| 英汉缩略语名词对照 | 第7-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| 英文摘要 | 第10-11页 |
| 第一章 引言 | 第12-19页 |
| 第一节 乳腺癌化疗耐药机制概要 | 第13-15页 |
| 1.1.1 化疗耐药的分类 | 第13页 |
| 1.1.2.乳腺癌化疗耐药机制的研究进展 | 第13-15页 |
| 第二节 DNA损伤应答在化疗耐药中的作用 | 第15-16页 |
| 1.2.1 DNA损伤应答概述 | 第15-16页 |
| 1.2.2 ATM在DDR中的作用 | 第16页 |
| 第三节 ZEB1的功能及研究进展 | 第16-19页 |
| 1.3.1 ZEB1基因概述 | 第16-17页 |
| 1.3.2 ZEB1与肿瘤的关系 | 第17-19页 |
| 第二章 实验材料与实验仪器 | 第19-27页 |
| 第一节 实验材料 | 第19-20页 |
| 2.1.1 细胞系及其来源 | 第19页 |
| 2.1.2 菌株名称及其来源 | 第19页 |
| 2.1.3 相关质粒及其来源 | 第19页 |
| 2.1.4 实验动物及其来源 | 第19-20页 |
| 2.1.5 人乳腺癌组织切片及其来源 | 第20页 |
| 第二节 实验试剂 | 第20-25页 |
| 2.2.1 抗体及其来源 | 第20-21页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第21-22页 |
| 2.2.3 试剂的配制 | 第22-25页 |
| 第三节 实验仪器 | 第25-27页 |
| 2.3.1 实验用到的主要仪器设备 | 第25-27页 |
| 第三章 实验方法 | 第27-57页 |
| 第一节 免疫组织化学及HE染色 | 第27-30页 |
| 3.1.1 人乳腺癌组织切片免疫组织化学染色 | 第27-28页 |
| 3.1.2 人乳腺癌组织免疫组织化学染色评分 | 第28-29页 |
| 3.1.3 HE染色 | 第29-30页 |
| 第二节 细胞培养 | 第30-32页 |
| 3.2.1 培养基的选择及配方 | 第30页 |
| 3.2.2 细胞复苏 | 第30-31页 |
| 3.2.3 细胞传代 | 第31页 |
| 3.2.4 细胞冻存 | 第31-32页 |
| 第三节 细胞RNA提取、反转录及PCR | 第32-36页 |
| 3.3.1 Trizol法提取细胞的总RNA | 第32页 |
| 3.3.2 反转录 | 第32-33页 |
| 3.3.3 RT-PCR反应 | 第33-34页 |
| 3.3.4 实时荧光定量PCR反应（Real time PCR） | 第34-35页 |
| 3.3.5 引物序列信息 | 第35-36页 |
| 第四节 目的基因慢病毒载体的构建及病毒包装 | 第36-44页 |
| 3.4.1 目的基因慢病毒过表达载体的构建 | 第36-41页 |
| 3.4.2 目的基因慢病毒基因沉默（shRNA）载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.4.3 慢病毒包装（Lentivirus） | 第43-44页 |
| 第五节 稳定细胞系的构建 | 第44-46页 |
| 3.5.1 人乳腺癌细胞系MDA-MB-231的培养 | 第44-45页 |
| 3.5.2 慢病毒感染人乳腺癌细胞系MDA-MB-231 | 第45-46页 |
| 第六节 CCK8细胞增殖、Western blot及免疫荧光 | 第46-50页 |
| 3.6.1 CCK8细胞增殖实验 | 第46-47页 |
| 3.6.2 Western Blot检测各组蛋白的表达 | 第47-49页 |
| 3.6.3 免疫荧光（Immunofluorescence Staining） | 第49-50页 |
| 第七节 免疫沉淀（IP）及染色质免疫共沉淀(Ch IP) | 第50-53页 |
| 3.7.1 免疫沉淀（IP） | 第50页 |
| 3.7.2 染色质免疫共沉淀(ChIP) | 第50-53页 |
| 第八节 ATM启动子截短和突变分析 | 第53-55页 |
| 3.8.1 ATM不同截短长度启动子的荧光素酶报告基因质粒的构建 | 第53页 |
| 3.8.2 分析ATM启动子ZEB1结合位点并对该位点进行定点突变 | 第53-54页 |
| 3.8.3 荧光素酶活性的检测方法 | 第54-55页 |
| 第九节 动物实验 | 第55-56页 |
| 3.9.1 裸鼠成瘤实验 | 第55-56页 |
| 3.9.2 标本的处理 | 第56页 |
| 第十节 统计学分析 | 第56-57页 |
| 第四章 实验结果 | 第57-85页 |
| 第一节 ZEB1促进乳腺癌化疗耐药的作用 | 第57-62页 |
| 4.1.1 ZEB1在人乳腺癌组织中的表达与化疗耐药的关系 | 第57-58页 |
| 4.1.2 ZEB1过表达及表达沉默稳定细胞系的构建 | 第58-59页 |
| 4.1.3 ZEB1在化疗药物诱导乳腺癌细胞生长抑制中的作用 | 第59-62页 |
| 第二节 ZEB1调控化疗药物诱导的DDR | 第62-70页 |
| 4.2.1 ZEB1表达变化对不同化疗药物诱导 γH2AX表达的影响 | 第63-64页 |
| 4.2.2 ZEB1过表达对不同化疗药物诱导 γH2AX foci产生的影响 | 第64-65页 |
| 4.2.3 ZEB1表达沉默对不同化疗药物诱导 γH2AX foci产生的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.4 ZEB1表达变化对化疗药物诱导的细胞周期检验点信号通路的影响 | 第66-68页 |
| 4.2.5 ZEB1促进乳腺癌细胞损伤后的DNA同源重组修复 | 第68-70页 |
| 第三节 ZEB1下游靶基因的确定 | 第70-72页 |
| 4.3.1 ChIP-seq筛选转录因子ZEB1的靶基因 | 第70页 |
| 4.3.2 ChIP检测ZEB1与耐药相关的靶基因结合 | 第70页 |
| 4.3.3 TCGA数据库分析ZEB1与耐药相关靶基因的相关性 | 第70-72页 |
| 第四节 ZEB1对ATM的调控作用 | 第72-78页 |
| 4.4.1 ZEB1对ATM启动子的转录激活作用 | 第72-73页 |
| 4.4.2 ZEB1/P300/PCAF复合物对ATM的转录调控作用 | 第73-74页 |
| 4.4.3 ZEB1调控ATM的表达 | 第74-78页 |
| 第五节 ZEB1通过激活ATM介导乳腺癌化疗耐药 | 第78-82页 |
| 4.5.1 稳定细胞系的构建 | 第78页 |
| 4.5.2 ATM表达沉默后逆转了ZEB1介导的乳腺癌化疗耐药 | 第78-79页 |
| 4.5.3 ZEB1/231中沉默ATM增加了EPI和ETOP诱导的 γH2AX的产生 | 第79-80页 |
| 4.5.4 ATM抑制剂KU55933增加了EPI和ETOP诱导的 γH2AX的产生 | 第80-82页 |
| 第六节 ZEB1调控乳腺癌化疗耐药的体内研究 | 第82-85页 |
| 4.6.1 裸鼠移植瘤模型的构建 | 第82-83页 |
| 4.6.2 ZEB1调控ATM表达的体内研究 | 第83-85页 |
| 第五章 讨论 | 第85-88页 |
| 结论 | 第88-89页 |
| 展望与不足 | 第89-90页 |
| 参考文献 | 第90-97页 |
| 文献综述 | 第97-108页 |
| 参考文献 | 第105-108页 |
| 致谢 | 第108-110页 |
| 攻读学位期间发表学术论文及研究成果 | 第110页 |
