符号说明 | 第5-10页 |
中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
1 前言 | 第14-23页 |
1.1 颗粒细胞 | 第14-16页 |
1.1.1 颗粒细胞的增殖分化 | 第14页 |
1.1.2 颗粒细胞的功能 | 第14-15页 |
1.1.3 颗粒细胞与动物生殖 | 第15页 |
1.1.4 影响颗粒细胞的因素 | 第15-16页 |
1.2 家畜环境因素 | 第16-20页 |
1.2.1 LPS简介 | 第16-17页 |
1.2.2 LPS结构 | 第17页 |
1.2.3 LPS生物活性 | 第17-18页 |
1.2.4 LPS对动物机体的影响 | 第18页 |
1.2.5 LPS对雌性动物生殖的影响 | 第18-19页 |
1.2.6 热应激简介 | 第19页 |
1.2.7 热应激对动物机体的影响 | 第19-20页 |
1.2.8 热应激对雌性动物生殖的影响 | 第20页 |
1.3 热休克蛋白(Heat shock protein,HSPs) | 第20-22页 |
1.3.1 HSP70简介 | 第21页 |
1.3.2 HSP70蛋白结构 | 第21页 |
1.3.3 HSP70的生物学特性 | 第21页 |
1.3.4 HSP70的功能 | 第21-22页 |
1.4 本研究目的意义 | 第22-23页 |
2 材料与方法 | 第23-37页 |
2.1 实验材料 | 第23-27页 |
2.1.1 细胞来源 | 第23页 |
2.1.2 主要试剂 | 第23-24页 |
2.1.3 主要仪器 | 第24-25页 |
2.1.4 试验相关溶液的配制 | 第25-27页 |
2.2 试验方法 | 第27-37页 |
2.2.1 猪颗粒细胞的原代培养 | 第27页 |
2.2.2 实验设计及分组 | 第27-28页 |
2.2.3 扫描电子显微镜检测 | 第28-29页 |
2.2.4 细胞增殖检测 | 第29页 |
2.2.5 细胞凋亡检测 | 第29-30页 |
2.2.6 ELISA法测定E_2分泌量 | 第30页 |
2.2.7 基因相对表达量测定 | 第30-33页 |
2.2.8 蛋白质免疫印迹试验(Western Blot) | 第33-36页 |
2.2.9 细胞免疫荧光检测 | 第36-37页 |
2.3 统计学分析 | 第37页 |
3 结果与分析 | 第37-49页 |
3.1 对颗粒细胞形态、增殖和凋亡的影响及作用机理 | 第37-42页 |
3.1.1 LPS和热应激对颗粒细胞形态的影响 | 第37-38页 |
3.1.2 LPS对颗粒细胞增殖和凋亡的影响 | 第38-40页 |
3.1.3 LPS对颗粒细胞MARKs蛋白表达和增殖、周期相关基因表达的影响 | 第40-42页 |
3.2 对颗粒细胞功能的影响 | 第42-44页 |
3.2.1 对颗粒细胞E_2分泌及相关基因的影响 | 第42-43页 |
3.2.2 对颗粒细胞HSP70基因表达的影响 | 第43-44页 |
3.3 HSP70参与调控颗粒细胞E_2分泌功能机制 | 第44-49页 |
3.3.1 HSP70抑制或激活对HSP70蛋白表达的影响 | 第44-45页 |
3.3.2 抑制HSP70对颗粒细胞E_2分泌相关基因表达的影响 | 第45-46页 |
3.3.3 激活HSP70对颗粒细胞E_2分泌相关基因表达的影响 | 第46-47页 |
3.3.4 激活HSP70对细胞内Phospho-Smad3蛋白的影响 | 第47-49页 |
4 讨论 | 第49-54页 |
4.1 LPS对颗粒细胞生长的影响 | 第49-51页 |
4.1.1 对细胞形态的影响 | 第49-50页 |
4.1.2 对细胞增殖凋亡的影响 | 第50-51页 |
4.2 LPS对颗粒细胞E_2分泌功能的影响 | 第51-52页 |
4.3 热应激对颗粒细胞形态的影响 | 第52页 |
4.4 热应激对颗粒细胞E_2分泌功能的影响 | 第52页 |
4.5 HSP70在LPS和热应激对颗粒细胞E_2分泌功能影响中的调控 | 第52-54页 |
5 结论 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-63页 |
致谢 | 第63-64页 |
硕士期间论文发表情况 | 第64页 |