| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第15-42页 |
| 1.1 脂肪组织发育及调节因子相关研究 | 第15-23页 |
| 1.1.1 脂肪组织的发生 | 第16-17页 |
| 1.1.2 脂肪组织的种类 | 第17-19页 |
| 1.1.3 脂肪细胞分化过程中的重要调控因子 | 第19-23页 |
| 1.2 脂肪细胞分化过程中涉及的信号通路 | 第23-28页 |
| 1.2.1 Wnt/β-catenin信号通路 | 第23-25页 |
| 1.2.2 TGFβ 和BMPs信号通路 | 第25-27页 |
| 1.2.3 Insulin/IGF-1 信号通路 | 第27页 |
| 1.2.4 FGFs信号通路 | 第27-28页 |
| 1.3 鱼类脂肪组织发育及相关研究 | 第28-36页 |
| 1.3.1 鱼类脂肪组织发育在体研究进展 | 第29页 |
| 1.3.2 鱼类脂肪细胞离体发育相关研究 | 第29-31页 |
| 1.3.3 外源因子对鱼类脂肪细胞发育的影响 | 第31-33页 |
| 1.3.4 鱼类脂质代谢相关研究 | 第33-36页 |
| 1.4 HUFA对脂肪细胞发育的影响 | 第36-41页 |
| 1.4.1 HUFA可以抑制脂肪细胞的脂质合成 | 第36-38页 |
| 1.4.2 HUFA可以促进脂肪细胞的脂质分解 | 第38页 |
| 1.4.3 HUFA对脂质代谢相关基因的影响 | 第38-39页 |
| 1.4.4 HUFA对脂肪细胞线粒体发育的影响 | 第39-41页 |
| 1.5 研究目的与意义 | 第41-42页 |
| 第二章 草鱼个体发育过程中腹腔脂肪组织发生的初步研究 | 第42-55页 |
| 2.1 引言 | 第42页 |
| 2.2 材料与方法 | 第42-46页 |
| 2.2.1 主要试剂 | 第42-43页 |
| 2.2.2 试验动物 | 第43页 |
| 2.2.3 采样及鱼体生长状况测定 | 第43页 |
| 2.2.4 草鱼个体发育过程中腹腔解剖学观测 | 第43页 |
| 2.2.5 石蜡切片观测草鱼个体发育过程中脂肪细胞的发生 | 第43-44页 |
| 2.2.6 冰冻切片观察草鱼个体发育过程中腹腔脂肪组织发生过程 | 第44页 |
| 2.2.7 实时定量PCR检测草鱼个体发育过程基因表达变化 | 第44-45页 |
| 2.2.8 免疫组化检测PPARγ 表达情况 | 第45-46页 |
| 2.3 试验结果 | 第46-51页 |
| 2.3.1 草鱼仔鱼生长情况 | 第46页 |
| 2.3.2 草鱼个体发育过程中内脏团中脂肪组织发生情况 | 第46页 |
| 2.3.3 草鱼个体发育过程中腹腔脂肪细胞发生过程 | 第46-48页 |
| 2.3.4 草鱼个体发育过程中基因表达情况 | 第48-49页 |
| 2.3.5 草鱼个体发育过程中PPAR γ 蛋白表达情况 | 第49-51页 |
| 2.4 讨论 | 第51-55页 |
| 第三章 草鱼前体脂肪细胞分化特征研究 | 第55-70页 |
| 3.1 引言 | 第55-56页 |
| 3.2 材料与方法 | 第56-58页 |
| 3.2.1 主要试剂 | 第56页 |
| 3.2.2 试验动物 | 第56页 |
| 3.2.3 草鱼前体脂肪细胞体外培养体系建立 | 第56页 |
| 3.2.4 细胞脂质含量的测定 | 第56页 |
| 3.2.5 透射电镜观测细胞分化过程中胞内超微结构变化 | 第56-57页 |
| 3.2.6 细胞分化过程中线粒体荧光染色观测 | 第57页 |
| 3.2.7 细胞线粒体蛋白含量测定 | 第57页 |
| 3.2.8 RNA提取及基因表达检测 | 第57-58页 |
| 3.2.9 数据处理 | 第58页 |
| 3.3 结果 | 第58-65页 |
| 3.3.1 草鱼前体脂肪细胞的增殖与分化 | 第58-59页 |
| 3.3.2 草鱼前体脂肪细胞分化过程中脂质含量变化 | 第59-60页 |
| 3.3.3 草鱼前体脂肪细胞分化过程中胞内超微结构变化 | 第60-61页 |
| 3.3.4 脂肪细胞分化过程中胞内线粒体数量及线粒体蛋白含量变化 | 第61-63页 |
| 3.3.5 草鱼前体脂肪细胞分化过程中基因表达变化 | 第63-65页 |
