中文摘要 | 第10-12页 |
Abstract | 第12-13页 |
1 前言 | 第14-21页 |
1.1 铅的污染状况及毒性研究进展 | 第14-15页 |
1.1.1 铅的理化性质 | 第14页 |
1.1.2 铅的污染状况 | 第14-15页 |
1.1.3 铅的肾毒性研究进展 | 第15页 |
1.2 细胞凋亡研究进展 | 第15-20页 |
1.2.1 死亡受体途径 | 第16页 |
1.2.2 内质网应激途径 | 第16-18页 |
1.2.3 线粒体途径 | 第18-20页 |
1.3 葛根素的作用及研究进展 | 第20-21页 |
1.3.1 葛根素的理化性质 | 第20页 |
1.3.2 葛根素的药理学研究进展 | 第20-21页 |
2 材料与方法 | 第21-38页 |
2.1 实验材料 | 第21-22页 |
2.2 主要试剂 | 第22-23页 |
2.3 主要仪器 | 第23页 |
2.4 相关实验试剂的配制 | 第23-27页 |
2.4.1 磷酸盐平衡液PBS的配制 | 第23-24页 |
2.4.2 消毒液酸液(次强酸)的配制 | 第24页 |
2.4.3 血清的处理 | 第24页 |
2.4.4 Calcein-AM和CoC_l2?6H_2O配制 | 第24-25页 |
2.4.5 硝酸铅毒液配制 | 第25页 |
2.4.6 DMEM-F12细胞培养基的配制与除菌 | 第25页 |
2.4.7 NaOH和HCl溶液配制 | 第25页 |
2.4.8 MTT溶液的配制 | 第25页 |
2.4.9 鼠尾胶原的制备 | 第25-26页 |
2.4.10 Western Blot相关溶液的配制 | 第26-27页 |
2.5 试验方法 | 第27-38页 |
2.5.1 SD大鼠肾小管上皮细胞原代培养及传代培养 | 第27-29页 |
2.5.2 实验分组 | 第29页 |
2.5.3 MTT法检测细胞存活率 | 第29-30页 |
2.5.4 流式细胞术检测细胞凋亡率 | 第30页 |
2.5.5 激光共聚焦显微技术检测MPTP开放程度 | 第30-31页 |
2.5.6 激光共聚焦显微技术检测线粒体断裂情况 | 第31页 |
2.5.7 荧光定量PCR | 第31-34页 |
2.5.8 蛋白质免疫印迹试验(Western Blot) | 第34-37页 |
2.5.9 统计学分析 | 第37-38页 |
3 结果与分析 | 第38-60页 |
3.1 PU最佳保护浓度的选择 | 第38-39页 |
3.2 相差显微镜观察PU拮抗Pb诱导细胞损伤的细胞形态学变化 | 第39-40页 |
3.3 流式细胞术检测PU拮抗Pb诱导细胞凋亡率的变化 | 第40-42页 |
3.4 流式细胞术检测细胞内ROS水平和比色法检测细胞内MDA含量 | 第42-44页 |
3.5 流式细胞术检测线粒体膜电位(Δψm)的变化 | 第44-45页 |
3.6 激光共聚焦显微技术检测线粒体通透性转换孔(MPTP)开放程度 | 第45-47页 |
3.7 激光共聚焦显微技术检测线粒体形态断裂(Mito-tracker Red染色) | 第47-49页 |
3.8 Pb染毒以及添加PU共孵育后对Cyt-c蛋白表达量的影响 | 第49-51页 |
3.9 Pb染毒以及添加PU共孵育后对Cleaved caspase-9、Cleaved caspase-3 和CleavedPARP蛋白表达量的影响 | 第51-53页 |
3.10 Pb染毒以及添加PU共孵育后对细胞内ANT蛋白表达量和ATP水平的影响 | 第53-56页 |
3.11 Pb染毒以及添加PU共孵育后对细胞内Bcl-2 和Bax mRNA以及蛋白表达水平的影响 | 第56-60页 |
3.11.1 Pb染毒以及添加PU共孵育后对细胞内Bcl-2 和Bax mRNA表达水平的影响 | 第56-58页 |
3.11.2 Pb染毒以及添加PU共孵育后对细胞内Bcl-2 和Bax蛋白表达水平的影响 | 第58-60页 |
4 讨论 | 第60-64页 |
4.1 铅浓度的选择 | 第60-61页 |
4.2 葛根素浓度的选择 | 第61页 |
4.3 葛根素与细胞凋亡 | 第61-62页 |
4.4 葛根素与线粒体凋亡途径 | 第62-64页 |
5 结论 | 第64-66页 |
参考文献 | 第66-71页 |
致谢 | 第71-72页 |
硕士期间论文发表情况 | 第72页 |