中文摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-11页 |
第一章 文献综述 | 第12-22页 |
1.1 植物乳汁概述 | 第12-13页 |
1.1.1 植物乳汁生物特性 | 第12-13页 |
1.1.2 植物乳汁应用价值 | 第13页 |
1.2 植物乳汁中的化学成分 | 第13-16页 |
1.2.1 化学成分 | 第13-16页 |
1.3 植物乳汁中的相关酶类 | 第16-18页 |
1.3.1 蛋白酶类 | 第16页 |
1.3.2 蛋白酶抑制剂 | 第16-17页 |
1.3.3 氧化酶类 | 第17页 |
1.3.4 凝集素,橡胶类似几丁质结合蛋白,几丁质酶 | 第17-18页 |
1.3.5 其他蛋白 | 第18页 |
1.4 桑树乳汁概况 | 第18-19页 |
1.4.1 桑树植物乳汁特性 | 第18-19页 |
1.4.2 桑树乳汁应用价值 | 第19页 |
1.5 桑树乳胶蛋白 | 第19-20页 |
1.6 家蚕与桑树的协同进化关系 | 第20-22页 |
第二章 引言 | 第22-24页 |
2.1 研究背景及意义 | 第22页 |
2.2 研究目的 | 第22页 |
2.3 研究内容 | 第22-23页 |
2.3.1 桑树MLX56基因家族成员克隆及生物信息学分析 | 第22页 |
2.3.2 桑树MLX56基因家族差异表达及半定量PCR分析 | 第22-23页 |
2.3.3 桑树MLX56-6基因原核表达分析及大肠杆菌生长速率的测定 | 第23页 |
2.4 研究技术路线 | 第23-24页 |
第三章 桑树MLX56基因家族的克隆及生物信息学分析 | 第24-38页 |
3.1 材料和试剂 | 第24-25页 |
3.1.1 实验植物材料 | 第24-25页 |
3.1.2 菌株和质粒 | 第25页 |
3.1.3 试剂和药品 | 第25页 |
3.1.4 实验仪器与设备 | 第25页 |
3.2 实验方法 | 第25-30页 |
3.2.1 MLX56基因家族成员鉴定 | 第25-26页 |
3.2.2 RNA的提取与检测 | 第26-27页 |
3.2.3 反转录合成cDNA第一链 | 第27页 |
3.2.4 桑树叶片基因组DNA提取 | 第27-28页 |
3.2.5 桑树MLX56基因的克隆 | 第28-30页 |
3.2.6 桑树MLX56基因家族生物信息学分析 | 第30页 |
3.3 结果与分析 | 第30-36页 |
3.3.1 桑树MLX56基因家族鉴定及结构分析 | 第30-32页 |
3.3.2 桑树MLX56基因蛋白质结构域及三维结构分析 | 第32-35页 |
3.3.3 桑树MLX56家族基因系统进化分析 | 第35-36页 |
3.4 小结与讨论 | 第36-38页 |
第四章 桑树MLX56基因家族差异表达及半定量PCR分析 | 第38-46页 |
4.1 材料和试剂 | 第38-39页 |
4.1.1 实验植物材料 | 第38页 |
4.1.2 主要试剂 | 第38-39页 |
4.1.3 实验仪器与设备 | 第39页 |
4.2 实验方法 | 第39-41页 |
4.2.1 桑树mRNA的提取及反转录为cDNA | 第39-40页 |
4.2.2 桑树MLX56基因在不同桑树种质材料及不同组织中的差异表达分析 | 第40页 |
4.2.3 桑树MLX56基因在不同桑树种质材料及不同组织中的半定量PCR分析 | 第40-41页 |
4.3 结果与分析 | 第41-44页 |
4.3.1 18份桑树种质材料差异表达分析 | 第41页 |
4.3.2 18份桑树种质材料MLX56基因聚类分析 | 第41-42页 |
4.3.3 18份桑树种质材料MLX56基因半定量PCR分析 | 第42-43页 |
4.3.4 广东桑‘桂优62号’MLX56基因的组织特异性表达 | 第43-44页 |
4.3.5 广东桑‘桂优62号’MLX56基因半定量PCR分析 | 第44页 |
4.4 小结与讨论 | 第44-46页 |
第五章 桑树MLX56-6基因原核表达分析及大肠杆菌生长速率的测定 | 第46-58页 |
5.1 材料和试剂 | 第46-49页 |
5.1.1 菌株和质粒 | 第46页 |
5.1.2 试剂和药品 | 第46-47页 |
5.1.3主要仪器 | 第47页 |
5.1.4 主要培养基 | 第47页 |
5.1.5 主要溶液 | 第47-49页 |
5.2 实验方法 | 第49-53页 |
5.2.1 pET28a-MLX56-6原核表达载体的构建 | 第49-50页 |
5.2.3 目的蛋白诱导表达 | 第50-51页 |
5.2.4 诱导表达蛋白的SDS-PAGE分析 | 第51-52页 |
5.2.5 重组表达蛋白形式鉴定 | 第52页 |
5.2.6 重组表达蛋白Western Blot验证 | 第52-53页 |
5.2.7 大肠杆菌生长速率的测定 | 第53页 |
5.3 结果与分析 | 第53-56页 |
5.3.1 pET28a-MLX56-6原核表达载体构建 | 第53-54页 |
5.3.2 MLX56-6蛋白的诱导表达 | 第54-55页 |
5.3.3 诱导表达蛋白可溶性检测 | 第55页 |
5.3.4 重组蛋白Western Blot检测 | 第55-56页 |
5.3.5 MLX56-6蛋白对大肠杆菌生长的影响 | 第56页 |
5.4 小结与讨论 | 第56-58页 |
第六章 全文总结 | 第58-60页 |
论文创新点 | 第60-62页 |
参考文献 | 第62-70页 |
附录一 本文采用的缩写 | 第70-72页 |
附录二 经克隆后MLX56基因序列 | 第72-74页 |
硕士在读期间发表论文及参加课题 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |