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绵羊DLK1-GTL2印记区域miRNAs对DLK1基因亲和力的研究

中文摘要第7-9页
Abstract第9-10页
缩略词表第11-13页
1 前言第13-30页
    1.1 研究问题的由来第13-14页
    1.2 文献综述第14-28页
        1.2.1 Callipyge及其研究进展第14-26页
        1.2.2 DLK1-GTL2区域相关miRNA的研究进展第26-28页
    1.3 研究目的和意义第28-30页
2 材料与方法第30-46页
    2.1 本研究的技术路线第30页
    2.2 材料第30-37页
        2.2.1 样品第30页
        2.2.2 用于DLK1亲和力评估的DLK1-GTL2区域miRNA模拟物第30-37页
        2.2.3 用于DLK1亲和力评估的DLK1的转录本序列第37页
        2.2.4 构建GTL2表达载体的GTL2转录本序列第37页
    2.3 方法第37-46页
        2.3.1 绵羊DLK1基因的RACE扩增第37-38页
        2.3.2 表达载体的构建第38-39页
        2.3.3 miRNA模拟物系统的选择第39-40页
        2.3.4 miRNA模拟物的分子设计第40-42页
        2.3.5 模拟物序列的选择第42-43页
        2.3.6 细胞培养和瞬时转染第43页
        2.3.7 双荧光Western blotting第43-44页
        2.3.8 DLK1蛋白的去糖基化处理第44-45页
        2.3.9 DLK1转录本的Northern blot分析第45页
        2.3.10 miRNA对DLK1亲和力的计算第45-46页
3 结果第46-68页
    3.1 绵羊DLK1基因C2转录本的表达载体的构建和鉴定第46-52页
    3.2 成熟miRNA表达的设计第52页
    3.3 DLK1-GTL2区域单个miRNA对DLK1亲和力的测定第52-65页
    3.4 121个miRNA对DLK1亲和力评估结果的生物学相关性第65-66页
    3.5 GTL2对DLK1的可能调控作用研究第66-68页
4 讨论第68-72页
    4.1 DLK1双荧光western blot检测方法的建立第68-69页
    4.2 DLK1-GTL2印记区域miRNA的功能分析第69-70页
    4.3 DLK1-GTL2区域的miRNA中对DLK1亲和力的研究第70-72页
5 结论第72-74页
    5.1 本论文的主要研究结果及结论第72-73页
    5.2 本研究的创新点与特色第73页
    5.3 本研究的不足之处及值得进一步研究的问题第73-74页
6 其它工作:猪TCAP基因的克隆与表达谱分析第74-84页
    6.1 文献综述第74-76页
        6.1.1 骨骼肌形成过程中的肌节组装第74-75页
        6.1.2 TCAP基因研究进展第75-76页
    6.2 材料与方法第76-79页
        6.2.1 材料第76-77页
        6.2.2 方法第77-79页
    6.3 结果第79-82页
        6.3.1 猪TCAP基因的分子克隆和鉴定第79页
        6.3.2 猪TCAP基因的表达谱分析第79-81页
        6.3.3 猪TCAP基因多态性和等位基因频率的检测第81-82页
    6.4 讨论第82-84页
参考文献第84-100页
致谢第100-102页
附录1:p3.1M-DLK1-HA表达载体中转录形成的RNA序列第102-104页
附录2:构建GTL2表达载体的绵羊GTL2序列第104-105页
附录3:表1说明第105-106页
附录4:表3说明第106-107页

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