| 摘要 | 第4-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 第一章 绪论 | 第19-37页 |
| 1.1 基因芯片总述 | 第19-23页 |
| 1.1.1 基因芯片的合成方法 | 第19-21页 |
| 1.1.2 基因芯片的制备过程 | 第21-22页 |
| 1.1.3 基因芯片的应用 | 第22-23页 |
| 1.1.3.1 基因芯片表达分析 | 第22页 |
| 1.1.3.2 DNA芯片测序 | 第22-23页 |
| 1.1.3.3 疾病检测 | 第23页 |
| 1.2 基因芯片载体 | 第23-25页 |
| 1.3 基因芯片载体的表面化学修饰 | 第25-26页 |
| 1.3.1 有机官能团修饰二维表面 | 第25页 |
| 1.3.2 构建多孔三维表面 | 第25-26页 |
| 1.4 核酸分子的固定机理 | 第26-30页 |
| 1.4.1 物理吸附 | 第26页 |
| 1.4.2 化学共价连接 | 第26-28页 |
| 1.4.3 紫外光辐射交联 | 第28-29页 |
| 1.4.4 发夹探针固定技术 | 第29-30页 |
| 1.4.5 表面封闭 | 第30页 |
| 1.5 蛋白分子固定化方法 | 第30-32页 |
| 1.6 光引发接枝表面改性 | 第32-35页 |
| 1.6.1 光引发接枝改性的发展 | 第32-33页 |
| 1.6.2 光引发剂引发机理 | 第33-34页 |
| 1.6.3 单体 | 第34页 |
| 1.6.4 光引发表面改性的应用 | 第34-35页 |
| 1.7 本论文的主要研究内容 | 第35-37页 |
| 第二章 紫外光交联聚合制备三维基因芯片 | 第37-53页 |
| 2.1 引言 | 第37页 |
| 2.2 实验部分 | 第37-40页 |
| 2.2.1 原料及处理 | 第37-38页 |
| 2.2.2 玻璃基材表面处理 | 第38-39页 |
| 2.2.3 点样 | 第39页 |
| 2.2.4 杂交过程 | 第39-40页 |
| 2.3 表征 | 第40页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第40-50页 |
| 2.4.1 接枝三维凝胶结构表征 | 第41-44页 |
| 2.4.1.1 红外光谱表征 | 第41-42页 |
| 2.4.1.2 扫描电子显微镜(SEM)和原子力显微镜(AFM)表征 | 第42-43页 |
| 2.4.1.3 水接触角测试 | 第43-44页 |
| 2.4.2 点样过程表征 | 第44-50页 |
| 2.4.2.1 不同探针溶液对应的点样效果 | 第44-45页 |
| 2.4.2.2 不同凝胶层比例对应的点样效果 | 第45-46页 |
| 2.4.2.3 探针浓度与凝胶层比例对固定效率影响 | 第46-48页 |
| 2.4.2.4 培育温度对固定效率的影响 | 第48页 |
| 2.4.2.5 凝胶层不同厚度对固定效率的影响 | 第48-50页 |
| 2.4.2.6 二维环氧玻片固定效率 | 第50页 |
| 2.5 杂交过程 | 第50-52页 |
| 2.6 小结 | 第52-53页 |
| 第三章 脑胶质瘤辅助诊断用基因芯片样品荧光标记及杂交过程 | 第53-69页 |
| 3.1 引言 | 第53页 |
| 3.2 实验部分 | 第53-60页 |
| 3.2.1 试剂 | 第53-54页 |
| 3.2.2 仪器 | 第54页 |
| 3.2.3 实验步骤 | 第54-59页 |
| 3.2.3.1 患者组织中提取RNA | 第55页 |
| 3.2.3.2 将总RNA进行反转录 | 第55-57页 |
| 3.2.3.3 线性扩增转录合成cRNA | 第57页 |
| 3.2.3.4 CRNA反转录合成第一链CDNA | 第57-58页 |
| 3.2.3.5 CDNA碱基个数的检测 | 第58页 |
| 3.2.3.6 第二链CDNA的合成和标记 | 第58-59页 |
| 3.2.3.7 杂交过程 | 第59页 |
| 3.2.4 表征 | 第59-60页 |
| 3.2.4.1 紫外可见分光光度计 | 第59页 |
| 3.2.4.2 琼脂糖凝胶电泳仪 | 第59-60页 |
| 3.3 结果与讨论 | 第60-68页 |
| 3.3.1 提取的总RNA表征 | 第60-61页 |
| 3.3.2 反转录后合成双链DNA | 第61页 |
| 3.3.3 线性扩增转录合成cRNA | 第61-62页 |
| 3.3.4 对第一链DNA长度检测 | 第62-63页 |
| 3.3.5 第二链cDNA的合成和标记 | 第63-64页 |
| 3.3.6 标记cDNA进行定性定量测定 | 第64-65页 |
| 3.3.7 脑胶质瘤芯片制备 | 第65-68页 |
| 3.3.7.1 探针分子的设计 | 第65-67页 |
| 3.3.7.2 点样及封闭过程 | 第67-68页 |
| 3.3.7.3 杂交过程 | 第68页 |
| 3.4 小结 | 第68-69页 |
| 第四章 可见光交联接枝聚合制备复杂结构的3D蛋白阵列 | 第69-81页 |
| 4.1 引言 | 第69-70页 |
| 4.2 实验部分 | 第70-72页 |
| 4.2.1 原料及处理 | 第70页 |
| 4.2.2 仪器 | 第70页 |
| 4.2.3 实验步骤 | 第70-72页 |
| 4.2.3.1 表面引入休眠基 | 第70-71页 |
| 4.2.3.2 可见光引发表面接枝聚合 | 第71页 |
| 4.2.3.3 PEG网络结构表面的抗污染性能 | 第71页 |
| 4.2.3.4 复杂膜层的制备 | 第71-72页 |
| 4.2.3.5 复杂结构固定生物分子 | 第72页 |
| 4.3 结果与讨论 | 第72-79页 |
| 4.3.1 PEG膜层在LDPE表面的交联增长 | 第72-73页 |
| 4.3.2 可见光引发表面交联接枝 | 第73-74页 |
| 4.3.3 PEG网状结构表面的抗污染性能的表征 | 第74-75页 |
| 4.3.4 交联PEG层再次接枝 | 第75-76页 |
| 4.3.5 二元图案接枝 | 第76-78页 |
| 4.3.6 二元生物分子固定 | 第78-79页 |
| 4.4 结论 | 第79-81页 |
| 第五章 结论 | 第81-83页 |
| 参考文献 | 第83-89页 |
| 致谢 | 第89-91页 |
| 研究成果及发表的学术论文 | 第91-93页 |
| 作者简介 | 第93-95页 |
| 导师简介 | 第95-97页 |
| 北京化工大学硕士研究生学位论文答辩委员会决议书 | 第97-98页 |
