| 摘要 | 第3-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 英文缩略表 | 第7-11页 |
| 1 前言 | 第11-22页 |
| 1.1 研究背景 | 第11-21页 |
| 1.1.1 流感病毒概述 | 第11-16页 |
| 1.1.2 禽流感反向遗传操作技术及其应用 | 第16-17页 |
| 1.1.3 流感病毒的防治技术 | 第17-21页 |
| 1.2 本研究的目的和意义 | 第21-22页 |
| 2 材料和方法 | 第22-34页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-23页 |
| 2.1.1 试验毒株 | 第22页 |
| 2.1.2 鸡胚 | 第22页 |
| 2.1.3 1%(v/v)鸡红细胞悬液 | 第22页 |
| 2.1.4 细胞 | 第22页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.6 主要仪器 | 第23页 |
| 2.2 方法 | 第23-31页 |
| 2.2.1 病毒的纯化增殖 | 第23页 |
| 2.2.2 病毒RNA的抽提和反转录 | 第23-24页 |
| 2.2.3 目的片段的扩增 | 第24-26页 |
| 2.2.4 目的片段的纯化 | 第26-27页 |
| 2.2.5 各目的片段序列的测定与拼接 | 第27页 |
| 2.2.6 H10N8亚型AIV全基因序列特性分析和遗传演化分析 | 第27页 |
| 2.2.7 目的片段与双向表达载体p HW2000的酶切 | 第27-29页 |
| 2.2.8 目的基因与表达载体p HW2000连接 | 第29页 |
| 2.2.9 重组质粒的转化 | 第29页 |
| 2.2.10 筛选阳性重组质粒 | 第29-30页 |
| 2.2.11 阳性菌的扩大培养以及质粒的抽提 | 第30-31页 |
| 2.3 重组病毒的拯救及选择 | 第31-33页 |
| 2.3.1 重组病毒拯救 | 第31-32页 |
| 2.3.2 重组病毒的传代 | 第32页 |
| 2.3.3 重组病毒RNA抽提及反转录 | 第32页 |
| 2.3.4 重组病毒基因的扩增以及序列的测定 | 第32-33页 |
| 2.4 r346-1、r346-2 和r102重组毒株的生物学特性的测定 | 第33-34页 |
| 2.4.1 红细胞凝集试验（HA试验） | 第33页 |
| 2.4.2 红细胞凝集抑制试验（HI试验） | 第33页 |
| 2.4.3 病毒的鸡胚半数感染量（EID50） | 第33-34页 |
| 3 结果与分析 | 第34-43页 |
| 3.1 三株病毒各基因片段的扩增 | 第34-35页 |
| 3.2 基因组c DNA的序列测定 | 第35-41页 |
| 3.3 H10N8亚型流感病毒的起源 | 第41-42页 |
| 3.4 拯救病毒用重组质粒的鉴定 | 第42-43页 |
| 3.5 重组病毒r346-1、r346-2 和102毒株的生物学特性 | 第43页 |
| 4 结论与讨论 | 第43-46页 |
| 4.1 346-1、346-2 和102毒株的全基因序列分析 | 第43-44页 |
| 4.2 346-1、346-2 和 102 毒株的拯救 | 第44页 |
| 4.3 禽流感反向遗传操作技术的发展及应用 | 第44-46页 |
| 全文总结 | 第46-47页 |
| 致谢 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55页 |
