| 致谢 | 第5-6页 |
| 中文摘要 | 第6-7页 |
| 英文摘要 | 第7页 |
| 缩略语及中英文对照 | 第8-12页 |
| 1 引言 | 第12-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-52页 |
| 2.1 主要试剂材料 | 第16-19页 |
| 2.2 主要仪器 | 第19-20页 |
| 2.3 细胞培养、分化、转染 | 第20-22页 |
| 2.4 H19荧光原位杂交 | 第22-25页 |
| 2.5 SAHH免疫荧光染色(8孔板) | 第25-26页 |
| 2.6 蛋白免疫印迹(Western-blot)分析 | 第26-28页 |
| 2.7 RNA提取 | 第28-29页 |
| 2.8 cDNA合成 | 第29-30页 |
| 2.9 定量实时定量荧光PCR(Quantitative Real time-qPCR) | 第30页 |
| 2.10 DNA提取 | 第30-31页 |
| 2.11 质粒构建(pH19-S1,pH19,pS1) | 第31-32页 |
| 2.12 亲和纯化含H19的核糖核蛋白复合体以及蛋白鉴定 | 第32-34页 |
| 2.13 RIP+蛋白复合体免疫共沉淀Protein complex immunoprecipitation(Co-IP) | 第34-35页 |
| 2.14 甲基化特异性PCR(Methylation-specific PCR,MSP) | 第35-37页 |
| 2.15 细胞内SAHH活性测定 | 第37-38页 |
| 2.16 染色质免疫共沉淀(Chromatin immunoprecipitation,ChIP) | 第38-42页 |
| 2.17 全基因组甲基化测序 | 第42页 |
| 2.18 RNA-Seq及数据分析 | 第42-43页 |
| 2.19 凝胶电泳迁移率(Electrophoretic mobility shift analysis,EMSA) | 第43-50页 |
| 2.20 体外rSAHH活性测定(In vitro rSAHH activity assays) | 第50-51页 |
| 2.21 统计方法 | 第51-52页 |
| 3 技术路线 | 第52-53页 |
| 3.1 lncRNA H19与SAHH的相互作用 | 第52页 |
| 3.2 H19/SAHH/DNMT3B信号通路影响甲基化 | 第52-53页 |
| 4 结果 | 第53-84页 |
| 4.1 含H19的核糖核蛋白复合体内检测到SAHH | 第53-59页 |
| 4.2 敲低H19上调SAHH的活性和DNMT3B介导的CME甲基化 | 第59-66页 |
| 4.3 CME甲基化升高可促进Nctc1的转录 | 第66-68页 |
| 4.4 SAHH介导H19依赖的CME甲基化 | 第68-72页 |
| 4.5 H19富含U的区域能与SAHH结合并抑制其水解活性 | 第72-76页 |
| 4.6 H19依赖的SAHH活性抑制引起全基因组水平的甲基化水平改变 | 第76-84页 |
| 5 讨论 | 第84-87页 |
| 6 结论 | 第87-88页 |
| 参考文献 | 第88-94页 |
| 综述 | 第94-120页 |
| 参考文献 | 第110-120页 |
| 作者简历及在学习期间所取得的科研成果 | 第120-123页 |
