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外源ABA延缓小麦返白系返白现象的机理初探

摘要第6-7页
ABSTRACT第7页
第一章 文献综述第13-24页
    1.1 有关脱落酸(ABA)的研究进展第13-20页
        1.1.1 ABA在高等植物中的合成途径第13-15页
        1.1.2 高等植物中ABA的信号传递途径第15-17页
            1.1.2.1 PYR/PYL/RCAR-PP2C-SnRK2介导的ABA信号转导通路第15-16页
            1.1.2.2 CHLH介导的ABA信号转导通路第16-17页
            1.1.2.3 GCR2介导的ABA信号转导通路第17页
        1.1.3 正常生长条件下外源ABA对小麦发育的影响第17-18页
            1.1.3.1 外源ABA对小麦光合相关生理指标的影响第17页
            1.1.3.2 外源ABA与活性氧代谢酶相关性的研究第17页
            1.1.3.3 外源ABA调节小麦穗及胚的发育的研究第17-18页
        1.1.4 低温逆境条件下ABA处理对高等植物的生理性状的影响第18页
        1.1.5 外源ABA处理植物的方法研究第18-20页
            1.1.5.1 叶喷法第19-20页
            1.1.5.2 浸根法第20页
            1.1.5.3 灌根法第20页
    1.2 返白系研究概况第20-22页
        1.2.1 有关返白系的遗传学研究第20-21页
        1.2.2 有关返白系叶绿素代谢途径的研究第21-22页
        1.2.3 有关返白系叶绿体基因表达的研究第22页
        1.2.4 外源ABA对返白系生理性状及返白现象的研究第22页
    1.3 本研究的目的、意义和研究思路第22-23页
    1.4 本研究的技术路线第23-24页
第二章 小麦返白系与矮变1号苗期叶片ABA含量的测定第24-33页
    2.1 材料第24页
    2.2 仪器与试剂第24页
        2.2.1 主要仪器第24页
        2.2.2 主要试剂第24页
    2.3 方法第24-26页
        2.3.1 材料培养与处理第24-25页
        2.3.2 ABA的提取第25页
        2.3.3 ABA的固相萃取(SPE)浓缩第25页
        2.3.4 色谱分离及质谱检测第25-26页
        2.3.5 ABA定量标准曲线的确定第26页
    2.4 结果与分析第26-31页
        2.4.1 外源ABA预处理延缓低温下小麦返白系的返白现象第26页
        2.4.2 ABA定量标准曲线的线性方程和检出限第26-27页
        2.4.3 C18小柱固相萃取(SPE)浓缩法的洗脱效率第27-29页
        2.4.4 20ng加标水平的回收率第29页
        2.4.5 室温条件下小麦苗期叶片内源ABA的定量分析第29-30页
        2.4.6 低温条件与外源ABA预处理条件的ABA的检测结果第30-31页
    2.5 讨论第31-32页
    2.6 小结第32-33页
第三章 基因芯片中检测到的ABA相关基因分析第33-42页
    3.1 材料第33页
    3.2 仪器与试剂第33页
        3.2.1 主要仪器第33页
        3.2.2 主要试剂第33页
    3.3 方法第33-35页
        3.3.1 材料培养与处理第33页
        3.3.2 小麦叶片总RNA的提取及检测第33-34页
            3.3.2.1 总RNA的提取第33-34页
            3.3.2.2 总RNA的电泳质检第34页
        3.3.3 基因芯片主要实验流程第34-35页
    3.4 结果与分析第35-39页
        3.4.1 样品RNA的质检结果第35页
        3.4.2 基因芯片中检测到的ABA相关基因列表及其功能第35-36页
        3.4.3 低温条件下返白系与矮变1号中ABA相关基因的表达差异分析第36-38页
        3.4.4 复绿过程中ABA相关基因在返白系与矮变1号中的表达第38-39页
    3.5 讨论第39-41页
    3.6 小结第41-42页
第四章 外源ABA对返白系与矮变1号中ABA相关基因表达的影响第42-58页
    4.1 材料第42页
    4.2 仪器与试剂第42页
        4.2.1 主要仪器第42页
        4.2.2 主要试剂第42页
    4.3 方法第42-47页
        4.3.1 材料的培养与处理第42-43页
        4.3.2 外源ABA与低温共处理对白化的影响分析第43页
        4.3.3 总RNA的提取与检测第43页
        4.3.4 总RNA的反转录第43-44页
            4.3.4.1 去除gDNA反应第43页
            4.3.4.2 反转录反应第43-44页
        4.3.5 实时定量PCR的引物设计第44页
        4.3.6 半定量PCR引物的设计第44-45页
        4.3.7 引物的稀释第45页
        4.3.8 实时定量引物特异性的检测第45页
        4.3.9 实时荧光定量PCR检测5个ABA相关基因的表达第45-46页
        4.3.10 半定量检测ASR与rab15B的表达第46-47页
            4.3.10.1 用β-actin调节模板的用量第46-47页
            4.3.10.2 ASR与rab15 B的半定量表达分析第47页
    4.4 结果与分析第47-56页
        4.4.1 外源ABA共处理延缓 4℃低温下小麦返白系的返白现象第47-48页
        4.4.2 总RNA的质检第48-49页
        4.4.3 实时定量引物的特异性检测第49页
        4.4.4 ABA信号传递途径中ABA受体编码基因(CHLH)的表达分析第49-50页
        4.4.5 ABA信号传递途径中蛋白激酶编码基因(PKABA1、SnRK2.4)的表达分析第50-52页
            4.4.5.1 PKABA1在返白系与矮变1号中的表达分析第50-51页
            4.4.5.2 SnRK 2.4 在返白系与矮变1号中的表达分析第51-52页
        4.4.6 ABA信号传递途径中转录因子编码基因(WABI5、ASR、ASR2)的表达分析第52-55页
            4.4.6.1 WABI5在返白系与矮变1号中的表达分析第52-53页
            4.4.6.2 ASR与ASR2在返白系与矮变1号中的表达分析第53-55页
        4.4.7 ABA信号传递途径下游ABA响应基因(rab15 B)的表达分析第55-56页
    4.5 讨论第56-57页
    4.6 小结第57-58页
第五章 结论与创新点第58-59页
    5.1 结论第58页
    5.2 创新点第58页
    5.3 下一步研究计划第58-59页
参考文献第59-63页
致谢第63-64页
作者简介第64页

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