| 3.4 讨论 | 第65-70页 |
| 第四章 DHA影响草鱼脂肪细胞分化的转录组学研究 | 第70-84页 |
| 4.1 引言 | 第70页 |
| 4.2 材料与方法 | 第70-72页 |
| 4.2.1 主要试剂 | 第70页 |
| 4.2.2 草鱼前体脂肪细胞的分离与培养 | 第70-71页 |
| 4.2.3 油红O染色提取方法检测DHA对脂质合成的影响 | 第71页 |
| 4.2.4 RNA纯化，双链cDNA的合成及上机测序 | 第71-72页 |
| 4.2.5 转录组序列的从头组装与序列注释 | 第72页 |
| 4.2.6 基因在不同组表达水平分析 | 第72页 |
| 4.2.7 差异表达基因聚类分析 | 第72页 |
| 4.2.8 实时定量PCR检测差异基因表达 | 第72页 |
| 4.3 结果 | 第72-80页 |
| 4.3.1 DHA对脂肪细胞脂质含量的影响 | 第72-74页 |
| 4.3.2 高通量测序组装结果 | 第74页 |
| 4.3.3 DHA处理后差异基因分析 | 第74-76页 |
| 4.3.4 DHA处理后差异表达基因GO聚类分析 | 第76-79页 |
| 4.3.5 DHA对草鱼分化过程中信号通路表达的影响 | 第79-80页 |
| 4.3.6 实时定量检测差异基因表达情况 | 第80页 |
| 4.4 讨论 | 第80-84页 |
| 第五章 DHA介由Wnt/β-catenin信号通路影响草鱼脂肪细胞分化 | 第84-93页 |
| 5.1 引言 | 第84页 |
| 5.2 材料与方法 | 第84-86页 |
| 5.2.1 主要试剂 | 第84页 |
| 5.2.2 草鱼前体脂肪细胞分离与培养 | 第84-85页 |
| 5.2.3 油红O染色提取方法测定细胞脂质含量变化 | 第85页 |
| 5.2.4 实时定量PCR检测基因表达变化 | 第85页 |
| 5.2.5 WB检测细胞蛋白表达变化 | 第85-86页 |
| 5.3 结果 | 第86-91页 |
| 5.3.1 草鱼脂肪细胞分化过程中DHA及FH535对细胞脂质生成的影响 | 第86页 |
| 5.3.2 草鱼脂肪细胞分化过程中DHA及FH535对细胞基因表达的影响 | 第86页 |
| 5.3.3 草鱼脂肪细胞分化过程中DHA及FH535对细胞蛋白表达的影响 | 第86-91页 |
| 5.4 讨论 | 第91-93页 |
| 第六章 HUFA对草鱼成熟脂肪细胞水解的影响 | 第93-103页 |
| 6.1 引言 | 第93-94页 |
| 6.2 材料与方法 | 第94-96页 |
| 6.2.1 试验试剂 | 第94页 |
| 6.2.2 草鱼成熟脂肪细胞的分离与培养条件 | 第94页 |
| 6.2.3 草鱼成熟脂肪细胞在体外培养条件下基础水解情况检测 | 第94-95页 |
| 6.2.4 DHA和EPA对脂肪细胞释放甘油的影响 | 第95页 |
| 6.2.5 在体饲喂HUFA后对草鱼腹腔脂肪细胞的基础水解的影响 | 第95页 |
| 6.2.6 实时定量PCR检测脂肪细胞基因表达的影响 | 第95-96页 |
| 6.2.7 数据分析 | 第96页 |
| 6.3 结果 | 第96-100页 |
| 6.3.1 草鱼成熟脂肪细胞在体外条件下的基础水解情况 | 第96-97页 |
| 6.3.2 DHA和EPA对草鱼成熟脂肪细胞释放甘油的影响 | 第97-98页 |
| 6.3.3 DHA和EPA对草鱼成熟脂肪细胞基因表达的影响 | 第98-99页 |
| 6.3.4 饲喂HUFA对草鱼腹腔成熟脂肪细胞基础水解的影响 | 第99页 |
| 6.3.5 饲喂HUFA对草鱼脂肪组织基因表达的影响 | 第99-100页 |
| 6.4 讨论 | 第100-103页 |
| 第七章 综合讨论与结论 | 第103-105页 |
| 7.1 草鱼脂肪细胞发育特征及HUFA对其影响 | 第103-104页 |
| 7.2 结论 | 第104页 |
| 7.3 创新点 | 第104页 |
| 7.4 下一步研究计划 | 第104-105页 |
| 参考文献 | 第105-133页 |
| 附录 | 第133-136页 |
| 致谢 | 第136-138页 |
| 作者简介 | 第138-139页 |
