病毒纳米材料的生物制备与研究
| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 创新点摘要 | 第6-9页 |
| 第一章 综述 | 第9-22页 |
| 1.1 生物纳米材料的研究进展 | 第9-10页 |
| 1.2 烟草花叶病毒简介 | 第10-11页 |
| 1.3 烟草花叶病毒作为纳米材料的研究现状 | 第11-12页 |
| 1.4 烟草花叶病毒自组装特性 | 第12-15页 |
| 1.4.1 TMV外壳蛋白的自组装 | 第12-13页 |
| 1.4.2 棒状TMV之间的自组装 | 第13页 |
| 1.4.3 TMV在基地表面的自组装 | 第13-15页 |
| 1.5 化学修饰与基因修饰 | 第15-16页 |
| 1.6 烟草花叶病毒表面包被 | 第16-17页 |
| 1.6.1 金属与金属氧化物的单层包被 | 第16-17页 |
| 1.6.2 多层包被 | 第17页 |
| 1.7 直接定位与图案化制备 | 第17-18页 |
| 1.8 TMV在传感方面的应用 | 第18-19页 |
| 1.9 在生物及生命医学领域的应用 | 第19-20页 |
| 1.10 本课题的提出与意义 | 第20-22页 |
| 第二章 试验部分 | 第22-36页 |
| 2.1 试验原料和仪器 | 第22-24页 |
| 2.1.1 试验原料与设备 | 第22-24页 |
| 2.1.2 试验设计 | 第24页 |
| 2.2 目的片段的获得 | 第24-26页 |
| 2.2.1 细菌培养与质粒提取 | 第24-25页 |
| 2.2.2 质粒双酶切与目的片段回收 | 第25-26页 |
| 2.3 引物设计 | 第26-27页 |
| 2.4 PCR突变扩增与产物回收 | 第27-28页 |
| 2.5 单克隆制备与筛选 | 第28-30页 |
| 2.5.1 A-T连接 | 第28页 |
| 2.5.2 A-T重组质粒的转化 | 第28-29页 |
| 2.5.3 重组质粒的筛选与酶切鉴定 | 第29-30页 |
| 2.5.4 突变基因片段的回收 | 第30页 |
| 2.6 外源基因导入大肠杆菌 | 第30-33页 |
| 2.6.1 表达载体的提取、双酶切与回收 | 第30-31页 |
| 2.6.2 重组表达载体的构建 | 第31页 |
| 2.6.3 重组表达载体的转化 | 第31页 |
| 2.6.4 阳性克隆筛选 | 第31-32页 |
| 2.6.5 双酶切鉴定 | 第32-33页 |
| 2.7 蛋白表达、提取与纯化 | 第33-35页 |
| 2.7.1 大肠杆菌表达外源蛋白 | 第33页 |
| 2.7.2 菌液SDS-PAGE | 第33页 |
| 2.7.3 蛋白提取与纯化 | 第33-35页 |
| 2.7.4 蛋白浓度计算 | 第35页 |
| 2.8 蛋白自组装 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-46页 |
| 3.1 目的突变基因的制备与分析 | 第36-38页 |
| 3.1.1 PCR突变扩增结果 | 第36页 |
| 3.1.2 蓝白斑筛选与双酶切鉴定结果 | 第36-38页 |
| 3.2 重组表达体的构建与分析 | 第38-41页 |
| 3.2.1 重组表达体的转化与单克隆筛选 | 第38-39页 |
| 3.2.2 菌液PCR与双酶切鉴定结果 | 第39-41页 |
| 3.3 蛋白表达与纯化结果 | 第41-42页 |
| 3.4 蛋白浓度测定结果 | 第42-43页 |
| 3.5 蛋白自组装研究与探讨 | 第43-46页 |
| 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-54页 |
| 发表文章目录 | 第54-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 附录 | 第56-60页 |
