3.2 抑制自噬发生的过表达突变体质粒促进重编程效率 | 第61页 |
| 3.3.3 过表达促进自噬发生的Beclinl-WT抑制重编程效率 | 第61-63页 |
| 3.3.4 抑制自噬发生得到的iPSC克隆具有全能性 | 第63-65页 |
| 3.4 ATG5敲除细胞中重编程效率提高 | 第65-66页 |
| 3.5 ATG5敲除细胞中中间体(MIDBODY)数量增多 | 第66-68页 |
| 3.6 ATG5敲除细胞中多功能蛋白P62表达量上调 | 第68-69页 |
| 3.7 抑制自噬发生的调控者MTORC1影响重编程效率 | 第69-73页 |
| 第四章 ：讨论 | 第73-78页 |
| 4.1 重编程早期自噬显著激活 | 第73-74页 |
| 4.2 抑制自噬促进重编程效率 | 第74-75页 |
| 4.3 抑制自噬促进重编程效率的分子机理 | 第75-76页 |
| 4.3.1 重编程过程中自噬特异性降解中间体(midbody) | 第75-76页 |
| 4.3.2 重编程过程中自噬受体蛋白P62的变化和作用 | 第76页 |
| 4.4 干预自噬对细胞内DNA损伤的影响 | 第76页 |
| 4.5 自臨的负调控者mTORCl过度活化后抑制重编程效率 | 第76-78页 |
| 参考文献 | 第78-88页 |
| 附录 | 第88-89页 |
| 致谢 | 第89-90页 |
| 在读期间发表的论文 | 第90页 |
| 已发表论文 | 第90页 |
| 待发表论文 | 第90页 |
