| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 第一章 引言 | 第11-18页 |
| 1.1 无脊椎动物的固有免疫 | 第11页 |
| 1.2 清道夫受体研究进展 | 第11-16页 |
| 1.2.1 清道夫受体简介 | 第11页 |
| 1.2.2 清道夫受体分类 | 第11-15页 |
| 1.2.2.1 A型 | 第12-13页 |
| 1.2.2.2 B型 | 第13-14页 |
| 1.2.2.3 D型 | 第14页 |
| 1.2.2.4 E型 | 第14页 |
| 1.2.2.5 F型 | 第14-15页 |
| 1.2.2.6 G型 | 第15页 |
| 1.2.2.7 H型 | 第15页 |
| 1.2.2.8 I型 | 第15页 |
| 1.2.3 清道夫受体的研究现状 | 第15-16页 |
| 1.3 本研究的目的和意义 | 第16-18页 |
| 第二章 短蛸OoSR-I基因的克隆与表达规律分析 | 第18-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第18-20页 |
| 2.1.1 实验动物和菌株 | 第18页 |
| 2.1.2 实验仪器 | 第18-19页 |
| 2.1.3 实验试剂 | 第19页 |
| 2.1.4 实验所用引物信息 | 第19-20页 |
| 2.1.5 实验试剂的配制方法 | 第20页 |
| 2.2 实验方法 | 第20-25页 |
| 2.2.1 短蛸总RNA的提取及cDNA的合成 | 第20-22页 |
| 2.2.2 OoSR-I基因的 3'RACE技术扩增 | 第22-24页 |
| 2.2.3 OoSR-I基因的生物信息学分析 | 第24页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR法检测基因OoSR-I的表达规律 | 第24-25页 |
| 2.3 实验结果 | 第25-29页 |
| 2.3.1 OoSR-I的cDNA全长及氨基酸序列特征 | 第25页 |
| 2.3.2 OoSR-I的多序列比对及系统进化特征 | 第25-27页 |
| 2.3.3 OoSR-I编码氨基酸序列的三维结构 | 第27-28页 |
| 2.3.4 OoSR-I的mRNA在不同短蛸组织中的表达规律 | 第28页 |
| 2.3.5 短蛸受细菌刺激后OoSR-I的mRNA在血细胞中的表达规律 | 第28-29页 |
| 2.4 讨论 | 第29-31页 |
| 第三章 OoSR-I的重组质粒构建、蛋白纯化及活性分析 | 第31-44页 |
| 3.1 实验材料 | 第31-35页 |
| 3.1.1 实验样品 | 第31页 |
| 3.1.2 实验仪器 | 第31页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第31-32页 |
| 3.1.4 实验引物 | 第32-33页 |
| 3.1.5 实验试剂的配制方法 | 第33-35页 |
| 3.2 实验方法 | 第35-40页 |
| 3.2.1 基因OoSR-I目的片段的获取 | 第35页 |
| 3.2.2 构建原核表达载体 | 第35-36页 |
| 3.2.3 质粒提取 | 第36页 |
| 3.2.4 重组蛋白OoSR-I (rOoSR-I)的转化与表达 | 第36-37页 |
| 3.2.5 rOoSR-I的纯化与复性 | 第37页 |
| 3.2.6 rOoSR-I的浓度测定 | 第37-38页 |
| 3.2.7 抗OoSR-I多克隆抗体的制备 | 第38页 |
| 3.2.8 蛋白质免疫印迹(Western-Blot) | 第38-39页 |
| 3.2.9 rOoSR-I的配体结合活性分析 | 第39页 |
| 3.2.10 细胞间接免疫荧光染色 | 第39-40页 |
| 3.3 实验结果 | 第40-41页 |
| 3.3.1 OoSR-I重组蛋白的获得和多抗制备 | 第40页 |
| 3.3.2 抗OoSR-I多抗的特异性 | 第40-41页 |
| 3.3.3 rOoSR-I的配体结合活性 | 第41页 |
| 3.3.4 细胞间接免疫荧光 | 第41页 |
| 3.4 讨论 | 第41-44页 |
| 结论 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-52页 |
| 附录 | 第52-54页 |
| 致谢 | 第54页 |
