摘要 | 第4-6页 |
ABSTRECT | 第6-7页 |
缩略语表 | 第8-13页 |
第一章 干细胞定向分化为肝样细胞研究进展 | 第13-31页 |
引言 | 第13-15页 |
1. 干细胞定向分化研究进展 | 第15-23页 |
1.1 胚胎干细胞定向分化研究进展 | 第15-17页 |
1.2 iPSCs定向分化研究进展 | 第17-19页 |
1.3 BMSCs定向分化研究进展 | 第19-23页 |
1.4 其他干细胞定向分化研究进展 | 第23页 |
2. 诱导肝(样)细胞研究进展 | 第23-28页 |
2.1 细胞因子诱导肝(样)细胞 | 第24-25页 |
2.2 转录因子诱导肝(样)细胞 | 第25-27页 |
2.3 miRNA诱导肝(样)细胞 | 第27-28页 |
2.4 其他方法诱导肝(样)细胞 | 第28页 |
3. 本研究的目的和意义 | 第28-31页 |
3.1 研究目的 | 第28页 |
3.2 研究方法 | 第28-29页 |
3.3 研究意义 | 第29-31页 |
第二章 FOXA3和HNF4Α 联合诱导IPSCS定向分化为肝样细胞 | 第31-61页 |
摘要 | 第31-32页 |
引言 | 第32页 |
1. 实验材料 | 第32-36页 |
1.1 细胞及质粒 | 第32-33页 |
1.2 主要试剂与溶液 | 第33-36页 |
1.3 实验仪器设备 | 第36页 |
1.4 主要耗材 | 第36页 |
2. 实验方法 | 第36-51页 |
2.1 DH5α 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第36-37页 |
2.2 质粒提取 | 第37-39页 |
2.3 重组慢病毒载体的构建 | 第39-41页 |
2.4 饲养层细胞和胶原的准备 | 第41-43页 |
2.5 细胞培养 | 第43-44页 |
2.6 i PSCs的干细胞标志基因和蛋白表达检测 | 第44-47页 |
2.7 i PSCs的诱导分化 | 第47-49页 |
2.8 分化细胞的基因和蛋白表达情况检测 | 第49-50页 |
2.9 分化细胞的肝细胞功能检测 | 第50-51页 |
3. 实验结果 | 第51-57页 |
3.1 Foxa3和Hnf4α 重组慢病毒载体质粒构建结果 | 第51-52页 |
3.2 i PSCs的培养和鉴定结果 | 第52-53页 |
3.3 重组慢病毒的制备结果 | 第53-55页 |
3.4 FOXA3 和 HNF4α 联合诱导 i PSCs 定向分化结果 | 第55-57页 |
4. 讨论 | 第57-61页 |
第三章 FOXA3和HNF4Α 联合诱导BMSCS定向分化为肝样细胞 | 第61-79页 |
摘要 | 第61-62页 |
引言 | 第62-63页 |
1. 实验材料 | 第63-64页 |
1.1 细胞及质粒 | 第63页 |
1.2 主要试剂与溶液 | 第63页 |
1.3 实验仪器设备 | 第63页 |
1.4 主要耗材 | 第63-64页 |
2. 实验方法 | 第64-68页 |
2.1 DH5α 大肠杆菌感受态细胞制备 | 第64页 |
2.2 质粒提取 | 第64页 |
2.3 重组慢病毒载体的构建 | 第64页 |
2.4 胶原的准备 | 第64页 |
2.5 细胞培养 | 第64页 |
2.6 BMSCs的分离、培养与鉴定 | 第64-66页 |
2.7 BMSCs的诱导分化 | 第66-67页 |
2.8 分化细胞的基因和蛋白表达情况检测 | 第67-68页 |
2.9 分化细胞的肝细胞功能检测 | 第68页 |
3. 实验结果 | 第68-76页 |
3.1 Foxa3和Hnf4α 重组慢病毒载体质粒构建结果 | 第68-69页 |
3.2 大鼠BMSCs的分离、培养与鉴定结果 | 第69-70页 |
3.3 重组慢病毒的制备结果 | 第70-72页 |
3.4 FOXA3和HNF4α 联合诱导BMSCs定向分化结果 | 第72-76页 |
4. 讨论 | 第76-79页 |
第四章 总结 | 第79-83页 |
结论 | 第83-85页 |
参考文献 | 第85-97页 |
附表 | 第97-99页 |
致谢 | 第99-100页 |
攻读硕士期间参加科研项目和已发表论文 | 第100-101页 |