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IL-35基因修饰间充质干细胞抑制小鼠心脏移植排斥反应的研究

中文摘要第4-6页
Abstract第6-7页
缩略语/符号说明第10-12页
前言第12-16页
    研究现状、成果第12-14页
    研究目的、方法第14-16页
对象与方法第16-37页
    1.1 实验材料第16-18页
        1.1.1 实验对象第16页
        1.1.2 实验仪器第16-17页
        1.1.3 实验试剂第17-18页
    1.2 实验方法第18-37页
        1.2.1 小鼠脂肪来源间充质干细胞分离、培养第18-19页
        1.2.2 细胞计数与活力检测第19-21页
        1.2.3 细胞传代培养第21页
        1.2.4 细胞冻存第21-22页
        1.2.5 冻存细胞的复苏第22-23页
        1.2.6 流式细胞术(Flow Cyto Metry, FCM)鉴定间充质干细胞表型第23页
        1.2.7 过表达IL-35 慢病毒载体感染间充质干细胞第23-24页
        1.2.8 ELISA检测慢病毒感染后细胞培养基上清IL-35 蛋白表达第24-25页
        1.2.9 小鼠异位腹腔心脏移植模型的构建及处理第25-29页
        1.2.10 小鼠心脏移植物石蜡切片和HE染色第29-32页
        1.2.11 Western Blot法检测移植物中IL-17 表达第32-33页
        1.2.12 ELISA法检测各组移植术后外周血IL-35 表达第33-34页
        1.2.13 FCM检测术后外周血及脾脏组织Th1/Th2,Th17及脾脏CD4~+CD25~+T细胞比例第34-36页
        1.2.14 统计方法第36-37页
结果第37-53页
    2.1 IL-35 基因修饰小鼠脂肪来源间充质干细胞的制备。第37-38页
        2.1.1 显微镜下观察间充质干细胞形态第37页
        2.1.2 流式细胞术鉴定间充质干细胞表型第37页
        2.1.3 荧光显微镜下观察病毒感染效率第37-38页
        2.1.4 ELISA法测定IL-35-MSCs的IL-35蛋白表达结果第38页
    2.2 小鼠异位腹腔心脏移植模型建立第38-53页
        2.2.1 小鼠异位腹腔心脏移植模型手术成功率及手术时间第38-39页
        2.2.2 手术失败原因分析第39-40页
        2.2.3 小鼠异位心脏移植模型各组间移植物生存期比较第40-41页
        2.2.4 小鼠异位腹腔心脏移植术后移植物病理学检查第41-44页
        2.2.5 WB检测移植术后各组移植物中IL-17 表达情况第44页
        2.2.6 移植术后各组外周血IL-35 表达情况第44-45页
        2.2.7 小鼠异位腹腔心脏移植术后T细胞亚群变化第45-53页
讨论第53-60页
    3.1 小鼠心脏移植模型建立和制作体会第53-55页
    3.2 T细胞亚群与移植排斥第55-56页
    3.3 IL-35 的生物学功能第56-57页
    3.4 间充质干细胞的生物学作用第57页
    3.5 IL-35 基因修饰MSCs在小鼠心脏移植排斥反应的研究第57-60页
        3.5.1 IL-35-MSCs的获取第58页
        3.5.2 IL-35-MSCs对小鼠心脏移植排斥反应的影响第58-60页
结论第60-61页
参考文献第61-72页
发表论文和参加科研情况说明第72-73页
综述 间充质干细胞概述和新进展第73-86页
    综述参考文献第78-86页
致谢第86-87页
个人简历第87页

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