| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5页 |
| 第一章 绪论 | 第8-19页 |
| 1.1 引言 | 第8-9页 |
| 1.2 全氟辛酸研究概况 | 第9-14页 |
| 1.2.1 全氟辛酸的理化特征 | 第9页 |
| 1.2.2 全氟辛酸的污染现状 | 第9-12页 |
| 1.2.3 全氟辛酸的毒理学研究 | 第12-13页 |
| 1.2.4 全氟辛酸的检测技术研究进展 | 第13-14页 |
| 1.3 单域重链抗体与噬菌体展示技术概况 | 第14-18页 |
| 1.3.1 单域重链抗体简介 | 第14-15页 |
| 1.3.2 单域重链抗体的应用 | 第15-16页 |
| 1.3.3 噬菌体展示技术简介 | 第16-18页 |
| 1.4 选题依据、研究目的和研究内容 | 第18-19页 |
| 1.4.1 选题依据 | 第18页 |
| 1.4.2 研究目的 | 第18页 |
| 1.4.3 研究内容 | 第18-19页 |
| 第二章 羊驼VHH抗体库的构建及鉴定 | 第19-26页 |
| 2.1 材料 | 第19页 |
| 2.1.1 主要试剂 | 第19页 |
| 2.1.2 主要仪器 | 第19页 |
| 2.2 实验方法[75] | 第19-22页 |
| 2.2.1 羊驼外周血单个核细胞的分离和总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2.2 羊驼重链可变区片段的扩增 | 第20-21页 |
| 2.2.3 重链可变区片段与噬菌体载体的高效连接 | 第21-22页 |
| 2.2.4 连接产物转化大肠杆菌TG1 | 第22页 |
| 2.2.5VHH噬菌体抗体库的库容量和多样性检测 | 第22页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第22-25页 |
| 2.3.1 巢式PCR扩增羊驼VHH基因 | 第22-23页 |
| 2.3.2 VHH基因与载体pCANTAB-5E的高效连接 | 第23-24页 |
| 2.3.3 羊驼VHH抗体库的构建以及库容和多样性的鉴定 | 第24-25页 |
| 2.4 本章小结 | 第25-26页 |
| 第三章 PFOA完全抗原的合成及鉴定 | 第26-32页 |
| 3.1 材料 | 第26页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第26页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第26页 |
| 3.2 实验方法 | 第26-29页 |
| 3.2.1PFOA完全抗原的合成 | 第26页 |
| 3.2.2 完全抗原的定性鉴定 | 第26-27页 |
| 3.2.3 完全抗原的定量鉴定 | 第27-29页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第29-31页 |
| 3.3.1 完全抗原的合成 | 第29页 |
| 3.3.2 完全抗原的定性鉴定 | 第29-30页 |
| 3.3.3 完全抗原的定量鉴定 | 第30-31页 |
| 3.4 本章小结 | 第31-32页 |
| 第四章 PFOA特异性单域重链抗体的筛选、表达及鉴定 | 第32-51页 |
| 4.1 材料 | 第32页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第32页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第32页 |
| 4.2 实验方法 | 第32-41页 |
| 4.2.1 筛选抗PFOA的特异性单域重链抗体基因 | 第32-36页 |
| 4.2.2 单域重链抗体基因的扩增 | 第36-37页 |
| 4.2.3 单域重链抗体基因的人源化 | 第37页 |
| 4.2.4 嵌合抗体基因的转染 | 第37-38页 |
| 4.2.5 嵌合抗体基因表达条件的优化 | 第38-39页 |
| 4.2.6 目标蛋白的表达与纯化 | 第39-40页 |
| 4.2.7 表达的抗体蛋白鉴定 | 第40-41页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第41-49页 |
| 4.3.1 辅助性噬菌体M13KO7的扩增以及其滴度的测定 | 第41-42页 |
| 4.3.2 单域重链抗体库的富集 | 第42页 |
| 4.3.3 ELISA鉴定阳性克隆 | 第42-44页 |
| 4.3.4 单域重链抗体基因的扩增，人源化和转染 | 第44-45页 |
| 4.3.5 单域重链抗体蛋白的表达与纯化 | 第45-47页 |
| 4.3.6 单域重链抗体的活性鉴定 | 第47-49页 |
| 4.4 本章小结 | 第49-51页 |
| 第五章 结论与展望 | 第51-53页 |
| 5.1 结论 | 第51页 |
| 5.2 存在问题与展望 | 第51-53页 |
| 5.2.1 存在问题 | 第51页 |
| 5.2.2 展望 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 全氟辛酸特异性单域重链抗体的制备 | 第59-65页 |
| 参考文献 | 第64-65页 |
