| 致谢 | 第10-11页 |
| 摘要 | 第11-13页 |
| Abstract | 第13-14页 |
| 缩略词表 | 第15-16页 |
| 第一章 文献综述 | 第16-30页 |
| 1.1 木聚糖酶抑制剂简介 | 第16-20页 |
| 1.1.1 谷物中木聚糖酶抑制剂研究进展 | 第16-17页 |
| 1.1.2 谷物中XIP家族木聚糖酶抑制剂概述 | 第17-19页 |
| 1.1.2.1 水稻RIXI木聚糖酶抑制剂研究概述 | 第18-19页 |
| 1.1.3 木聚糖酶抑制蛋白对生物和非生物胁迫的响应 | 第19-20页 |
| 1.2 木聚糖酶抑制蛋白基因信号序列和启动子序列分析 | 第20-23页 |
| 1.3 植物转录因子概述 | 第23-28页 |
| 1.3.1 植物WRKY转录因子概述 | 第23-24页 |
| 1.3.2 WRKY转录因子的结构特征及分类 | 第24-26页 |
| 1.3.2.1 WRKY转录因子的结构特征 | 第24-25页 |
| 1.3.2.2 WRKY转录因子分类 | 第25-26页 |
| 1.3.2.3 水稻WRKY转录因子命名 | 第26页 |
| 1.3.3 WRKY基因的生物学功能 | 第26-28页 |
| 1.3.3.1 生物胁迫 | 第26-27页 |
| 1.3.3.2 非生物胁迫 | 第27-28页 |
| 1.4 选题意义 | 第28-29页 |
| 1.5 研究内容及目标 | 第29-30页 |
| 第二章 RIXI、WRKY生物信息学预测及表达分析 | 第30-44页 |
| 2.1 引言 | 第30页 |
| 2.2 材料 | 第30-37页 |
| 2.2.1 实验材料 | 第30页 |
| 2.2.2 RIXI启动子序列分析 | 第30-31页 |
| 2.2.3 OsWRKY基因查找及跨膜预测分析 | 第31页 |
| 2.2.4 稻瘟病处理水稻 | 第31-32页 |
| 2.2.4.1 病原菌活化及培养 | 第31页 |
| 2.2.4.2 水稻的培养及稻瘟病接种 | 第31-32页 |
| 2.2.5 qRT-PCR检测稻瘟病菌侵染后病程相关蛋白基因表达水平 | 第32-35页 |
| 2.2.5.1 定量引物设计 | 第32页 |
| 2.2.5.2 水稻总RNA提取 | 第32-33页 |
| 2.2.5.3 逆转录和cDNA的获得 | 第33-34页 |
| 2.2.5.4 荧光定量PCR反应 | 第34-35页 |
| 2.2.6 烟草瞬时表达 | 第35-37页 |
| 2.2.6.1 35S：OsWRKY46-sGFP载体的构建 | 第35-36页 |
| 2.2.6.2 转化烟草 | 第36-37页 |
| 2.3 结果与分析 | 第37-42页 |
| 2.3.1 RIXI启动子分析 | 第37-38页 |
| 2.3.2 WRKY基因及氨基酸序列分析 | 第38-39页 |
| 2.3.3 稻瘟病侵染后WRKY相对表达水平分析 | 第39-41页 |
| 2.3.4 OsWRKY46::GFP融合蛋白在烟草表皮细胞亚细胞定位分析 | 第41-42页 |
| 2.4 讨论 | 第42-44页 |
| 第三章 RIXI启动子与WRKY转录因子互作研究 | 第44-61页 |
| 3.1 引言 | 第44页 |
| 3.2 材料和方法 | 第44-54页 |
| 3.2.1 材料 | 第44-45页 |
| 3.2.1.1 植物材料 | 第44页 |
| 3.2.1.2 质粒与菌株 | 第44-45页 |
| 3.2.2 烟草叶片瞬时表达 | 第45-50页 |
| 3.2.2.1 RIXI-promoter::LUC载体的构建 | 第45-47页 |
| 3.2.2.2 35S::WRKY载体的构建 | 第47-48页 |
| 3.2.2.3 共转化烟草 | 第48-49页 |
| 3.2.2.4 LUC含量测定 | 第49-50页 |
| 3.2.3 酵母单杂交 | 第50-54页 |
| 3.2.3.1 OsWRKY46：：pGADT7AD载体构建 | 第50-51页 |
| 3.2.3.2 Prey：：pAbAi载体构建 | 第51-52页 |
| 3.2.3.3 酵母感受态制备及转化 | 第52-53页 |
| 3.2.3.4 RIXI promoter Prey：：pAbAi酵母验证 | 第53页 |
| 3.2.3.5 OsWRKY46：：pGADT7-AD质粒转化 | 第53页 |
| 3.2.3.6 酵母第二次验证 | 第53页 |
| 3.2.3.7 涂板验证 | 第53-54页 |
| 3.3 结果与分析 | 第54-60页 |
| 3.3.1 烟草瞬时表达结果 | 第54-58页 |
| 3.3.1.1 报告子RIXI promoter与pGreenⅡ 0800-LUC载体连接 | 第54-56页 |
| 3.3.1.2 效应子OsWRKY6,OsWRKY46与pCAMBIA 1300GFP载体连接 | 第56-57页 |
| 3.3.1.3 烟草叶片瞬时表达LUC结果 | 第57-58页 |
| 3.3.2 酵母单杂交结果 | 第58-60页 |
| 3.4 讨论 | 第60-61页 |
| 第四章 水稻OsWRKY46超表达株系的获得及表达分析 | 第61-70页 |
| 4.1 引言 | 第61页 |
| 4.2 材料与方法 | 第61-65页 |
| 4.2.1 材料 | 第61页 |
| 4.2.1.1 转基因背景 | 第61页 |
| 4.2.1.2 菌株 | 第61页 |
| 4.2.2 超表达载体的构建以及转基因阳性苗的获得 | 第61-64页 |
| 4.2.2.1 Ubi：：OsWRKY46超表达载体的构建 | 第61-62页 |
| 4.2.2.2 Ubi：：OsWRKY46超表达载体的构建 | 第62-64页 |
| 4.2.2.3 转基因苗阳性植株鉴定 | 第64页 |
| 4.2.3 转基因水稻中OsWRKY46的相对表达水平分析 | 第64-65页 |
| 4.2.3.1 定量引物设计 | 第65页 |
| 4.2.3.2 水稻总RNA的提取 | 第65页 |
| 4.2.3.3 逆转录及cDNA的合成 | 第65页 |
| 4.2.3.4 转基因植株总RNA的qRT-PCR分析 | 第65页 |
| 4.3 结果与分析 | 第65-69页 |
| 4.3.1 获得目的片段OsWRKY46成熟肽序列 | 第65-66页 |
| 4.3.2 OsWRKY46成熟肽序列成功插入pTCK303载体和转化到农杆菌中 | 第66-67页 |
| 4.3.3 成功获得过表达转基因水稻 | 第67-68页 |
| 4.3.4 筛选得到OsWRKY46过表达水稻阳性株系 | 第68页 |
| 4.3.5 OsWRKY46过表达水稻中基因表达水平分析 | 第68-69页 |
| 4.4 讨论 | 第69-70页 |
| 第五章 全文总结及展望 | 第70-73页 |
| 5.1 主要研究结论 | 第70-72页 |
| 5.2 研究展望 | 第72-73页 |
| 附录 | 第73-75页 |
| 附录一 CM培养基配方 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-82页 |
| 个人简历 | 第82-83页 |
| 硕士期间发表论文 | 第83页 |
