| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6页 |
| 第1章 绪论 | 第9-22页 |
| 1.1 高血压的治疗及保健概述 | 第9-10页 |
| 1.1.1 血管紧张素转移酶的结构特点 | 第9-10页 |
| 1.1.2 高血压的形成及降血压机理 | 第10页 |
| 1.2 血管紧张素转移酶抑制剂概述 | 第10-13页 |
| 1.2.1 具有生物学功能的活性肽及制备方法 | 第11-12页 |
| 1.2.2 降血压肽的结构特点 | 第12-13页 |
| 1.3 食品蛋白来源的降血压肽 | 第13-19页 |
| 1.3.1 制备原料的选择 | 第14页 |
| 1.3.2 制备方法概述 | 第14-19页 |
| 1.3.3 降血压肽特点及活性的影响因素 | 第19页 |
| 1.4 ACE抑制肽的活性检测 | 第19-21页 |
| 1.4.1 体外检测方法 | 第19-20页 |
| 1.4.2 动物实验 | 第20-21页 |
| 1.5 本课题研究背景、目的和主要内容 | 第21-22页 |
| 第2章 实验材料与方法 | 第22-33页 |
| 2.1 材料与试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.1 原料处理 | 第22页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第22-23页 |
| 2.1.3 实验仪器 | 第23页 |
| 2.2 检测方法 | 第23-33页 |
| 2.2.1 蛋白浓度的测定——Lowry法 | 第23-25页 |
| 2.2.2 水解度(DH)的测定——pH-stat法: | 第25页 |
| 2.2.3 分子量测定——SDS-PAGE凝胶电泳 | 第25-27页 |
| 2.2.4 体外ACEI活性的测定 | 第27-33页 |
| 第3章 酶解条件的优化 | 第33-52页 |
| 3.1 前言 | 第33页 |
| 3.2 碱性蛋白酶(Alcalse)最适酶解条件的确定 | 第33-36页 |
| 3.2.1 碱性蛋白酶酶解正交实验 | 第33-35页 |
| 3.2.2 碱性蛋白酶的酶解产物中水解度(DH)与ACE抑制率(ACEI)的关系 | 第35页 |
| 3.2.3 碱性蛋白酶水解产物的半抑制浓度IC_(50) | 第35-36页 |
| 3.3 复合风味蛋白酶(Flavourzyme)最适条件的确定 | 第36-40页 |
| 3.3.1 复合风味蛋白酶的正交实验 | 第36-38页 |
| 3.3.2 复合风味蛋白酶的酶解产物中水解度(DH)与ACE抑制率(ACEI)的关系 | 第38-39页 |
| 3.3.3 复合风味蛋白酶水解产物的半抑制浓度IC_(50) | 第39-40页 |
| 3.4 胃蛋白酶(Pepsin)最适条件的确定 | 第40-42页 |
| 3.4.1 胃蛋白酶的正交实验 | 第40-42页 |
| 3.4.2 胃蛋白酶水解产物的半抑制浓度IC_(50) | 第42页 |
| 3.5 胃蛋白酶和碱性蛋白酶的复合酶解 | 第42-44页 |
| 3.5.1 复合酶解产物的水解度测定 | 第43页 |
| 3.5.2 复合酶解产物的ACE抑制活性检测 | 第43-44页 |
| 3.6 复合酶解的优化 | 第44-51页 |
| 3.6.1 复合酶酶解的因子实验设计(Fractional Fratorial Design) | 第44-47页 |
| 3.6.2 中心复合设计(Central Composite Design) | 第47-48页 |
| 3.6.3 相应面优化结果等高线分析及相应三维曲面图(Response Optimization) | 第48-50页 |
| 3.6.4 优化结果的验证 | 第50-51页 |
| 3.7 本章小结 | 第51-52页 |
| 第4章 酶解样品的分离及纯化 | 第52-68页 |
| 4.1 前言 | 第52页 |
| 4.2 酶解样品的超滤及活性分布 | 第52-54页 |
| 4.2.1 酶解样品的超滤及分子量的判定 | 第52-54页 |
| 4.2.2 超滤样品的活性分布 | 第54页 |
| 4.2.3 酶空白的ACE抑制率 | 第54页 |
| 4.3 MW5000透过液的高效液相色谱(HPLC)分离及各峰的活性的测定 | 第54-57页 |
| 4.3.1 MW5000透过液的HPLC分离 | 第55页 |
| 4.3.2 MW5000透过液的制备分离 | 第55-56页 |
| 4.3.3 各组分活性的测定 | 第56-57页 |
| 4.4 液质联用谱分析肽的组成 | 第57-62页 |
| 4.4.1 e峰的液质联用分析肽的组成 | 第58-59页 |
| 4.4.2 g1峰的液质联用分析肽的组成 | 第59-60页 |
| 4.4.3 g2峰的液质联用分析肽的组成 | 第60-62页 |
| 4.5 合成肽活性的测定及抑制类型判定 | 第62-64页 |
| 4.5.1 合成样品对ACE抑制活性 | 第62页 |
| 4.5.2 7肽ISVPGPM (SEQ NO.1)对酶ACE的抑制类型 | 第62-63页 |
| 4.5.3 10肽LGPVGNPGPA (SEQ NO.2)对酶ACE的抑制类型 | 第63-64页 |
| 4.6 合成ACE抑制肽的稳定性质研究 | 第64-66页 |
| 4.6.1 合成肽的酶解 | 第64页 |
| 4.6.2 酶解产物的分离和鉴定 | 第64-66页 |
| 4.6.3 酶解产物的合成肽的活性 | 第66页 |
| 4.7 本章小结 | 第66-68页 |
| 第5章 总结与展望 | 第68-70页 |
| 5.1 总结 | 第68页 |
| 5.1.1 以牛皮为原料制备ACE抑制肽的酶解条件的优化 | 第68页 |
| 5.1.2 酶解产物的分离纯化得到具有ACE抑制活性的肽并解析其结构组成 | 第68页 |
| 5.1.3 模拟胃肠道消化试验 | 第68页 |
| 5.2 展望 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-74页 |
| 致谢 | 第74页 |
