| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 缩略语表 | 第9-11页 |
| 1 引言 | 第11-21页 |
| 1.1 bHLH转录因子 | 第11-14页 |
| 1.1.1 bHLH转录因子结构 | 第11页 |
| 1.1.2 bHLH的分类 | 第11-12页 |
| 1.1.3 bHLH的功能 | 第12-14页 |
| 1.2 植物叶片衰老的研究现状 | 第14-19页 |
| 1.2.1 影响植物叶片衰老的因素 | 第14-16页 |
| 1.2.2 叶龄依赖的衰老过程 | 第16-17页 |
| 1.2.3 胁迫诱导的衰老过程 | 第17-19页 |
| 1.3 中间锦鸡儿 | 第19页 |
| 1.4 选题目的及意义 | 第19-20页 |
| 1.5 课题技术路线 | 第20-21页 |
| 2 实验材料和方法 | 第21-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-23页 |
| 2.1.1 植物材料 | 第21页 |
| 2.1.2 实验药品、试剂和仪器 | 第21-23页 |
| 2.1.3 菌株和质粒 | 第23页 |
| 2.2 实验方法 | 第23-35页 |
| 2.2.1 植物处理方法 | 第23-24页 |
| 2.2.2 中间锦鸡儿RNA提取、纯化及cDNA合成 | 第24-26页 |
| 2.2.3 中间锦鸡儿DNA提取 | 第26页 |
| 2.2.4 目的基因的克隆 | 第26-27页 |
| 2.2.5 基因表达分析 | 第27页 |
| 2.2.6 重组质粒构建及感受态细胞的转化方法 | 第27-29页 |
| 2.2.7 质粒提取和目的片段胶回收 | 第29-30页 |
| 2.2.8 农杆菌介导拟南芥的遗传转化 | 第30页 |
| 2.2.9 拟南芥RNA提取、纯化及反转录 | 第30-31页 |
| 2.2.10 拟南芥转基因植物纯合体筛选及鉴定 | 第31-32页 |
| 2.2.11 拟南芥原生质体制备及转化 | 第32-33页 |
| 2.2.12 拟南芥叶绿素含量的提取 | 第33页 |
| 2.2.13 拟南芥离子渗透率检测方法 | 第33-34页 |
| 2.2.14 拟南芥叶片细胞死亡检测方法 | 第34页 |
| 2.2.15 本研究涉及的引物序列 | 第34-35页 |
| 3 结果与分析 | 第35-49页 |
| 3.1 候选CibHLH基因全长克隆 | 第35-36页 |
| 3.2 候选CibHLH的氨基酸序列分析 | 第36-39页 |
| 3.2.1 候选CibHLH与AtbHLH系统进化分析 | 第36-37页 |
| 3.2.2 CibHLH027的保守功能域分析 | 第37-39页 |
| 3.3 CibHLH027基因对逆境胁迫响应分析 | 第39-40页 |
| 3.4 CibHLH027的亚细胞定位观察 | 第40-42页 |
| 3.4.1 CibHLH027与pCANBIA1302载体的重组构建 | 第40-41页 |
| 3.4.2 CibHLH027在拟南芥原生质体中的瞬时表达 | 第41-42页 |
| 3.5 CibHLH027-OE纯合体株系的获得 | 第42-43页 |
| 3.5.1 植物表达载体构建及鉴定 | 第42页 |
| 3.5.2 CibHLH027-OE株系的筛选及鉴定 | 第42-43页 |
| 3.6 CibHLH027基因参与叶片衰老的功能分析 | 第43-49页 |
| 3.6.1 CibHLH027参与黑暗诱导的衰老 | 第44-46页 |
| 3.6.2 CibHLH027对干旱的响应 | 第46-49页 |
| 4 讨论 | 第49-52页 |
| 4.1 CibHLH027的序列分析 | 第49页 |
| 4.2 CibHLH027的表达模式 | 第49-50页 |
| 4.3 CibHLH027促进叶片衰老进程 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 致谢 | 第53-54页 |
| 参考文献 | 第54-62页 |
| 作者简介 | 第62页 |
