| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 略词表 | 第10-12页 |
| 第1章 文献综述 | 第12-18页 |
| ·植物次生代谢的基因工程 | 第12-13页 |
| ·关键酶基因 | 第12-13页 |
| ·转录因子 | 第13页 |
| ·红景天属植物研究进展 | 第13-15页 |
| ·红景天生物活性成分 | 第13-14页 |
| ·红景天药理作用 | 第14页 |
| ·红景天产品的开发应用 | 第14-15页 |
| ·红景天苷生物合成研究进展 | 第15-18页 |
| ·红景天苷生物合成途径探讨 | 第15-16页 |
| ·酪氨酸脱羧酶的研究进展 | 第16-18页 |
| 第2章 绪论 | 第18-20页 |
| ·研究的目的与意义 | 第18页 |
| ·研究的范围与内容 | 第18-19页 |
| ·技术路线 | 第19-20页 |
| 第3章 大花红景天酪氨酸脱羧酶基因的克隆与功能分析 | 第20-38页 |
| ·实验材料及试剂耗材 | 第20-22页 |
| ·植物材料 | 第20页 |
| ·菌株和质粒 | 第20页 |
| ·仪器和设备 | 第20页 |
| ·购买的试剂盒及试剂 | 第20-21页 |
| ·常规试剂配制 | 第21页 |
| ·主要培养基的配方 | 第21-22页 |
| ·常规实验方法与操作步骤介绍 | 第22-25页 |
| ·目的条带的回收 | 第22-23页 |
| ·连接反应 | 第23页 |
| ·大肠杆菌DH5α/Rosetta感受态细胞的制备(CaCl_2法) | 第23-24页 |
| ·连接产物或重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞 | 第24页 |
| ·质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·重组子的鉴定、测序 | 第25页 |
| ·RcTYDC的克隆与分析 | 第25-36页 |
| ·大花红景天总RNA的提取与检测 | 第25-26页 |
| ·从大花红景天总RNA合成第一链cDNA | 第26页 |
| ·目的基因的克隆 | 第26-32页 |
| ·RcTYDC基因的生物信息学分析 | 第32页 |
| ·RcTYDC基因的原核表达及功能验证 | 第32-36页 |
| ·植物表达载体的构建 | 第36页 |
| ·植物表达载体对农杆菌的转化 | 第36-37页 |
| ·大花红景天再生技术的建立 | 第37-38页 |
| 第4章 结果与讨论 | 第38-52页 |
| ·RcTYDC基因全长cDNA的获得 | 第38-39页 |
| ·RcTYDC基因的生物信息学分析 | 第39-45页 |
| ·RcTYDC基因的序列分析 | 第39-40页 |
| ·RcTYDC与其他物种的酪氨酸脱羧酶氨基酸序列的多重比对 | 第40-42页 |
| ·RcTYDC分子进化树的构建 | 第42页 |
| ·RcTYDC蛋白的保守结构域分析 | 第42-43页 |
| ·RcTYDC蛋白亲/疏水性预测 | 第43页 |
| ·RcTYDC蛋白二级结构预测 | 第43-44页 |
| ·RcTYDC蛋白三位级结构预测 | 第44-45页 |
| ·RcTYDC基因的原核表达及功能验证 | 第45-49页 |
| ·RcTYDC基因原核表达载体的构建 | 第45-46页 |
| ·RcTYDC重组蛋白的少量诱导表达 | 第46-47页 |
| ·RcTYDC重组蛋白的大量表达、提取及复性 | 第47-48页 |
| ·RcTYDC重组蛋白含量测定 | 第48页 |
| ·RcTYDC重组蛋白活性检测 | 第48-49页 |
| ·植物表达载体的构建及工程菌的获得 | 第49-50页 |
| ·大花愈伤诱导及再生技术的建立 | 第50-52页 |
| 第5章 结论与展望 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文、参研项目 | 第58-60页 |
| 致谢 | 第60页 |
