| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 绪论 | 第14-23页 |
| 1.1 油菜的重要地位 | 第14-15页 |
| 1.2 植物抗病分子途径 | 第15-20页 |
| 1.2.1 水杨酸（SA）介导的防卫信号途径 | 第15-17页 |
| 1.2.2 茉莉酸（JA）介导的防卫信号途径 | 第17-18页 |
| 1.2.3 乙烯（ET）介导的防卫信号途径 | 第18-19页 |
| 1.2.4 MAPK在抗逆和抗病中的作用 | 第19-20页 |
| 1.3 研究的目的及意义 | 第20-21页 |
| 1.4 研究内容和技术路线 | 第21-23页 |
| 1.4.1 主要研究内容 | 第21-22页 |
| 1.4.2 技术路线 | 第22-23页 |
| 第二章 甘蓝型油菜BnMPK3基因的克隆和序列分析 | 第23-29页 |
| 2.1 材料和试剂 | 第23-24页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第23页 |
| 2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
| 2.2 方法 | 第24-25页 |
| 2.2.1 甘蓝型油菜BnMPK3基因序列的克隆 | 第24页 |
| 2.2.2 扩增片段胶回收 | 第24页 |
| 2.2.3 连接反应与转化大肠杆菌 | 第24页 |
| 2.2.4 质粒提取 | 第24-25页 |
| 2.2.5 阳性克隆鉴定及测序 | 第25页 |
| 2.2.6 序列分析 | 第25页 |
| 2.3 结果与分析 | 第25-28页 |
| 2.3.1 甘蓝型油菜BnMPK3基因的克隆与分析 | 第25-28页 |
| 2.4 讨论和小结 | 第28-29页 |
| 第三章 甘蓝型油菜BnMPK3的诱导表达和组织器官特异性表达分析 | 第29-40页 |
| 3.1 材料和试剂 | 第29-30页 |
| 3.2 方法 | 第30-34页 |
| 3.2.1 样品处理 | 第30-31页 |
| 3.2.2 样品采集 | 第31页 |
| 3.2.3 油菜总RNA提取和cDNA合成 | 第31-32页 |
| 3.2.4 荧光定量PCR | 第32-34页 |
| 3.3 结果与分析 | 第34-38页 |
| 3.3.1 BnMPK3在非生物胁迫下的响应分析 | 第34-35页 |
| 3.3.2 BnMPK3在激素处理下的响应分析 | 第35-36页 |
| 3.3.3 BnMPK3在菌核病处理下的响应分析 | 第36-37页 |
| 3.3.4 BnMPK3各组织器官的表达分析 | 第37-38页 |
| 3.4 讨论与小结 | 第38-40页 |
| 第四章 BnMPK3烟草瞬时表达的亚细胞定位分析和菌核病抗性分析 | 第40-47页 |
| 4.1 材料和试剂 | 第40页 |
| 4.2 实验方法 | 第40-43页 |
| 4.2.1 亚细胞定位载体的构建 | 第40-41页 |
| 4.2.2 烟草叶片的瞬时转化 | 第41页 |
| 4.2.3 荧光共聚焦显微镜的观察 | 第41页 |
| 4.2.4 构建烟草瞬时表达载体 | 第41-42页 |
| 4.2.5 注射烟草 | 第42-43页 |
| 4.2.6 RNA提取及qRT-PCR分析 | 第43页 |
| 4.3 结果与分析 | 第43-46页 |
| 4.3.1 BnMPK3在烟草中的亚细胞定位 | 第43-45页 |
| 4.3.2 烟草瞬时表达BnMPK3的菌核病抗性分析 | 第45-46页 |
| 4.4 讨论与小结 | 第46-47页 |
| 第五章 BnMPK3过量表达和抑制表达油菜转基因株系的创建及其抗菌核病分析 | 第47-64页 |
| 5.1 材料和试剂 | 第47-48页 |
| 5.1.1 材料 | 第47页 |
| 5.1.2 主要试剂 | 第47-48页 |
| 5.2 方法 | 第48-51页 |
| 5.2.1 植物表达载体的构建 | 第48页 |
| 5.2.2 植物转化载体的构建 | 第48-49页 |
| 5.2.3 农杆菌重组载体的制备 | 第49页 |
| 5.2.4 油菜的遗传转化 | 第49-50页 |
| 5.2.5 抗生素筛选转化植株 | 第50页 |
| 5.2.6 转化植株的PCR鉴定 | 第50页 |
| 5.2.7 qRT-PCR进一步鉴定转化植株 | 第50-51页 |
| 5.2.8 核盘菌处理油菜转化株 | 第51页 |
| 5.2.9 台盼蓝染色 | 第51页 |
| 5.3 结果与分析 | 第51-63页 |
| 5.3.1 BnMPK3过表达植株的PCR鉴定 | 第51-52页 |
| 5.3.2 BnMPK3过表达植株的qRT-PCR鉴定 | 第52-54页 |
| 5.3.3 过量表达BnMPK3增强油菜对菌核病的抗性 | 第54-56页 |
| 5.3.4 BnMPK3抑制表达植株的鉴定 | 第56-57页 |
| 5.3.5 抑制表达转化株的qRT-PCR鉴定 | 第57-58页 |
| 5.3.6 RNAi抑制表达BnMPK3降低甘蓝型油菜对菌核病的抗性 | 第58-60页 |
| 5.3.7 BnMPK3过量表达和抑制表达株系菌斑侵染面积统计 | 第60-61页 |
| 5.3.8 台盼蓝染色 | 第61-63页 |
| 5.4 讨论与小结 | 第63-64页 |
| 第六章 菌核病侵染时BnMPK3过量表达和抑制表达油菜转基因株系的防卫信号途径标志基因的表达分析 | 第64-71页 |
| 6.1 材料和试剂 | 第64页 |
| 6.2 方法 | 第64-66页 |
| 6.2.1 激素相关途径基因的诱导表达 | 第64-66页 |
| 6.3 结果与分析 | 第66-70页 |
| 6.3.1 菌核病侵染时，BnMPK3过表达和抑制表达油菜转基因株系中的防卫信号途径关键标志基因的表达分析 | 第67-70页 |
| 6.4 讨论 | 第70-71页 |
| 第七章 总结与展望 | 第71-73页 |
| 7.1 工作总结 | 第71-72页 |
| 7.2 展望 | 第72-73页 |
| 参考文献 | 第73-80页 |
| 致谢 | 第80-82页 |
| 硕士期间的学术成果 | 第82页 |
