| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 缩略词表 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-17页 |
| 1 花香化合物研究概况 | 第9-12页 |
| 1.1 花香化合物的生物合成 | 第9-10页 |
| 1.1.1 萜类化合物的生物合成 | 第9-10页 |
| 1.1.2 苯类/苯丙类化合物的生物合成 | 第10页 |
| 1.1.3 脂肪族化合物合成途径 | 第10页 |
| 1.2 花香化合物生物合成关键酶及其基因 | 第10-11页 |
| 1.3 花香化合物基因工程 | 第11-12页 |
| 1.3.1 导入外源基因 | 第11-12页 |
| 1.3.2 调控内源基因 | 第12页 |
| 2 玫瑰的研究概况 | 第12-16页 |
| 2.1 玫瑰花香的主要成分 | 第13-14页 |
| 2.2 分子生物技术在玫瑰上的应用 | 第14-16页 |
| 2.2.1 玫瑰单萜类花香化合物代谢途径关键酶及其基因 | 第14-15页 |
| 2.2.2 玫瑰基因工程 | 第15-16页 |
| 3 本研究的目的及意义 | 第16-17页 |
| 第二章 RrDXR和RrAAT基因的超表达载体构建 | 第17-35页 |
| 1 材料与方法 | 第17-26页 |
| 1.1 试验材料 | 第17-18页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第17页 |
| 1.1.2 载体质粒与菌株 | 第17页 |
| 1.1.3 主要试剂与仪器 | 第17页 |
| 1.1.4 主要试剂的配制 | 第17-18页 |
| 1.2 试验方法 | 第18-26页 |
| 1.2.1 玫瑰盛开期花瓣总RNA提取 | 第18-19页 |
| 1.2.2 总RNA的纯化 | 第19页 |
| 1.2.3 反转录cDNA第一链合成 | 第19-20页 |
| 1.2.4 目的基因的初步获取 | 第20-22页 |
| 1.2.4.1 引物的合成与设计 | 第20页 |
| 1.2.4.2 目的基因的PCR扩增 | 第20-21页 |
| 1.2.4.3 PCR产物的回收与纯化 | 第21页 |
| 1.2.4.4 PCR产物的连接、转化、扩大培养 | 第21页 |
| 1.2.4.5 质粒DNA的提取 | 第21-22页 |
| 1.2.4.6 检测 | 第22页 |
| 1.2.5 目的基因(含有酶切位点)的获取 | 第22-23页 |
| 1.2.5.1 引物的设计与合成 | 第22页 |
| 1.2.5.2 含有酶切位点目的基因的PCR扩增 | 第22-23页 |
| 1.2.6 双元表达载体pCAMBIA1304双酶切及产物回收 | 第23-24页 |
| 1.2.7 目的片段与表达载体的连接 | 第24页 |
| 1.2.8 连接产物转化大肠杆菌 | 第24页 |
| 1.2.9 重组质粒的筛选、鉴定及检测 | 第24-25页 |
| 1.2.9.1 酶切鉴定 | 第24-25页 |
| 1.2.9.2 检测 | 第25页 |
| 1.2.10 重组质粒导入农杆菌EHA105及筛选鉴定 | 第25-26页 |
| 1.2.10.1 农杆菌EHA105感受态制备 | 第25页 |
| 1.2.10.2 液氮冻融法转化农杆菌 | 第25页 |
| 1.2.10.3 农杆菌转化子的筛选鉴定 | 第25-26页 |
| 1.2.10.4 农杆菌转化子保存 | 第26页 |
| 2 结果与分析 | 第26-34页 |
| 2.1 玫瑰RrDXR和RrAAT基因的初步获取与序列分析 | 第26-27页 |
| 2.2 重组质粒的酶切验证及测序分析 | 第27-33页 |
| 2.3 重组质粒转化农杆菌 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-35页 |
| 第三章 矮牵牛再生体系的建立 | 第35-41页 |
| 1 材料与方法 | 第35-36页 |
| 1.1 试验材料 | 第35页 |
| 1.1.1 植物材料 | 第35页 |
| 1.1.2 植物生长调节剂的配制 | 第35页 |
| 1.1.3 基本培养基的配制与主要仪器 | 第35页 |
| 1.2 试验方法 | 第35-36页 |
| 1.2.1 无菌材料的获得 | 第35-36页 |
| 1.2.2 愈伤诱导及分化培养基的筛选 | 第36页 |
| 1.2.3 生根培养基的筛选 | 第36页 |
| 2 结果与分析 | 第36-39页 |
| 2.1 最佳消毒方法的确定 | 第36-37页 |
| 2.2 最佳诱导分化培养基的确定 | 第37-38页 |
| 2.3 最佳生根培养基的确定 | 第38-39页 |
| 3 讨论 | 第39-41页 |
| 第四章 RrDXR和RrAAT基因转化矮牵牛的初步研究 | 第41-49页 |
| 1 材料与方法 | 第41-43页 |
| 1.1 试验材料 | 第41页 |
| 1.1.1 植物材料、菌种 | 第41页 |
| 1.1.2 主要试剂的配制 | 第41页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第41页 |
| 1.2 试验方法 | 第41-43页 |
| 1.2.1 选择抗生素压力的确定 | 第41页 |
| 1.2.2 潮霉素对不定芽生根的影响 | 第41-42页 |
| 1.2.3 头孢霉素对叶片再生的影响 | 第42页 |
| 1.2.4 农杆菌侵染液的制备 | 第42页 |
| 1.2.5 转化方法 | 第42-43页 |
| 2 结果与分析 | 第43-47页 |
| 2.1 抗生素质量浓度的确定 | 第43-47页 |
| 2.2 目的基因转化矮牵牛的初步研究 | 第47页 |
| 3 讨论 | 第47-49页 |
| 参考文献 | 第49-56页 |
| 致谢 | 第56-57页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第57页 |
| 已登录基因 | 第57-58页 |
