摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-14页 |
第一章 文献综述 | 第14-26页 |
·奶畜乳房炎的研究进展 | 第14-15页 |
·奶畜乳房炎的危害 | 第14页 |
·奶畜乳房炎的病因 | 第14-15页 |
·奶畜乳房炎的防治方法 | 第15页 |
·奶畜乳房炎相关的抗性基因概述 | 第15页 |
·MMP-9 基因的研究进展 | 第15-24页 |
·MMPs 基因家族概述 | 第15-17页 |
·MMP-9 的结构 | 第17-19页 |
·MMP-9 活性的调控 | 第19-21页 |
·MMP-9 的生理及病理学功能 | 第21-24页 |
·本研究的目的与意义 | 第24-26页 |
第二章 山羊 MMP-9 基因的 CDNA 克隆和生物信息学分析 | 第26-39页 |
·试验材料 | 第26-27页 |
·试验样品 | 第26页 |
·主要仪器设备 | 第26页 |
·主要试验试剂 | 第26页 |
·主要试剂的配制及器具处理 | 第26-27页 |
·试验方法 | 第27-31页 |
·引物设计 | 第27页 |
·总 RNA 的提取 | 第27页 |
·合成 cDNA 第一链 | 第27-28页 |
·PCR 扩增目的基因 | 第28页 |
·目的片段的回收 | 第28-29页 |
·目的片段与克隆载体的连接 | 第29页 |
·转化及菌液 PCR 检测 | 第29-30页 |
·质粒提取及鉴定 | 第30页 |
·序列分析 | 第30-31页 |
·结果与分析 | 第31-37页 |
·山羊 MMP-9 基因 cDNA 片段的克隆 | 第31页 |
·MMP-9 基因序列的分析 | 第31-33页 |
·同源性分析 | 第33-34页 |
·一级结构和理化性质的分析 | 第34-35页 |
·亚细胞定位及信号肽分析 | 第35-36页 |
·二级结构和三级结构的分析 | 第36-37页 |
·系统进化分析 | 第37页 |
·讨论 | 第37-38页 |
·小结 | 第38-39页 |
第三章 山羊 MMP-9 基因在不同组织中的差异表达分析 | 第39-46页 |
·试验材料 | 第39-40页 |
·试验样品 | 第39页 |
·主要试验设备及试剂 | 第39-40页 |
·试验方法 | 第40-42页 |
·引物设计及合成 | 第40页 |
·山羊各组织总 RNA 的提取 | 第40页 |
·各组织 cDNA 第一连的合成 | 第40-41页 |
·RT-qPCR 引物特异性检测 | 第41页 |
·RT-qPCR 分析各组织中 MMP-9 基因的表达 | 第41-42页 |
·结果与分析 | 第42-43页 |
·讨论 | 第43-44页 |
·总 RNA 质量对试验结果的影响 | 第43-44页 |
·RT-qPCR 检测基因方法讨论 | 第44页 |
·小结 | 第44-46页 |
第四章 羊奶中体细胞数与 MMP-9 基因表达的相关性分析 | 第46-53页 |
·试验材料 | 第46-47页 |
·试验动物 | 第46页 |
·主要试验设备及试剂 | 第46-47页 |
·试验方法 | 第47-48页 |
·奶样采集 | 第47页 |
·奶样中体细胞数测定 | 第47页 |
·奶样中体细胞的收集 | 第47页 |
·体细胞中总 RNA 的提取 | 第47-48页 |
·cDNA 第一连的合成 | 第48页 |
·RT-qPCR 检测 MMP-9 基因 | 第48页 |
·结果与分析 | 第48-51页 |
·奶样中体细胞数及乳成分 | 第48-49页 |
·MMP-9 表达量与体细胞数间的相关性 | 第49-51页 |
·讨论 | 第51-52页 |
·小结 | 第52-53页 |
第五章 金黄色葡萄球菌对乳腺上皮细胞中 MMP-9 基因表达的影响 | 第53-60页 |
·试验材料 | 第53-54页 |
·试验样品采集 | 第53页 |
·试验仪器 | 第53页 |
·试验试剂 | 第53-54页 |
·试验方法 | 第54-55页 |
·金黄色葡萄球菌的培养 | 第54页 |
·乳腺上皮细胞的培养 | 第54-55页 |
·金黄色葡萄球菌对乳腺上皮细胞中 MMP-9 基因表达的影响 | 第55页 |
·结果与分析 | 第55-57页 |
·原代培养的乳腺上皮细胞 | 第55-56页 |
·金黄色葡萄球菌对山羊乳腺上皮细胞中 MMP-9 基因表达的影响 | 第56-57页 |
·讨论 | 第57-59页 |
·小结 | 第59-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-73页 |
缩略词 | 第73-74页 |
致谢 | 第74-75页 |
作者简介 | 第75页 |