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奶山羊MMP-9基因的克隆、表达及其与乳腺炎的关系研究

摘要第1-9页
ABSTRACT第9-14页
第一章 文献综述第14-26页
   ·奶畜乳房炎的研究进展第14-15页
     ·奶畜乳房炎的危害第14页
     ·奶畜乳房炎的病因第14-15页
     ·奶畜乳房炎的防治方法第15页
     ·奶畜乳房炎相关的抗性基因概述第15页
   ·MMP-9 基因的研究进展第15-24页
     ·MMPs 基因家族概述第15-17页
     ·MMP-9 的结构第17-19页
     ·MMP-9 活性的调控第19-21页
     ·MMP-9 的生理及病理学功能第21-24页
   ·本研究的目的与意义第24-26页
第二章 山羊 MMP-9 基因的 CDNA 克隆和生物信息学分析第26-39页
   ·试验材料第26-27页
     ·试验样品第26页
     ·主要仪器设备第26页
     ·主要试验试剂第26页
     ·主要试剂的配制及器具处理第26-27页
   ·试验方法第27-31页
     ·引物设计第27页
     ·总 RNA 的提取第27页
     ·合成 cDNA 第一链第27-28页
     ·PCR 扩增目的基因第28页
     ·目的片段的回收第28-29页
     ·目的片段与克隆载体的连接第29页
     ·转化及菌液 PCR 检测第29-30页
     ·质粒提取及鉴定第30页
     ·序列分析第30-31页
   ·结果与分析第31-37页
     ·山羊 MMP-9 基因 cDNA 片段的克隆第31页
     ·MMP-9 基因序列的分析第31-33页
     ·同源性分析第33-34页
     ·一级结构和理化性质的分析第34-35页
     ·亚细胞定位及信号肽分析第35-36页
     ·二级结构和三级结构的分析第36-37页
     ·系统进化分析第37页
   ·讨论第37-38页
   ·小结第38-39页
第三章 山羊 MMP-9 基因在不同组织中的差异表达分析第39-46页
   ·试验材料第39-40页
     ·试验样品第39页
     ·主要试验设备及试剂第39-40页
   ·试验方法第40-42页
     ·引物设计及合成第40页
     ·山羊各组织总 RNA 的提取第40页
     ·各组织 cDNA 第一连的合成第40-41页
     ·RT-qPCR 引物特异性检测第41页
     ·RT-qPCR 分析各组织中 MMP-9 基因的表达第41-42页
   ·结果与分析第42-43页
   ·讨论第43-44页
     ·总 RNA 质量对试验结果的影响第43-44页
     ·RT-qPCR 检测基因方法讨论第44页
   ·小结第44-46页
第四章 羊奶中体细胞数与 MMP-9 基因表达的相关性分析第46-53页
   ·试验材料第46-47页
     ·试验动物第46页
     ·主要试验设备及试剂第46-47页
   ·试验方法第47-48页
     ·奶样采集第47页
     ·奶样中体细胞数测定第47页
     ·奶样中体细胞的收集第47页
     ·体细胞中总 RNA 的提取第47-48页
     ·cDNA 第一连的合成第48页
     ·RT-qPCR 检测 MMP-9 基因第48页
   ·结果与分析第48-51页
     ·奶样中体细胞数及乳成分第48-49页
     ·MMP-9 表达量与体细胞数间的相关性第49-51页
   ·讨论第51-52页
   ·小结第52-53页
第五章 金黄色葡萄球菌对乳腺上皮细胞中 MMP-9 基因表达的影响第53-60页
   ·试验材料第53-54页
     ·试验样品采集第53页
     ·试验仪器第53页
     ·试验试剂第53-54页
   ·试验方法第54-55页
     ·金黄色葡萄球菌的培养第54页
     ·乳腺上皮细胞的培养第54-55页
     ·金黄色葡萄球菌对乳腺上皮细胞中 MMP-9 基因表达的影响第55页
   ·结果与分析第55-57页
     ·原代培养的乳腺上皮细胞第55-56页
     ·金黄色葡萄球菌对山羊乳腺上皮细胞中 MMP-9 基因表达的影响第56-57页
   ·讨论第57-59页
   ·小结第59-60页
结论第60-61页
参考文献第61-73页
缩略词第73-74页
致谢第74-75页
作者简介第75页

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