| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 第一章．文献综述 | 第10-19页 |
| 1.1 miRNA的研究现状 | 第10-15页 |
| 1.1.1 植物中的miRNA | 第10页 |
| 1.1.2 植物中miRNA的合成 | 第10-11页 |
| 1.1.3 植物中miRNA的降解 | 第11-12页 |
| 1.1.4 植物中miRNA的运动 | 第12-13页 |
| 1.1.5 植物中miRNA调节基因表达的机制 | 第13-14页 |
| 1.1.6 植物中miRNA通过对靶基因的调控发挥功能 | 第14-15页 |
| 1.2 正向遗传筛选体系 | 第15页 |
| 1.3 背景植株介绍 | 第15-16页 |
| 1.4 AGO1蛋白的研究进展 | 第16-17页 |
| 1.5 BON1蛋白的研究进展 | 第17-18页 |
| 1.6 研究目的与意义 | 第18-19页 |
| 第二章．材料与方法 | 第19-33页 |
| 2.1 实验材料 | 第19-21页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第19页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第19-20页 |
| 2.1.2.1 植物培养所需试剂 | 第19页 |
| 2.1.2.2 基因组DNA提取试剂 | 第19页 |
| 2.1.2.3 基因型鉴定 | 第19-20页 |
| 2.1.2.4 RNA的提取、反转录与荧光定量PCR | 第20页 |
| 2.1.2.5 Northern Blot的实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.2.6 Western Blot的实验试剂 | 第20页 |
| 2.1.3 实验仪器设备 | 第20-21页 |
| 2.1.4 数据库和生物软件 | 第21页 |
| 2.2 实验方法 | 第21-33页 |
| 2.2.1 植物的培养 | 第21-22页 |
| 2.2.1.1 培养土中拟南芥的培养 | 第21页 |
| 2.2.1.21/2MS培养基中拟南芥的培养 | 第21-22页 |
| 2.2.2 EMS诱变与筛选 | 第22页 |
| 2.2.3 克隆群体的建立 | 第22页 |
| 2.2.4 基因组DNA的提取 | 第22-23页 |
| 2.2.5 全基因组重测序 | 第23页 |
| 2.2.6 测序数据的分析和突变位点的确定与验证 | 第23-24页 |
| 2.2.7 荧光定量PCR检测miRNA的积累 | 第24-27页 |
| 2.2.7.1 植物总RNA的提取 | 第24-25页 |
| 2.2.7.2 茎环RT-PCR反转录合成miRNA的cDNA | 第25-26页 |
| 2.2.7.3 荧光定量PCR反应 | 第26-27页 |
| 2.2.8 Northern Blot检测mi RNA的积累 | 第27-29页 |
| 2.2.9 荧光定量PCR检测miRNA靶标和pri-miRNA的表达量 | 第29-31页 |
| 2.2.9.1 植物总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.2.9.2 mRNA和pri-miRNA的反转录与荧光定量PCR反应 | 第29-31页 |
| 2.2.10 突变体表型回复 | 第31-33页 |
| 2.2.10.1 载体的构建 | 第31页 |
| 2.2.10.2 根癌农杆菌的转化 | 第31页 |
| 2.2.10.3 突变体的花序浸染 | 第31-32页 |
| 2.2.10.4 植物总蛋白质的提取 | 第32页 |
| 2.2.10.5 蛋白质SDS-PAGE凝胶电泳配置 | 第32-33页 |
| 2.2.10.6 Western Blot | 第33页 |
| 第三章．实验结果与讨论 | 第33-43页 |
| 3.1 SUP-E45突变体 | 第33-36页 |
| 3.1.1 SUP-E45的获得及表型描述 | 第33-34页 |
| 3.1.2 SUP-E45突变中内源miRNA及其靶mRNA的表达量 | 第34-35页 |
| 3.1.3 突变位点的检测与鉴定 | 第35-36页 |
| 3.2 突变体ab58的研究 | 第36-41页 |
| 3.2.1 突变体ab58的获得与表型分析 | 第36页 |
| 3.2.2 突变体ab58的基因型鉴定 | 第36-38页 |
| 3.2.3 ab58突变体中内源miRNA，pri-miRNA及其靶mRNA的表达量 | 第38-40页 |
| 3.2.4 突变体的表型回复突变分析 | 第40-41页 |
| 3.3 讨论 | 第41-43页 |
| 结论 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-50页 |
| 致谢 | 第50页 |
