| 中文摘要 | 第3-5页 |
| 英文摘要 | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第12-13页 |
| 1 绪论 | 第13-25页 |
| 1.1 引言 | 第13页 |
| 1.2 文献综述 | 第13-23页 |
| 1.2.1 DET1抑制植物光形态建成 | 第13-15页 |
| 1.2.2 DET1参与（GA）信号通路 | 第15-17页 |
| 1.2.3 DET1参与ABA信号通路 | 第17-19页 |
| 1.2.4 DET1参与紫外修复 | 第19-21页 |
| 1.2.5 DET1调控光节律性 | 第21-23页 |
| 1.3 研究目的和意义 | 第23页 |
| 1.4 主要研究内容 | 第23-24页 |
| 1.5 技术路线 | 第24-25页 |
| 2 水稻OsDET1启动子启动模式研究 | 第25-51页 |
| 2.1 研究背景 | 第25页 |
| 2.2 实验材料和仪器 | 第25页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第25页 |
| 2.2.2 载体和试剂盒 | 第25页 |
| 2.3 实验方法 | 第25-37页 |
| 2.3.1 实验材料准备和样品预处理 | 第25-26页 |
| 2.3.2 OsDET1时空表达模式和环境胁迫下表达模式分析 | 第26-28页 |
| 2.3.3 Pro::OsDET1序列扩增 | 第28-30页 |
| 2.3.4 OsDET1启动子Pro::OsDET1克隆 | 第30-31页 |
| 2.3.5 1381Z-P::OsDET1-GUS和p BI121-P::OsDET1-GUS载体构建和农杆菌转化 | 第31-35页 |
| 2.3.6 农杆菌介导的水稻转化 | 第35-36页 |
| 2.3.7 农杆菌介导的烟草遗传转化 | 第36-37页 |
| 2.3.8 GUS组织化学染色及显微观察 | 第37页 |
| 2.4 实验结果 | 第37-48页 |
| 2.4.1 Plant CARE分析OsDET1启动子调控元件 | 第37-39页 |
| 2.4.2 OsDET1基因对外界胁迫的响应。 | 第39-41页 |
| 2.4.3 胁迫条件下OsDET1基因的动态表达 | 第41-42页 |
| 2.4.4 OsDET1基因的节律性和光周期 | 第42-44页 |
| 2.4.5 OsDET1基因的时空表达模式 | 第44-45页 |
| 2.4.6 衰老诱导OsDET1基因表达 | 第45-46页 |
| 2.4.7 水稻OsDET1基因启动子启动GUS表达分析 | 第46-48页 |
| 2.5 讨论 | 第48-51页 |
| 3 RNA-seq分析OsDET1在水稻中的功能 | 第51-67页 |
| 3.1 研究背景 | 第51页 |
| 3.2 实验材料 | 第51页 |
| 3.3 实验材料准备和样品预处理 | 第51页 |
| 3.4 实验结果 | 第51-65页 |
| 3.4.1 mRNA-Seq测序数据质量评估 | 第51-52页 |
| 3.4.2 mRNA-Seq序列与参考基因组比对分析 | 第52-53页 |
| 3.4.3 RNA-seq整体质量评估 | 第53-54页 |
| 3.4.4 基因表达水平对比 | 第54-55页 |
| 3.4.5 差异表达基因筛选 | 第55-57页 |
| 3.4.6 WT和DRI-16 差异基因GO富集 | 第57-63页 |
| 3.4.7 差异基因KEGG富集分析 | 第63-65页 |
| 3.5 讨论 | 第65-67页 |
| 4 OsDET1互作蛋白分析 | 第67-83页 |
| 4.1 研究背景 | 第67页 |
| 4.2 材料和试剂 | 第67页 |
| 4.2.1 菌株和载体 | 第67页 |
| 4.2.2 试剂和试剂盒 | 第67页 |
| 4.3 实验方法和步骤 | 第67-74页 |
| 4.3.1 植物总RNA的提取 | 第67页 |
| 4.3.2 poly+ mRNA富集 | 第67-68页 |
| 4.3.3 酵母双杂交文库构建 | 第68-70页 |
| 4.3.4 对照实验 | 第70页 |
| 4.3.5 诱饵质粒毒性和自激活检测 | 第70-71页 |
| 4.3.6 酵母双杂交 | 第71-72页 |
| 4.3.7 酵母质粒的提取 | 第72页 |
| 4.3.8 酵母质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第72页 |
| 4.3.9 小量LiAc酵母转化 | 第72-73页 |
| 4.3.10 BIFC载体构建和观察 | 第73-74页 |
| 4.3.11 转化洋葱表皮细胞 | 第74页 |
