摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7页 |
第一章 文献综述 | 第13-24页 |
1.1 有关脱落酸(ABA)的研究进展 | 第13-20页 |
1.1.1 ABA在高等植物中的合成途径 | 第13-15页 |
1.1.2 高等植物中ABA的信号传递途径 | 第15-17页 |
1.1.2.1 PYR/PYL/RCAR-PP2C-SnRK2介导的ABA信号转导通路 | 第15-16页 |
1.1.2.2 CHLH介导的ABA信号转导通路 | 第16-17页 |
1.1.2.3 GCR2介导的ABA信号转导通路 | 第17页 |
1.1.3 正常生长条件下外源ABA对小麦发育的影响 | 第17-18页 |
1.1.3.1 外源ABA对小麦光合相关生理指标的影响 | 第17页 |
1.1.3.2 外源ABA与活性氧代谢酶相关性的研究 | 第17页 |
1.1.3.3 外源ABA调节小麦穗及胚的发育的研究 | 第17-18页 |
1.1.4 低温逆境条件下ABA处理对高等植物的生理性状的影响 | 第18页 |
1.1.5 外源ABA处理植物的方法研究 | 第18-20页 |
1.1.5.1 叶喷法 | 第19-20页 |
1.1.5.2 浸根法 | 第20页 |
1.1.5.3 灌根法 | 第20页 |
1.2 返白系研究概况 | 第20-22页 |
1.2.1 有关返白系的遗传学研究 | 第20-21页 |
1.2.2 有关返白系叶绿素代谢途径的研究 | 第21-22页 |
1.2.3 有关返白系叶绿体基因表达的研究 | 第22页 |
1.2.4 外源ABA对返白系生理性状及返白现象的研究 | 第22页 |
1.3 本研究的目的、意义和研究思路 | 第22-23页 |
1.4 本研究的技术路线 | 第23-24页 |
第二章 小麦返白系与矮变1号苗期叶片ABA含量的测定 | 第24-33页 |
2.1 材料 | 第24页 |
2.2 仪器与试剂 | 第24页 |
2.2.1 主要仪器 | 第24页 |
2.2.2 主要试剂 | 第24页 |
2.3 方法 | 第24-26页 |
2.3.1 材料培养与处理 | 第24-25页 |
2.3.2 ABA的提取 | 第25页 |
2.3.3 ABA的固相萃取(SPE)浓缩 | 第25页 |
2.3.4 色谱分离及质谱检测 | 第25-26页 |
2.3.5 ABA定量标准曲线的确定 | 第26页 |
2.4 结果与分析 | 第26-31页 |
2.4.1 外源ABA预处理延缓低温下小麦返白系的返白现象 | 第26页 |
2.4.2 ABA定量标准曲线的线性方程和检出限 | 第26-27页 |
2.4.3 C18小柱固相萃取(SPE)浓缩法的洗脱效率 | 第27-29页 |
2.4.4 20ng加标水平的回收率 | 第29页 |
2.4.5 室温条件下小麦苗期叶片内源ABA的定量分析 | 第29-30页 |
2.4.6 低温条件与外源ABA预处理条件的ABA的检测结果 | 第30-31页 |
2.5 讨论 | 第31-32页 |
2.6 小结 | 第32-33页 |
第三章 基因芯片中检测到的ABA相关基因分析 | 第33-42页 |
3.1 材料 | 第33页 |
3.2 仪器与试剂 | 第33页 |
3.2.1 主要仪器 | 第33页 |
3.2.2 主要试剂 | 第33页 |
3.3 方法 | 第33-35页 |
3.3.1 材料培养与处理 | 第33页 |
3.3.2 小麦叶片总RNA的提取及检测 | 第33-34页 |
3.3.2.1 总RNA的提取 | 第33-34页 |
3.3.2.2 总RNA的电泳质检 | 第34页 |
3.3.3 基因芯片主要实验流程 | 第34-35页 |
3.4 结果与分析 | 第35-39页 |
3.4.1 样品RNA的质检结果 | 第35页 |
3.4.2 基因芯片中检测到的ABA相关基因列表及其功能 | 第35-36页 |
3.4.3 低温条件下返白系与矮变1号中ABA相关基因的表达差异分析 | 第36-38页 |
3.4.4 复绿过程中ABA相关基因在返白系与矮变1号中的表达 | 第38-39页 |
3.5 讨论 | 第39-41页 |
3.6 小结 | 第41-42页 |
第四章 外源ABA对返白系与矮变1号中ABA相关基因表达的影响 | 第42-58页 |
4.1 材料 | 第42页 |
4.2 仪器与试剂 | 第42页 |
4.2.1 主要仪器 | 第42页 |
4.2.2 主要试剂 | 第42页 |
4.3 方法 | 第42-47页 |
4.3.1 材料的培养与处理 | 第42-43页 |
4.3.2 外源ABA与低温共处理对白化的影响分析 | 第43页 |
4.3.3 总RNA的提取与检测 | 第43页 |
4.3.4 总RNA的反转录 | 第43-44页 |
4.3.4.1 去除gDNA反应 | 第43页 |
4.3.4.2 反转录反应 | 第43-44页 |
4.3.5 实时定量PCR的引物设计 | 第44页 |
4.3.6 半定量PCR引物的设计 | 第44-45页 |
4.3.7 引物的稀释 | 第45页 |
4.3.8 实时定量引物特异性的检测 | 第45页 |
4.3.9 实时荧光定量PCR检测5个ABA相关基因的表达 | 第45-46页 |
4.3.10 半定量检测ASR与rab15B的表达 | 第46-47页 |
4.3.10.1 用β-actin调节模板的用量 | 第46-47页 |
4.3.10.2 ASR与rab15 B的半定量表达分析 | 第47页 |
4.4 结果与分析 | 第47-56页 |
4.4.1 外源ABA共处理延缓 4℃低温下小麦返白系的返白现象 | 第47-48页 |
4.4.2 总RNA的质检 | 第48-49页 |
4.4.3 实时定量引物的特异性检测 | 第49页 |
4.4.4 ABA信号传递途径中ABA受体编码基因(CHLH)的表达分析 | 第49-50页 |
4.4.5 ABA信号传递途径中蛋白激酶编码基因(PKABA1、SnRK2.4)的表达分析 | 第50-52页 |
4.4.5.1 PKABA1在返白系与矮变1号中的表达分析 | 第50-51页 |
4.4.5.2 SnRK 2.4 在返白系与矮变1号中的表达分析 | 第51-52页 |
4.4.6 ABA信号传递途径中转录因子编码基因(WABI5、ASR、ASR2)的表达分析 | 第52-55页 |
4.4.6.1 WABI5在返白系与矮变1号中的表达分析 | 第52-53页 |
4.4.6.2 ASR与ASR2在返白系与矮变1号中的表达分析 | 第53-55页 |
4.4.7 ABA信号传递途径下游ABA响应基因(rab15 B)的表达分析 | 第55-56页 |
4.5 讨论 | 第56-57页 |
4.6 小结 | 第57-58页 |
第五章 结论与创新点 | 第58-59页 |
5.1 结论 | 第58页 |
5.2 创新点 | 第58页 |
5.3 下一步研究计划 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
作者简介 | 第64页 |