| 摘要 | 第4-5页 |
| abstract | 第5-6页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-21页 |
| 1.1 NAC转录因子研究进展 | 第10-16页 |
| 1.1.1 NAC转录因子的基本结构 | 第10页 |
| 1.1.2 NAC转录因子的生物学功能 | 第10-16页 |
| 1.2 果实成熟相关研究进展 | 第16-19页 |
| 1.2.1 果实成熟的类型 | 第16-17页 |
| 1.2.2 乙烯对跃变型果实成熟衰老的调控 | 第17-19页 |
| 1.3 蛋白纯化研究进展 | 第19页 |
| 1.3.1 亲和层析纯化 | 第19页 |
| 1.3.2 切胶纯化 | 第19页 |
| 1.4 凝胶阻滞实验 | 第19-20页 |
| 1.5 本研究背景、目的及意义 | 第20页 |
| 1.6 本研究主要内容 | 第20-21页 |
| 第二章 SNAC4-9 蛋白的生物信息学分析 | 第21-41页 |
| 2.1 实验方法 | 第21-22页 |
| 2.1.1 番茄SNAC4-9 转录因子的查找 | 第21页 |
| 2.1.2 SNAC4-9 蛋白的性质 | 第21页 |
| 2.1.3 SNAC4-9 蛋白的亚细胞定位 | 第21页 |
| 2.1.4 SNAC4-9 的启动子元件分析 | 第21-22页 |
| 2.2 结果与分析 | 第22-40页 |
| 2.2.1 SNAC4-9 的蛋白特性预测 | 第22-23页 |
| 2.2.2 SNAC4-9 蛋白的三级结构预测 | 第23-27页 |
| 2.2.3 SNAC4-9 蛋白的亚细胞定位 | 第27-28页 |
| 2.2.4 SNAC4-9 蛋白的启动子元件分析 | 第28-40页 |
| 2.3 本章小结 | 第40-41页 |
| 第三章 pET-SNAC4/5/7/8/9 表达载体的构建 | 第41-58页 |
| 3.1 实验材料 | 第41-44页 |
| 3.1.1 植株材料 | 第41页 |
| 3.1.2 试验仪器 | 第41-42页 |
| 3.1.3 试剂 | 第42-43页 |
| 3.1.4 溶液配制 | 第43-44页 |
| 3.2 实验方法 | 第44-51页 |
| 3.2.1 总RNA提取及质量检测 | 第44-45页 |
| 3.2.2 cDNA第一链的合成 | 第45页 |
| 3.2.3 引物的设计与合成及酶切位点的选择 | 第45-46页 |
| 3.2.4 SNAC4-9 基因的PCR扩增 | 第46页 |
| 3.2.5 SNAC4-9 基因的回收纯化 | 第46-47页 |
| 3.2.6 pUC-T simple-SNAC4-9 克隆载体的构建 | 第47-49页 |
| 3.2.7 pET-SNAC4-9 表达载体的构建 | 第49-51页 |
| 3.3 结果与分析 | 第51-57页 |
| 3.3.1 番茄RNA的提取 | 第51-52页 |
| 3.3.2 PCR扩增SNAC4-9 基因 | 第52页 |
| 3.3.3 SNAC4-9 的回收纯化 | 第52-53页 |
| 3.3.4 pUC-T-SNAC4-9 载体的构建及鉴定 | 第53-54页 |
| 3.3.5 pUC-T-SNAC4-9 双酶切 | 第54-55页 |
| 3.3.6 SNAC4-9 的回收纯化 | 第55-56页 |
| 3.3.7 pET-30a质粒的双酶切及回收纯化 | 第56页 |
| 3.3.8 pET-30a-SNAC4-9 原核表达载体的构建及鉴定 | 第56-57页 |
| 3.4 本章小结 | 第57-58页 |
| 第四章 SNAC蛋白的表达与纯化 | 第58-76页 |
| 4.1 实验材料 | 第58-59页 |
| 4.1.1 试剂 | 第58页 |
| 4.1.2 溶液配制 | 第58-59页 |
| 4.2 实验方法 | 第59-63页 |
| 4.2.1 SNAC4-9 蛋白的原核表达 | 第59-60页 |
| 4.2.2 聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第60-61页 |
| 4.2.3 SNAC4-9 蛋白表达条件的优化 | 第61-62页 |
| 4.2.4 SNAC4/9 蛋白的纯化 | 第62-63页 |
| 4.3 结果与分析 | 第63-75页 |
| 4.3.1 SNAC4-9 蛋白的表达特性分析 | 第63-72页 |
| 4.3.2 SNAC4/9 蛋白的纯化 | 第72-74页 |
| 4.3.3 蛋白含量的测定 | 第74-75页 |
| 4.4 本章小结 | 第75-76页 |
| 第五章 EMSA验证SNAC4/9 与乙烯生物合成相关基因的互作 | 第76-83页 |
| 5.1 实验材料 | 第76-77页 |
| 5.1.1 试验材料 | 第76页 |
| 5.1.2 试验仪器 | 第76页 |
| 5.1.3 试剂 | 第76页 |
| 5.1.4 探针的设计 | 第76-77页 |
| 5.2 实验方法 | 第77-80页 |
| 5.2.1 SNAC4/9 转录因子与探针的结合反应 | 第77-78页 |
| 5.2.2 结合产物的聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第78-79页 |
| 5.2.3 电转移 | 第79页 |
| 5.2.4 化学发光反应 | 第79-80页 |
| 5.3 结果与分析 | 第80-82页 |
| 5.4 本章小结 | 第82-83页 |
| 第六章 讨论与展望 | 第83-86页 |
| 参考文献 | 第86-94页 |
| 发表论文和参加科研情况说明 | 第94-95页 |
| 致谢 | 第95-97页 |
