| 摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 缩略词表（Abbreviation words） | 第12-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-24页 |
| 1.1 化学去核的意义 | 第13页 |
| 1.2 化学去核法研究进展 | 第13-18页 |
| 1.2.1 牛的化学去核研究进展 | 第14-15页 |
| 1.2.2 猪的化学去核研究进展 | 第15-16页 |
| 1.2.3 羊的化学去核研究进展 | 第16页 |
| 1.2.4 兔的化学去核研究进展 | 第16-17页 |
| 1.2.5 小鼠的化学去核研究进展 | 第17-18页 |
| 1.3 成熟促进因子与核重编程 | 第18-19页 |
| 1.3.1 成熟促进因子 | 第18-19页 |
| 1.3.2 成熟促进因子影响核重编程 | 第19页 |
| 1.4 氧化应激与重构胚发育能力 | 第19-21页 |
| 1.4.1 胞质内源性物质支持重构胚发育 | 第19-20页 |
| 1.4.2 氧化应激损伤胞质内源性物质 | 第20-21页 |
| 1.5 秋水仙碱用于小鼠卵母细胞去核的研究 | 第21-24页 |
| 1.5.1 秋水仙碱 | 第21-22页 |
| 1.5.2 乙醇激活法和SrCl_2激活法 | 第22-24页 |
| 2 研究目的和意义 | 第24-25页 |
| 3 材料方法 | 第25-38页 |
| 3.1 试验材料 | 第25-28页 |
| 3.1.1 主要设备仪器和耗材 | 第25-26页 |
| 3.1.2 试验药品试剂 | 第26页 |
| 3.1.3 试验动物 | 第26页 |
| 3.1.4 各种培养液的准备和配制 | 第26-27页 |
| 3.1.5 捡卵针的制作 | 第27页 |
| 3.1.6 培养液滴的制备 | 第27-28页 |
| 3.2 试验设计 | 第28-29页 |
| 3.2.1 秋水仙碱诱导去核的最佳浓度和作用时间摸索 | 第28页 |
| 3.2.2 激活处理对秋水仙碱解聚纺锤体的影响 | 第28页 |
| 3.2.3 秋水仙碱处理对卵母细胞质量影响 | 第28-29页 |
| 3.3 试验方法 | 第29-37页 |
| 3.3.1 卵母细胞的准备 | 第29-30页 |
| 3.3.2 秋水仙碱诱导小鼠卵母细胞去核过程 | 第30-31页 |
| 3.3.3 卵母细胞免疫荧光染色 | 第31-32页 |
| 3.3.4 卵母细胞MPF活性检测 | 第32-33页 |
| 3.3.5 卵母细胞ROS浓度检测 | 第33页 |
| 3.3.6 卵母细胞总cDNA的获取 | 第33-35页 |
| 3.3.7 RT-PCR检测Bcl-2 和cyclinB1 表达量 | 第35-37页 |
| 3.4 数据统计 | 第37-38页 |
| 4 结果分析 | 第38-53页 |
| 4.1 不同激活组联合秋水仙碱处理得到的去核效果比较 | 第38-42页 |
| 4.1.1 乙醇激活组秋水仙碱最佳去核浓度和作用时间 | 第38-40页 |
| 4.1.2 SrCl_2激活组最佳去核浓度和作用时间 | 第40-42页 |
| 4.2 乙醇激活和SrCl_2激活获得的卵母细胞去核效果比较 | 第42-43页 |
| 4.3 去核完全卵母细胞的不同形态 | 第43页 |
| 4.4 秋水仙碱处理对卵母细胞分裂能力的影响 | 第43-44页 |
| 4.5 秋水仙碱对卵母细胞微管结构的影响 | 第44-47页 |
| 4.5.1 秋水仙碱作用时间对MII期卵母细胞微管结构的影响 | 第44-45页 |
| 4.5.2 秋水仙碱对激活卵母细胞微管结构的影响 | 第45-47页 |
| 4.6 秋水仙碱对MII期卵母细胞MPF活性值的影响 | 第47-49页 |
| 4.6.1 秋水仙碱显著改变MPF活性 | 第47-48页 |
| 4.6.2 秋水仙碱改变cyclinB1 表达量 | 第48-49页 |
| 4.7 秋水仙碱处理对卵母细胞ROS浓度的影响 | 第49-51页 |
| 4.7.1 秋水仙碱显著降低激活卵母细胞ROS浓度 | 第49-50页 |
| 4.7.2 秋水仙碱显著提高MII期卵母细胞ROS浓度 | 第50-51页 |
| 4.8 秋水仙碱处理对卵母细胞胞质内Bcl-2 表达量的影响 | 第51-53页 |
| 4.8.1 秋水仙碱处理MII期卵母细胞Bcl-2 表达量异常 | 第51-52页 |
| 4.8.2 秋水仙碱处理激活卵母细胞降低Bcl-2 表达量 | 第52-53页 |
| 5 讨论 | 第53-57页 |
| 5.1 不同激活方法影响秋水仙碱去核效果 | 第53-54页 |
| 5.2 秋水仙碱改变微管结构形态 | 第54页 |
| 5.3 秋水仙碱影响MPF活性值和cyclin B1 表达量 | 第54-55页 |
| 5.4 秋水仙碱处理改变ROS浓度和Bcl-2 表达量 | 第55-57页 |
| 6 总结 | 第57-58页 |
| 6.1 本研究小结 | 第57页 |
| 6.2 本研究的创新点 | 第57页 |
| 6.3 本研究的不足和下一步研究计划 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
