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LPS和热应激对猪颗粒细胞的影响及HSP70参与调控机制的研究

符号说明第5-10页
中文摘要第10-12页
Abstract第12-13页
1 前言第14-23页
    1.1 颗粒细胞第14-16页
        1.1.1 颗粒细胞的增殖分化第14页
        1.1.2 颗粒细胞的功能第14-15页
        1.1.3 颗粒细胞与动物生殖第15页
        1.1.4 影响颗粒细胞的因素第15-16页
    1.2 家畜环境因素第16-20页
        1.2.1 LPS简介第16-17页
        1.2.2 LPS结构第17页
        1.2.3 LPS生物活性第17-18页
        1.2.4 LPS对动物机体的影响第18页
        1.2.5 LPS对雌性动物生殖的影响第18-19页
        1.2.6 热应激简介第19页
        1.2.7 热应激对动物机体的影响第19-20页
        1.2.8 热应激对雌性动物生殖的影响第20页
    1.3 热休克蛋白(Heat shock protein,HSPs)第20-22页
        1.3.1 HSP70简介第21页
        1.3.2 HSP70蛋白结构第21页
        1.3.3 HSP70的生物学特性第21页
        1.3.4 HSP70的功能第21-22页
    1.4 本研究目的意义第22-23页
2 材料与方法第23-37页
    2.1 实验材料第23-27页
        2.1.1 细胞来源第23页
        2.1.2 主要试剂第23-24页
        2.1.3 主要仪器第24-25页
        2.1.4 试验相关溶液的配制第25-27页
    2.2 试验方法第27-37页
        2.2.1 猪颗粒细胞的原代培养第27页
        2.2.2 实验设计及分组第27-28页
        2.2.3 扫描电子显微镜检测第28-29页
        2.2.4 细胞增殖检测第29页
        2.2.5 细胞凋亡检测第29-30页
        2.2.6 ELISA法测定E_2分泌量第30页
        2.2.7 基因相对表达量测定第30-33页
        2.2.8 蛋白质免疫印迹试验(Western Blot)第33-36页
        2.2.9 细胞免疫荧光检测第36-37页
    2.3 统计学分析第37页
3 结果与分析第37-49页
    3.1 对颗粒细胞形态、增殖和凋亡的影响及作用机理第37-42页
        3.1.1 LPS和热应激对颗粒细胞形态的影响第37-38页
        3.1.2 LPS对颗粒细胞增殖和凋亡的影响第38-40页
        3.1.3 LPS对颗粒细胞MARKs蛋白表达和增殖、周期相关基因表达的影响第40-42页
    3.2 对颗粒细胞功能的影响第42-44页
        3.2.1 对颗粒细胞E_2分泌及相关基因的影响第42-43页
        3.2.2 对颗粒细胞HSP70基因表达的影响第43-44页
    3.3 HSP70参与调控颗粒细胞E_2分泌功能机制第44-49页
        3.3.1 HSP70抑制或激活对HSP70蛋白表达的影响第44-45页
        3.3.2 抑制HSP70对颗粒细胞E_2分泌相关基因表达的影响第45-46页
        3.3.3 激活HSP70对颗粒细胞E_2分泌相关基因表达的影响第46-47页
        3.3.4 激活HSP70对细胞内Phospho-Smad3蛋白的影响第47-49页
4 讨论第49-54页
    4.1 LPS对颗粒细胞生长的影响第49-51页
        4.1.1 对细胞形态的影响第49-50页
        4.1.2 对细胞增殖凋亡的影响第50-51页
    4.2 LPS对颗粒细胞E_2分泌功能的影响第51-52页
    4.3 热应激对颗粒细胞形态的影响第52页
    4.4 热应激对颗粒细胞E_2分泌功能的影响第52页
    4.5 HSP70在LPS和热应激对颗粒细胞E_2分泌功能影响中的调控第52-54页
5 结论第54-55页
参考文献第55-63页
致谢第63-64页
硕士期间论文发表情况第64页

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