中文摘要 | 第4-6页 |
Abstract | 第6-7页 |
缩略语/符号说明 | 第10-12页 |
前言 | 第12-16页 |
研究现状、成果 | 第12-14页 |
研究目的、方法 | 第14-16页 |
对象与方法 | 第16-37页 |
1.1 实验材料 | 第16-18页 |
1.1.1 实验对象 | 第16页 |
1.1.2 实验仪器 | 第16-17页 |
1.1.3 实验试剂 | 第17-18页 |
1.2 实验方法 | 第18-37页 |
1.2.1 小鼠脂肪来源间充质干细胞分离、培养 | 第18-19页 |
1.2.2 细胞计数与活力检测 | 第19-21页 |
1.2.3 细胞传代培养 | 第21页 |
1.2.4 细胞冻存 | 第21-22页 |
1.2.5 冻存细胞的复苏 | 第22-23页 |
1.2.6 流式细胞术(Flow Cyto Metry, FCM)鉴定间充质干细胞表型 | 第23页 |
1.2.7 过表达IL-35 慢病毒载体感染间充质干细胞 | 第23-24页 |
1.2.8 ELISA检测慢病毒感染后细胞培养基上清IL-35 蛋白表达 | 第24-25页 |
1.2.9 小鼠异位腹腔心脏移植模型的构建及处理 | 第25-29页 |
1.2.10 小鼠心脏移植物石蜡切片和HE染色 | 第29-32页 |
1.2.11 Western Blot法检测移植物中IL-17 表达 | 第32-33页 |
1.2.12 ELISA法检测各组移植术后外周血IL-35 表达 | 第33-34页 |
1.2.13 FCM检测术后外周血及脾脏组织Th1/Th2,Th17及脾脏CD4~+CD25~+T细胞比例 | 第34-36页 |
1.2.14 统计方法 | 第36-37页 |
结果 | 第37-53页 |
2.1 IL-35 基因修饰小鼠脂肪来源间充质干细胞的制备。 | 第37-38页 |
2.1.1 显微镜下观察间充质干细胞形态 | 第37页 |
2.1.2 流式细胞术鉴定间充质干细胞表型 | 第37页 |
2.1.3 荧光显微镜下观察病毒感染效率 | 第37-38页 |
2.1.4 ELISA法测定IL-35-MSCs的IL-35蛋白表达结果 | 第38页 |
2.2 小鼠异位腹腔心脏移植模型建立 | 第38-53页 |
2.2.1 小鼠异位腹腔心脏移植模型手术成功率及手术时间 | 第38-39页 |
2.2.2 手术失败原因分析 | 第39-40页 |
2.2.3 小鼠异位心脏移植模型各组间移植物生存期比较 | 第40-41页 |
2.2.4 小鼠异位腹腔心脏移植术后移植物病理学检查 | 第41-44页 |
2.2.5 WB检测移植术后各组移植物中IL-17 表达情况 | 第44页 |
2.2.6 移植术后各组外周血IL-35 表达情况 | 第44-45页 |
2.2.7 小鼠异位腹腔心脏移植术后T细胞亚群变化 | 第45-53页 |
讨论 | 第53-60页 |
3.1 小鼠心脏移植模型建立和制作体会 | 第53-55页 |
3.2 T细胞亚群与移植排斥 | 第55-56页 |
3.3 IL-35 的生物学功能 | 第56-57页 |
3.4 间充质干细胞的生物学作用 | 第57页 |
3.5 IL-35 基因修饰MSCs在小鼠心脏移植排斥反应的研究 | 第57-60页 |
3.5.1 IL-35-MSCs的获取 | 第58页 |
3.5.2 IL-35-MSCs对小鼠心脏移植排斥反应的影响 | 第58-60页 |
结论 | 第60-61页 |
参考文献 | 第61-72页 |
发表论文和参加科研情况说明 | 第72-73页 |
综述 间充质干细胞概述和新进展 | 第73-86页 |
综述参考文献 | 第78-86页 |
致谢 | 第86-87页 |
个人简历 | 第87页 |