摘要 | 第3-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
第一章 绪论 | 第9-17页 |
1.1 洋茉莉醛简介 | 第9-11页 |
1.1.1 洋茉莉醛的理化性质 | 第9页 |
1.1.2 洋茉莉醛的功能应用 | 第9-11页 |
1.1.3 洋茉莉醛的市场需求以及分布 | 第11页 |
1.2 洋茉莉醛的合成 | 第11-15页 |
1.2.1 洋茉莉醛的发现 | 第12页 |
1.2.2 以黄樟油素为原料 | 第12-13页 |
1.2.3 以邻苯二酚为原料 | 第13-14页 |
1.2.4 以香兰素为原料 | 第14-15页 |
1.2.5 以胡椒基酸为原料 | 第15页 |
1.3 生物法制备洋茉莉醛的研究进程 | 第15-16页 |
1.3.1 生物法制备洋茉莉醛 | 第15-16页 |
1.3.2 洋茉莉醛的检测方法 | 第16页 |
1.4 论文研究意义和研究内容 | 第16-17页 |
1.4.1 论文研究意义 | 第16页 |
1.4.2 论文主要研究内容 | 第16-17页 |
第二章 材料与方法 | 第17-27页 |
2.1 实验材料 | 第17-19页 |
2.1.1 菌种 | 第17页 |
2.1.2 主要试剂 | 第17-18页 |
2.1.3 主要仪器 | 第18页 |
2.1.4 培养基 | 第18页 |
2.1.5 溶液 | 第18-19页 |
2.2 实验方法 | 第19-25页 |
2.2.1 产洋茉莉醛菌株筛选 | 第19-21页 |
2.2.2 菌种鉴定 | 第21-22页 |
2.2.3 培养方法 | 第22-23页 |
2.2.4 合成洋茉莉醛的酶在细胞的存在位置 | 第23页 |
2.2.5 培养基成分单因素优化 | 第23页 |
2.2.6 Plackett-Burman实验 | 第23页 |
2.2.7 Central Composite Design实验 | 第23-24页 |
2.2.8 摇瓶发酵条件的优化 | 第24页 |
2.2.9 蛋白初步纯化 | 第24-25页 |
2.3 分析方法 | 第25-27页 |
2.3.1 生物量检测 | 第25页 |
2.3.2 酶活测定方法 | 第25-26页 |
2.3.3 高效液相色谱法 | 第26页 |
2.3.4 气相色谱法 | 第26页 |
2.3.5 气相-质谱联用 | 第26页 |
2.3.6 飞行时间质谱 | 第26-27页 |
第三章 结果与讨论 | 第27-50页 |
3.1 洋茉莉醛产生菌的筛选 | 第27-28页 |
3.2 菌种鉴定 | 第28-30页 |
3.2.1 形态学鉴定 | 第28页 |
3.2.2 生理生化特征 | 第28-29页 |
3.2.3 16S rDNA序列分析 | 第29-30页 |
3.3 产物的鉴定 | 第30-32页 |
3.3.1 HPLC分析产物 | 第30-31页 |
3.3.2 GC-MS对产物定性分析 | 第31-32页 |
3.4 合成洋茉莉醛的酶在细胞中的存在位置考察 | 第32-33页 |
3.5 发酵培养基成分优化 | 第33-40页 |
3.5.1 碳源的确定 | 第33-34页 |
3.5.2 氮源的确定 | 第34-36页 |
3.5.3 金属离子的确定 | 第36-37页 |
3.5.4 Plackett-Burman (PB)实验 | 第37-38页 |
3.5.5 Central Composite Design实验 | 第38-40页 |
3.6 摇瓶发酵条件的优化 | 第40-44页 |
3.6.1 发酵培养基初始pH的确定 | 第40-41页 |
3.6.2 装液量的确定 | 第41页 |
3.6.3 接种量的确定 | 第41-42页 |
3.6.4 培养温度的确定 | 第42-43页 |
3.6.5 种子接种种龄的确定 | 第43页 |
3.6.6 发酵培养时间的确定 | 第43-44页 |
3.7 3 L发酵罐罐上发酵 | 第44-45页 |
3.8 产洋茉莉醛粗酶酶学性质 | 第45-46页 |
3.8.1 酶的最适反应温度 | 第45-46页 |
3.8.2 酶的最适反应pH | 第46页 |
3.9 目的蛋白的初步纯化 | 第46-50页 |
3.9.1 硫酸铵沉淀 | 第46-47页 |
3.9.2 脱盐柱脱盐 | 第47-48页 |
3.9.3 阴离子交换色谱 | 第48页 |
3.9.4 蛋白初步纯化结果 | 第48-50页 |
主要结论与展望 | 第50-51页 |
主要结论 | 第50页 |
存在的问题与展望 | 第50-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-57页 |
附录Ⅰ:作者攻读学术硕士期间发表的论文 | 第57-58页 |
附录Ⅱ:分析方法标准曲线 | 第58-59页 |
附录Ⅲ:16S rDNA序列 | 第59-60页 |
附录Ⅳ:推测目的条带的MALDI-TOF/TOF质谱鉴定 | 第60页 |