| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-36页 |
| 1.1 精原干细胞研究综述 | 第11-20页 |
| 1.1.1 精原干细胞简介 | 第11-12页 |
| 1.1.2 精原干细胞分子标记 | 第12-13页 |
| 1.1.3 精原干细胞分离纯化以及增殖与分化的调控 | 第13-17页 |
| 1.1.4 精原干细胞移植 | 第17-19页 |
| 1.1.5 精原干细胞的细胞周期调控 | 第19-20页 |
| 1.2 N6甲基腺嘌呤研究进展 | 第20-35页 |
| 1.2.1 N6甲基腺嘌呤 | 第21页 |
| 1.2.2 N6甲基腺嘌呤图谱的分析 | 第21-23页 |
| 1.2.3 N6甲基腺嘌呤的作用蛋白 | 第23-26页 |
| 1.2.4 N6甲基腺嘌呤调控子的抑制剂研究 | 第26页 |
| 1.2.5 N6甲基腺嘌呤作用机制 | 第26-31页 |
| 1.2.6 N6甲基腺嘌呤生物学功能 | 第31-35页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第35-36页 |
| 第二章 FTO抑制剂调控精原细胞的增殖 | 第36-50页 |
| 2.1 材料与方法 | 第36-41页 |
| 2.1.1 主要材料与试剂 | 第36-37页 |
| 2.1.2 主要仪器与设备 | 第37页 |
| 2.1.3 细胞培养与传代 | 第37页 |
| 2.1.4 细胞活性检测 | 第37页 |
| 2.1.5 TUNEL检测细胞凋亡 | 第37-38页 |
| 2.1.6 细胞增殖检测 | 第38页 |
| 2.1.7 抑制剂处理GC-1 细胞与样品收集，RNA和蛋白质提取 | 第38页 |
| 2.1.8 实时定量PCR | 第38-40页 |
| 2.1.9 Western blot | 第40页 |
| 2.1.10 细胞周期检测 | 第40-41页 |
| 2.1.11 m6A Dot blot检测 | 第41页 |
| 2.2 结果与分析 | 第41-48页 |
| 2.2.1 FTO抑制剂MA2处理后使细胞活性降低 | 第41-44页 |
| 2.2.2 MA2处理抑制细胞增殖 | 第44-45页 |
| 2.2.3 MA2处理诱导GC-1 spg细胞周期阻 | 第45-46页 |
| 2.2.4 MA2处理后上调精原细胞内m6A修饰 | 第46页 |
| 2.2.5 MA2细胞 48h改变细胞周期调控蛋白CDKs基因的表达 | 第46-48页 |
| 2.3 讨论 | 第48-49页 |
| 2.4 小结 | 第49-50页 |
| 第三章 CMV-mCherry-m6A调控序列质粒构建及功能验证 | 第50-64页 |
| 3.1 材料与方法 | 第50-57页 |
| 3.1.1 主要材料与试剂 | 第50页 |
| 3.1.2 主要仪器设备 | 第50页 |
| 3.1.3 质粒载体和引物 | 第50-52页 |
| 3.1.4 m6A调控基因表达的报告载体构建 | 第52-57页 |
| 3.1.5 m6A报告质粒转染细胞 | 第57页 |
| 3.1.6 细胞收集与荧光强度测定 | 第57页 |
| 3.2 结果与分析 | 第57-63页 |
| 3.2.1 载体构建 | 第57-59页 |
| 3.2.2 验证报告质粒pCD513B-CMV-mCherry-CREBBP | 第59-61页 |
| 3.2.3 CDK23’ UTR区m6A修饰调控功能验证 | 第61-63页 |
| 3.3 讨论 | 第63页 |
| 3.3.1 m6A修饰可以调控mRNA稳定性 | 第63页 |
| 3.3.2 Nanog 3’ UTR的m6A修饰可以调控荧光素梅的表达 | 第63页 |
| 3.4 小结 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 创新点 | 第65-66页 |
| 下一步研究计划 | 第66-67页 |
| 参考文献 | 第67-82页 |
| 致谢 | 第82-83页 |
| 作者简介 | 第83页 |
