| 前 言 | 第8-10页 |
| 英文缩写词表 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-36页 |
| 第一节 STATs家族概况及STAT3的研究进展 | 第12-24页 |
| 一、 STAT3的发现及结构 | 第13-14页 |
| 二、 STAT3的功能 | 第14-15页 |
| 三、 STAT3的信号转导和转录活化机制 | 第15-16页 |
| 四、 STAT3 与疾病的关系 | 第16-18页 |
| 五、 STAT3与疾病的治疗 | 第18-24页 |
| 第二节 RNA干涉研究进展 | 第24-36页 |
| 一、 历史回顾 | 第24-25页 |
| 二、 dsRNA 介导RNA 干涉的机制 | 第25-29页 |
| 三、 RNA i技术的应用 | 第29-31页 |
| 四、 RNA i技术要点 | 第31-36页 |
| 第二章 RNAi沉默STAT3对人前列腺癌细胞株的生长抑制作用 | 第36-68页 |
| 1 实验材料 | 第36-37页 |
| 2 实验方法 | 第37-46页 |
| 2.1 psilencer1.0-U6-stat3-siRNA重组质粒的构建 | 第37-40页 |
| 2.2 细胞培养及重组质粒的转染 | 第40-41页 |
| 2.3 细胞生长抑制试验-MTT法 | 第41页 |
| 2.4 凋亡细胞的检测 | 第41-42页 |
| 2.5 STAT3蛋白水平分析-Western blot | 第42-43页 |
| 2.6 STAT3mRNA半定量分析--Nortern blot 和RT-PCR | 第43-45页 |
| 2.7 前列腺癌组织的SABC免疫组织化学染色 | 第45-46页 |
| 2.8 PC3细胞免疫化学染色 | 第46页 |
| 2.9 荷瘤裸鼠体内抑瘤试验 | 第46页 |
| 3 结果处理及统计 | 第46页 |
| 4 实验结果 | 第46-68页 |
| 4.1 STAT3 在前列腺癌细胞PC3及LNcap、前列腺癌组织，正常人前列腺组织中的表达 | 第47-48页 |
| 4.2 成功的构建了psilencer1.0-U6-stat3-siRNA重组质粒 | 第48-53页 |
| 4.3 细胞增殖活性的改变 | 第53-54页 |
| 4.4 细胞凋亡 | 第54-55页 |
| 4.5 psilencer1.0-U6-stat3-siRNA 特异性抑制stat3在人前列腺癌细胞系pc3 and LNcap中的表达 | 第55-63页 |
| 4.5.1 Western blot | 第56-59页 |
| 4.5.2 Northern blot | 第59-61页 |
| 4.5.3 RT-PCR | 第61-63页 |
| 4.6 siRNA-STAT3对荷瘤裸鼠模型的抑瘤效应 | 第63-68页 |
| 第三章 RNAi沉默STAT3对小鼠黑色素瘤细胞的生长抑制作用 | 第68-77页 |
| 1 实验材料 | 第68页 |
| 2 实验方 法 | 第68-69页 |
| 2.1 psilencer1.0-U6-stat3-siRNA重组质粒的构建 | 第68页 |
| 2.2 细胞培养及重组质粒的转染 | 第68页 |
| 2.3 STAT3蛋白水平分析--Western blot、STAT3mRNA半定量分析--Nortern blot 和RT-PCR | 第68页 |
| 2.4 B16细胞免疫组化 | 第68页 |
| 2.5 细胞生长抑制试验-MTT法 | 第68-69页 |
| 2.6 C57小鼠体内试验 | 第69页 |
| 3 结果 | 第69-77页 |
| 3.1 psilencer1.0-U6-stat3-siRNA 特异性抑制stat3小鼠黑色素瘤细胞B16中的表达 | 第69-72页 |
| 3.2 细胞增殖活性的改变 | 第72-73页 |
| 3.3 siRNA-STAT3对 C57 小鼠黑色素瘤模型的抑瘤效应 | 第73-77页 |
| 第四章 讨 论 | 第77-84页 |
| 第五章 小结 | 第84-86页 |
| 参考文献 | 第86-100页 |
| 中文摘要 | 第100-107页 |
| 英文摘要 | 第107页 |
| 致 谢 | 第112-113页 |
| 攻读博士学位期间发表文章 | 第113-114页 |