| 4.3.12 转化烟草表皮细胞 | 第74页 |
| 4.4 实验结果 | 第74-80页 |
| 4.4.1 酵母双杂交文库构建 | 第74-75页 |
| 4.4.2 pGBKT7-OsDET1载体构建和自激活和毒性检测 | 第75-76页 |
| 4.4.3 酵母文库筛选和酵母共转化验证 | 第76-79页 |
| 4.4.4 BIFC检验OsDET1和其互作蛋白在植物体内的蛋白互作 | 第79-80页 |
| 4.5 讨论 | 第80-83页 |
| 5 OsDET1调控ABA信号通路和ABA生物合成 | 第83-139页 |
| 5.1 研究背景 | 第83-85页 |
| 5.2 材料和试剂 | 第85页 |
| 5.2.1 水稻材料 | 第85页 |
| 5.2.2 载体，菌株和试剂 | 第85页 |
| 5.3 实验步骤 | 第85-96页 |
| 5.3.1 OsDET1超表达载体CaMV35S-OsDET1构建 | 第85-87页 |
| 5.3.2 OsDET1-GFPtag融合载体CaMV35S-OsDET1-GFP构建 | 第87-89页 |
| 5.3.3 OsDET1 RNAi干扰载体构建 | 第89-91页 |
| 5.3.4 生理参数测定 | 第91-92页 |
| 5.3.5 ABA含量测定 | 第92页 |
| 5.3.6 蓝绿温和电泳 | 第92-93页 |
| 5.3.7 叶绿体蛋白印迹 | 第93页 |
| 5.3.8 水稻叶片透射电镜（TEM） | 第93页 |
| 5.3.9 水稻叶片扫描电镜 （SEM） | 第93-94页 |
| 5.3.10 碱煮法快速提取水稻DNA | 第94页 |
| 5.3.11 叶片黑暗诱导衰老实验 | 第94页 |
| 5.3.12 叶片ABA诱导衰老实验 | 第94页 |
| 5.3.13 荧光定量PCR检测转基因植株的相关基因表达 | 第94-95页 |
| 5.3.14 Os05g0213500（OsPYL5）蛋白抗体制备 | 第95-96页 |
| 5.4 实验结果 | 第96-133页 |
| 5.4.1 改变OsDET1基因表达导致转基因植株多样性表型 | 第96-99页 |
| 5.4.2 干扰OsDET1基因表达不能延长叶片衰老 | 第99-100页 |
| 5.4.3 OsDET1干扰加速黑暗诱导的叶片衰老 | 第100-102页 |
| 5.4.4 衰老相关基因和叶绿素降解相关基因变化 | 第102-104页 |
| 5.4.5 OsDET1干扰导致水稻叶绿体蛋白加速降解 | 第104-106页 |
| 5.4.6 OsDET1 RNAi转基因植株叶绿体在黑暗诱导叶片衰老过程中加速瓦解 | 第106-108页 |
| 5.4.7 OsDET1干扰转基因植株在ABA诱导下加速衰老 | 第108-110页 |
| 5.4.8 OsDET1调控水稻内生ABA生物合成 | 第110-112页 |
| 5.4.9 OsDET1干扰影响转基因植株黑暗诱导情况下ABA生物合成 | 第112-113页 |
| 5.4.10 超表达OsDET1加速黑暗诱导的叶片衰老 | 第113-114页 |
| 5.4.11 超表达OsDET1影响OE-OsDET1转基因植株黑暗诱导情况下ABA生物合成 | 第114-115页 |
| 5.4.12 ABA对OE-OsDET1转基因植株叶片衰老的影响 | 第115-117页 |
| 5.4.13 OsDET1调控水稻种子萌发和幼苗形态建成 | 第117-119页 |
| 5.4.14 OsDET1 RNAi转基因植株表现ABA相关的矛盾表型 | 第119-123页 |
| 5.4.15 Os DDA1结合Os PYL和CDD复合体 | 第123-125页 |
| 5.4.16 OsDET1影响Os PYL5的降解 | 第125-127页 |
| 5.4.17 超表达OsDET1-GFP植株对ABA超敏感 | 第127-131页 |
| 5.4.18 OsDET1-GFP植株叶片在黑暗中加速衰老 | 第131-132页 |
| 5.4.19 ABA信号通路相关基因在OsDET1 RNAi转基因植株中的表达 | 第132-133页 |
| 5.5 讨论 | 第133-139页 |
| 6 结论与展望 | 第139-143页 |
| 6.1 结论 | 第139-140页 |
| 6.2 研究的创新点 | 第140-141页 |
| 6.3 后续工作展望 | 第141-143页 |
| 致谢 | 第143-145页 |
| 参考文献 | 第145-155页 |
| 附录 | 第155-158页 |
| A. 作者在攻读学位期间所发表的论文目录 | 第155页 |
| B. 作者在攻读学位期间授权的专利 | 第155页 |
| C. 作者在攻读学位期间科研项目支撑 | 第155-156页 |
| 附图 | 第156-158页 |
