摘要 | 第5-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
第一章 文章综述 | 第10-14页 |
前言 | 第10页 |
1.1 内分泌干扰物 | 第10-12页 |
1.1.1 EDCs | 第10-11页 |
1.1.2 EDCs的危害 | 第11页 |
1.1.3 水体中EDCs现状 | 第11-12页 |
1.2 17Α-乙炔雌二醇 | 第12页 |
1.3 KISS/GPR54系统 | 第12页 |
1.4 目的意义 | 第12-14页 |
第二章 稀有鮈鲫KISS/GPR54基因的克隆及其组织表达 | 第14-33页 |
2.1 前言 | 第14页 |
2.2 实验材料和实验试剂 | 第14页 |
2.2.1 实验材料 | 第14页 |
2.2.2 实验试剂及仪器 | 第14页 |
2.2.3 实验所需溶液及其配制 | 第14页 |
2.3 试验方法 | 第14-22页 |
2.3.1 Kiss/GPR54基因克隆 | 第14-18页 |
2.3.2 通过RACE技术克隆目地基因的末端序列 | 第18-20页 |
2.3.3 测序结果的分析与拼接 | 第20页 |
2.3.4 通过荧光定量PCR(qRT-PCR)检测目的基因组织表达 | 第20-22页 |
2.4 结果分析 | 第22-31页 |
2.4.1 稀有鮈鲫Kiss/GPR54基因全长cDNA的克隆 | 第22页 |
2.4.2 稀有鮈鲫Kiss/GPR54基因cDNA序列分析 | 第22-29页 |
2.4.3 Kiss/GPR54基因组织表达 | 第29-31页 |
2.5 讨论 | 第31-32页 |
2.6 总结 | 第32-33页 |
第三章 EE2对稀有鮈鲫脑和性腺生殖相关基因表达的影响 | 第33-42页 |
3.1 实验材料与试剂 | 第33页 |
3.1.1 实验材料 | 第33页 |
3.1.2 实验仪器及试剂 | 第33页 |
3.2 试验方法 | 第33-34页 |
3.2.1 暴露实验 | 第33页 |
3.2.2 样品总RNA的提取 | 第33-34页 |
3.2.3 RNA反转 | 第34页 |
3.2.4 qRT-PCR | 第34页 |
3.2.5 数据处理 | 第34页 |
3.3 结果分析 | 第34-39页 |
3.3.1 EE2对稀有鮈鲫脑中Kiss/GPR54基因表达的影响 | 第34-36页 |
3.3.2 EE2对稀有鮈鲫脑中GnRH基因表达的影响 | 第36-38页 |
3.3.3 EE2对稀有鮈鲫性腺kiss2和GPR54基因表达的影响 | 第38-39页 |
3.4 讨论 | 第39-41页 |
3.5 小结 | 第41-42页 |
结论、创新和展望 | 第42-43页 |
结论 | 第42页 |
本实验创新点 | 第42页 |
展望 | 第42-43页 |
参考文献 | 第43-47页 |
附录 | 第47-52页 |
缩略词 | 第52-53页 |
致谢 | 第53-54页 |
作者介绍 | 第54页 |