| 摘要 | 第2-3页 |
| Abstract | 第3页 |
| 引言 | 第6-8页 |
| 第1章 实验材料 | 第8-10页 |
| 1.1 细胞株 | 第8页 |
| 1.2 主要试剂耗材 | 第8-9页 |
| 1.3 主要仪器 | 第9-10页 |
| 第2章 实验方法 | 第10-17页 |
| 2.1 人神经母细胞瘤SH-SY5Y细胞系的体外培养 | 第10页 |
| 2.2 Transwell测定细胞侵袭能力 | 第10-11页 |
| 2.2.1 包被基底膜 | 第10页 |
| 2.2.2 水化基底膜 | 第10页 |
| 2.2.3 接种细胞 | 第10页 |
| 2.2.4 细胞培养 | 第10-11页 |
| 2.2.5 细胞固定、计数 | 第11页 |
| 2.3 划痕实验测定测定细胞迁移能力 | 第11页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第11页 |
| 2.3.2 划痕 | 第11页 |
| 2.3.3 细胞培养 | 第11页 |
| 2.3.4 计算细胞距离 | 第11页 |
| 2.4 实时定量(Real-time)PCR检测MMP2、MMP9 mRNA相对表达量 | 第11-13页 |
| 2.4.1 总RNA的提取 | 第11-12页 |
| 2.4.2 RNA琼脂糖电泳检测RNA纯度和完整性 | 第12页 |
| 2.4.3 cDNA的合成 | 第12-13页 |
| 2.4.4 Real-time PCR检测mRNA相对表达 | 第13页 |
| 2.5 Western Blotting检测MMP2，MMP9，pSTAT3的相对表达量 | 第13-16页 |
| 2.5.1 试剂配制 | 第13-14页 |
| 2.5.2 总蛋白质的提取 | 第14页 |
| 2.5.3 BCA法测定总蛋白浓度 | 第14页 |
| 2.5.4 制备聚丙烯酰胺凝胶 | 第14-15页 |
| 2.5.5 SDS-PAGE电泳 | 第15页 |
| 2.5.6 半干法转膜 | 第15页 |
| 2.5.7 封闭 | 第15页 |
| 2.5.8 孵育抗体 | 第15-16页 |
| 2.5.9 显色 | 第16页 |
| 2.6 统计学方法 | 第16-17页 |
| 第3章 实验结果 | 第17-22页 |
| 3.1 Isatin对SH-SY5Y细胞侵袭的影响 | 第17页 |
| 3.2 Isatin对SH-SY5Y细胞迁移的影响 | 第17-18页 |
| 3.3 Isatin对MMP2、MMP9 mRNA相对表达量的影响 | 第18-19页 |
| 3.4 Isatin对MMP2、MMP9蛋白相对表达量的影响 | 第19-20页 |
| 3.5 Isatin对STAT3 Tyr705位点磷酸化的影响 | 第20-22页 |
| 第4章 讨论 | 第22-25页 |
| 结论 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-32页 |
| 综述 神经母细胞瘤转移分子机制的研究进展 | 第32-53页 |
| 综述参考文献 | 第44-53页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第53-54页 |
| 致谢 | 第54-55页 |
