| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-18页 |
| 1.1 哈密瓜采后病害研究现状 | 第10-11页 |
| 1.1.1 哈密瓜主要致病真菌研究 | 第10页 |
| 1.1.2 哈密瓜致病真菌防治研究 | 第10-11页 |
| 1.2 植物与病原菌相互作用 | 第11-12页 |
| 1.2.1 植物与病原菌相互作用研究 | 第11-12页 |
| 1.2.2 病程相关蛋白 | 第12页 |
| 1.3 植物几丁质酶研究现状 | 第12-16页 |
| 1.3.1 几丁质酶基本特性、结构、分类 | 第13-14页 |
| 1.3.2 几丁质酶作用 | 第14-15页 |
| 1.3.3 几丁质酶的克隆表达研究 | 第15-16页 |
| 1.4 实时荧光定量PCR技术及其应用 | 第16-17页 |
| 1.4.1 实时荧光定量PCR原理 | 第16页 |
| 1.4.2 实时荧光定量PCR在植物研究中的应用 | 第16-17页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第17-18页 |
| 第二章 哈密瓜中两个几丁质酶基因的克隆及生物信息学分析 | 第18-37页 |
| 2.1 实验材料 | 第18页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第18页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第18页 |
| 2.1.3 主要仪器 | 第18页 |
| 2.2 实验方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 几丁质酶基因的筛选 | 第18-19页 |
| 2.2.2 总RNA提取 | 第19页 |
| 2.2.3 逆转录合成cDNA | 第19-21页 |
| 2.2.4 引物设计 | 第21页 |
| 2.2.5 目的基因扩增 | 第21-22页 |
| 2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第22页 |
| 2.2.7 克隆测序 | 第22-23页 |
| 2.2.8 序列分析及编码蛋白质生物信息学分析 | 第23页 |
| 2.3 结果与分析 | 第23-35页 |
| 2.3.1 总RNA的提取 | 第23-24页 |
| 2.3.2 RT-PCR产物分析 | 第24-25页 |
| 2.3.3 cDNA序列分析 | 第25-28页 |
| 2.3.4 两个几丁质酶基因编码蛋白理化性质预测 | 第28-29页 |
| 2.3.5 信号肽预测 | 第29-30页 |
| 2.3.6 蛋白质二级结构的预测分析 | 第30-31页 |
| 2.3.7 跨膜区域和亚细胞定位的预测 | 第31-32页 |
| 2.3.8 蛋白质三级结构预测 | 第32-33页 |
| 2.3.9 构建系统发育树 | 第33-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 第三章 青霉菌侵染前后HmCHI与HmCHT-2 基因表达量的研究 | 第37-43页 |
| 3.1 实验材料 | 第37页 |
| 3.1.1 青霉菌孢子悬浮液 | 第37页 |
| 3.1.2 植物材料 | 第37页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-38页 |
| 3.2.1 总RNA提取及逆转录 | 第37页 |
| 3.2.2 RT-qRCR引物设计 | 第37-38页 |
| 3.2.3 RT-qPCR检测 | 第38页 |
| 3.2.4 数据处理 | 第38页 |
| 3.3 结果与分析 | 第38-41页 |
| 3.3.1 总RNA提取结果 | 第38-39页 |
| 3.3.2 荧光定量可靠性分析 | 第39-40页 |
| 3.3.3 HmCHI的表达量分析 | 第40-41页 |
| 3.3.4 HmCHT-2 的表达量分析 | 第41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-43页 |
| 3.4.1 ClassIII类几丁质酶表达特点 | 第42页 |
| 3.4.2 ClassI类几丁质酶表达特点 | 第42-43页 |
| 第四章 哈密瓜中几丁质酶活性测定 | 第43-48页 |
| 4.1 实验材料 | 第43页 |
| 4.1.1 青霉菌孢子悬浮液 | 第43页 |
| 4.1.2 植物材料 | 第43页 |
| 4.1.3 主要试剂 | 第43页 |
| 4.1.4 主要仪器 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 试剂配制 | 第43-44页 |
| 4.2.2 1%胶体几丁质的制备 | 第44页 |
| 4.2.3 标准曲线的绘制 | 第44页 |
| 4.2.4 粗酶液的提取 | 第44页 |
| 4.2.5 酶活性的测定 | 第44页 |
| 4.2.6 数据处理 | 第44-45页 |
| 4.3 结果与分析 | 第45-46页 |
| 4.3.1 标准曲线的绘制 | 第45页 |
| 4.3.2 几丁质酶活性的变化 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论 | 第46-48页 |
| 第五章 结论 | 第48-50页 |
| 参考文献 | 第50-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简介 | 第56-57页 |
| 导师评阅表 | 第57页 |