| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 引言 | 第10页 |
| 1.2 3-HP的合成 | 第10-11页 |
| 1.2.1 3-HP的化学合成 | 第10-11页 |
| 1.2.2 3-HP的生物合成 | 第11页 |
| 1.3 微生物生产3-HP的途径 | 第11-12页 |
| 1.3.1 以葡萄糖为底物生产3-HP | 第11页 |
| 1.3.2 以甘油为底物生产3-HP | 第11-12页 |
| 1.4 甘油代谢生产3-HP途径中的关键酶 | 第12-14页 |
| 1.4.1 甘油脱水酶 | 第12-13页 |
| 1.4.2 醛脱氢酶 | 第13-14页 |
| 1.5 3-HP表达体系的研究 | 第14-16页 |
| 1.5.1 E.coli表达体系 | 第14-15页 |
| 1.5.2 K. pneumoniae表达体系探究 | 第15-16页 |
| 1.6 本文选题依据和研究内容 | 第16-18页 |
| 第二章 合成3-羟基丙酸的关键酶醛脱氢酶在K.pneumoniae中的克隆和表达 | 第18-32页 |
| 2.1 引言 | 第18页 |
| 2.2 材料与方法 | 第18-23页 |
| 2.2.1 质粒与菌株 | 第18-19页 |
| 2.2.2 酶与试剂 | 第19页 |
| 2.2.3 培养基 | 第19页 |
| 2.2.4 实验仪器 | 第19-20页 |
| 2.2.5 实验方法 | 第20-23页 |
| 2.3 结果与讨论 | 第23-31页 |
| 2.3.1 质粒pUC19Kan的构建与验证 | 第23-24页 |
| 2.3.2 表达载体pUC19Kan/KGSADH和pUC19Kan/GabD4的构建与验证 | 第24-26页 |
| 2.3.3 K.pneumoniae重组菌发酵与醛脱氢酶酶活的测定 | 第26-27页 |
| 2.3.4 摇瓶发酵过程中甘油的消耗 | 第27页 |
| 2.3.5 摇瓶发酵过程中菌体生长情况 | 第27-28页 |
| 2.3.6 摇瓶发酵过程中 3-HP的变化 | 第28页 |
| 2.3.7 摇瓶发酵过程中 1,3-PDO的变化 | 第28-30页 |
| 2.3.8 摇瓶发酵过程中副产物的变化 | 第30-31页 |
| 2.4 本章小结 | 第31-32页 |
| 第三章 重组菌KpKan/KGSADH摇瓶产3-HP的发酵条件优化 | 第32-46页 |
| 3.1 引言 | 第32页 |
| 3.2 材料与方法 | 第32-34页 |
| 3.2.1 仪器与试剂 | 第32页 |
| 3.2.2 实验方法 | 第32-33页 |
| 3.2.3 培养条件优化 | 第33-34页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第34-44页 |
| 3.3.1 确定最佳底物浓度 | 第34-36页 |
| 3.3.2 确定最佳初始氮源浓度 | 第36-37页 |
| 3.3.3 确定最佳初始pH | 第37-38页 |
| 3.3.4 确定摇瓶的最佳装液量 | 第38-39页 |
| 3.3.5 确定最佳摇瓶接种量 | 第39-41页 |
| 3.3.6 分批补加甘油对3-HP产量的影响 | 第41-42页 |
| 3.3.7 流加控制pH对3-HP产量的影响 | 第42-44页 |
| 3.4 本章小结 | 第44-46页 |
| 第四章 重组菌KpKan/KGSADH发酵罐扩大生产3-HP的研究 | 第46-56页 |
| 4.1 引言 | 第46页 |
| 4.2 材料与方法 | 第46-47页 |
| 4.2.1 仪器与试剂 | 第46页 |
| 4.2.2 试验方法 | 第46-47页 |
| 4.3 发酵罐水平发酵 | 第47-48页 |
| 4.3.1 5L罐发酵条件 | 第47页 |
| 4.3.2 不控制pH发酵 | 第47页 |
| 4.3.3 分段调控pH发酵 | 第47页 |
| 4.3.4 持续调控pH发酵 | 第47-48页 |
| 4.3.5 持续调控pH结合分批补加甘油发酵 | 第48页 |
| 4.4 结论与讨论 | 第48-54页 |
| 4.4.1 不控制pH发酵 | 第48-49页 |
| 4.4.2 分段调控pH发酵 | 第49-51页 |
| 4.4.3 持续调控pH发酵 | 第51-52页 |
| 4.4.4 持续调控pH结合分批补加甘油发酵 | 第52-54页 |
| 4.5 本章小结 | 第54-56页 |
| 第五章 总结与展望 | 第56-58页 |
| 5.1 实验结论 | 第56-57页 |
| 5.2 展望 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66-67页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文情况 | 第67页 |
