| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 第一章 前言 | 第12-23页 |
| 1.1 课题提出 | 第12-13页 |
| 1.2 植物在涝害胁迫下的响应 | 第13-15页 |
| 1.2.1 植物在涝害胁迫下的生理反应 | 第13-14页 |
| 1.2.2 植物在涝害胁迫下的代谢途径 | 第14页 |
| 1.2.3 植物涝害胁迫下基因表达调控 | 第14-15页 |
| 1.3 热激蛋白研究进展 | 第15-18页 |
| 1.3.1 热激蛋白的分类及特点 | 第15-16页 |
| 1.3.2 HSP的生物学功能 | 第16页 |
| 1.3.3 HSP的表达调控 | 第16-17页 |
| 1.3.4 HSP90 研究进展 | 第17-18页 |
| 1.4 甜瓜组织培养与遗传转化的研究进展 | 第18-22页 |
| 1.4.1 甜瓜组织培养研究进展 | 第18-20页 |
| 1.4.2 甜瓜遗传转化研究进展 | 第20-22页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第22-23页 |
| 第二章 材料与方法 | 第23-38页 |
| 2.1 试验材料 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 菌种、质粒及各种化学试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 CmHSP83 基因淹水胁迫表达分析 | 第24-26页 |
| 2.2.1 试验方法 | 第24页 |
| 2.2.2 总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.3 反转录cDNA第一链的合成 | 第25页 |
| 2.2.4 CmHSP83 基因表达分析 | 第25-26页 |
| 2.3 CmHSP83 基因的克隆与载体构建 | 第26-31页 |
| 2.3.1 感受态制备 | 第26-27页 |
| 2.3.2 引物设计 | 第27-28页 |
| 2.3.3 CmHSP83 基因克隆 | 第28-29页 |
| 2.3.4 表达载体构建 | 第29-31页 |
| 2.4 甜瓜耐涝相关基因CmHSP83 的生物信息学分析 | 第31-33页 |
| 2.4.1 序列翻译和开放阅读框ORF查找 | 第32页 |
| 2.4.2 蛋白质保守结构域的预测分析 | 第32页 |
| 2.4.3 氨基酸的理化性质及蛋白质定位的预测分析 | 第32页 |
| 2.4.4 同源性搜索和进化树分析 | 第32-33页 |
| 2.5 甜瓜再生体系的建立 | 第33-34页 |
| 2.5.1 外植体的获取 | 第33页 |
| 2.5.2 诱导不定芽（丛生芽）的影响因素 | 第33页 |
| 2.5.3 KT对不定芽伸长的影响 | 第33页 |
| 2.5.4 诱导再生苗生根情况 | 第33页 |
| 2.5.5 再生苗的驯化移栽 | 第33-34页 |
| 2.6 CmHSP83 基因对甜瓜的遗传转化 | 第34-35页 |
| 2.6.1 抗生素敏感性检测 | 第34页 |
| 2.6.2 农杆菌菌液的制备 | 第34页 |
| 2.6.3 预培养对转化的影响 | 第34-35页 |
| 2.6.4 共培养对转化的影响 | 第35页 |
| 2.6.5 菌液浓度对转化的影响 | 第35页 |
| 2.6.7 侵染时间对转化的影响 | 第35页 |
| 2.7 抗性植株的检测 | 第35-38页 |
| 2.7.1 Kan抗性分析 | 第35-36页 |
| 2.7.2 GUS检测 | 第36页 |
| 2.7.3 转基因甜瓜植株的PCR检测 | 第36-38页 |
| 第三章 结果与分析 | 第38-59页 |
| 3.1 淹水胁迫后甜瓜CmHSP83 的表达分析 | 第38-39页 |
| 3.2 CmHSP83 基因的克隆及超量表达载体构建 | 第39-41页 |
| 3.3 甜瓜耐涝相关基因CmHSP83 的生物信息学分析 | 第41-45页 |
| 3.3.1 序列翻译和开放阅读框ORF查找 | 第41-43页 |
| 3.3.2 蛋白质保守结构域的预测分析 | 第43页 |
| 3.3.3 氨基酸的理化性质及蛋白质定位预测分析 | 第43-44页 |
| 3.3.4 同源性搜索和进化树分析 | 第44-45页 |
| 3.4 甜瓜再生体系的建立 | 第45-50页 |
| 3.4.1 外植体对甜瓜不定芽诱导的影响 | 第45-46页 |
| 3.4.2 不同苗龄子叶对甜瓜不定芽诱导的影响 | 第46-47页 |
| 3.4.3 6-BA浓度对甜瓜不定芽诱导的影响 | 第47-48页 |
| 3.4.4 KT浓度对甜瓜不定芽伸长的影响 | 第48-49页 |
| 3.4.5 激素种类、浓度配比对再生苗生根的影响 | 第49页 |
| 3.4.6 再生苗驯化移栽 | 第49-50页 |
| 3.5 CmHSP83 基因对甜瓜的遗传转化 | 第50-55页 |
| 3.5.1 抗生素敏感性检测 | 第50-52页 |
| 3.5.2 预培养时间对转化的影响 | 第52-53页 |
| 3.5.3 共培养时间对转化的影响 | 第53-54页 |
| 3.5.4 农杆菌菌液浓度对转化的影响 | 第54-55页 |
| 3.5.5 农杆菌侵染时间对转化的影响 | 第55页 |
| 3.6 抗性植株的检测 | 第55-59页 |
| 3.6.1 再生苗的抗性分析 | 第55-56页 |
| 3.6.2 抗性植株的GUS组织化学检测 | 第56-57页 |
| 3.6.3 抗性植株的PCR检测 | 第57-59页 |
| 第四章 讨论 | 第59-63页 |
| 4.1 甜瓜CmHSP83 基因淹水胁迫表达分析 | 第59页 |
| 4.2 甜瓜CmHSP83 基因生物信息学分析 | 第59-60页 |
| 4.3 甜瓜再生体系的建立 | 第60-61页 |
| 4.4 CmHSP83 基因对甜瓜的遗传转化 | 第61-62页 |
| 4.5 甜瓜转基因植株检测 | 第62-63页 |
| 第五章 小结 | 第63-64页 |
| 参考文献 | 第64-71页 |
| 致谢 | 第71-72页 |
| 附录Ⅰ 甜瓜再生与遗传转化体系 | 第72-74页 |
| 附录Ⅱ GUS染色方法 | 第74页 |
