中文摘要 | 第4-7页 |
abstract | 第7-10页 |
中英文缩略词对照表 | 第16-17页 |
绪论 | 第17-19页 |
第1章 文献综述 | 第19-31页 |
1.1 卵巢癌的研究进展 | 第19-22页 |
1.1.1 卵巢癌的流行病学 | 第19页 |
1.1.2 卵巢癌的临床症状 | 第19-20页 |
1.1.3 卵巢癌的诊断与分类 | 第20-21页 |
1.1.4 卵巢癌的治疗策略 | 第21-22页 |
1.2 卵巢癌与生物靶向治疗药 | 第22-23页 |
1.3 香豆素类药物的发展历史 | 第23-24页 |
1.3.1 香豆素类药物的应用前景 | 第23-24页 |
1.3.2 香豆素类药物在肿瘤治疗中的应用 | 第24页 |
1.4 双香豆素的研究进展 | 第24-25页 |
1.4.1 双香豆素的制备与药物特性 | 第24页 |
1.4.2 双香豆素的临床应用 | 第24-25页 |
1.4.3 双香豆素的抗肿瘤机制 | 第25页 |
1.5 丙酮酸脱氢酶激酶的研究进展 | 第25-29页 |
1.5.1 丙酮酸脱氢酶复合物的组成结构 | 第25-26页 |
1.5.2 丙酮酸脱氢酶复合物的磷酸化 | 第26-27页 |
1.5.3 丙酮酸脱氢酶激酶I的研究进展 | 第27-28页 |
1.5.4 丙酮酸脱氢酶激酶抑制剂的研究进展 | 第28-29页 |
1.6 结语 | 第29-31页 |
第2章 双香豆素对PDK1活性及卵巢癌细胞株增殖和凋亡的影响 | 第31-47页 |
2.1 材料和仪器 | 第31-32页 |
2.1.1 实验细胞与试剂 | 第31-32页 |
2.1.2 主要仪器 | 第32页 |
2.2 实验方法 | 第32-39页 |
2.2.1 计算机软件分析双香豆素与PDK1的可能结合位点 | 第32-33页 |
2.2.2 ELISA分析双香豆素与二氯乙酸盐对PDK1活性的影响 | 第33-34页 |
2.2.3 卵巢癌细胞复苏、培养及形态学观察 | 第34-35页 |
2.2.4 MTT法检测双香豆素和二氯乙酸盐对卵巢癌细胞的活力影响 | 第35-36页 |
2.2.5 免疫印迹法检测双香豆素对卵巢癌细胞PDK1活性的影响及Caspase3、PARP的表达 | 第36-38页 |
2.2.6 Hoechst 33342 染色检测双香豆素对SKOV3细胞凋亡的影响 | 第38页 |
2.2.7 流式细胞术检测双香豆素对卵巢癌细胞凋亡的影响 | 第38-39页 |
2.2.8 统计学分析 | 第39页 |
2.3 结果与讨论 | 第39-45页 |
2.3.1 双香豆素与PDK1的硫辛酰胺位点结合,并抑制PDK1活性 | 第39-42页 |
2.3.2 双香豆素抑制卵巢癌细胞株增殖,促进染色质固缩 | 第42-43页 |
2.3.3 双香豆素激活Caspase3依赖的凋亡通路 | 第43-44页 |
2.3.4 双香豆素促进卵巢癌细胞株凋亡 | 第44-45页 |
2.4 本章结论 | 第45-47页 |
第3章 双香豆素对卵巢癌细胞株糖代谢、ROS以及MMP的影响 | 第47-61页 |
3.1 材料和仪器 | 第47页 |
3.1.1 实验试剂 | 第47页 |
3.1.2 实验仪器 | 第47页 |
3.2 实验方法 | 第47-53页 |
3.2.1 葡萄糖定量试剂盒检测双香豆素对卵巢癌细胞株耗糖量的影响 | 第47-49页 |
3.2.2 乳酸定量试剂盒检测双香豆素对卵巢癌细胞株生成乳酸的影响 | 第49页 |
3.2.3 OCR检测双香豆素对卵巢癌细胞株耗氧率的影响 | 第49-50页 |
3.2.4 ECAR检测双香豆素对卵巢癌细胞株泌酸率的影响 | 第50-51页 |
3.2.5 双香豆素对卵巢癌细胞株线粒体内ROS的影响的测定 | 第51-52页 |
3.2.6 双香豆素对卵巢癌细胞株MMP的影响的测定 | 第52页 |
3.2.7 统计学分析 | 第52-53页 |
3.3 结果与讨论 | 第53-59页 |
3.3.1 葡萄糖耗量增加,乳酸生成减少 | 第53-54页 |
3.3.2 耗氧率增加 | 第54-55页 |
3.3.3 泌酸率减少 | 第55-56页 |
3.3.4 线粒体内ROS水平升高 | 第56-57页 |
3.3.5 线粒体膜电势降低 | 第57-59页 |
3.4 本章结论 | 第59-61页 |
第4章 运用SKOV3皮下成瘤裸鼠模型研究双香豆素在体内对卵巢肿瘤细胞凋亡的影响 | 第61-73页 |
4.1 材料和仪器 | 第61-62页 |
4.1.1 细胞株 | 第61页 |
4.1.2 实验动物 | 第61页 |
4.1.3 实验试剂 | 第61-62页 |
4.1.4 实验仪器 | 第62页 |
4.2 实验方法 | 第62-68页 |
4.2.1 皮下SKOV3卵巢癌裸鼠模型的构建、实验分组及测量方法 | 第62-63页 |
4.2.2 免疫印迹法测双香豆素体内对SKOV3细胞PDK1活性的影响 | 第63-65页 |
4.2.3 免疫印迹法测双香豆素体内对SKOV3细胞凋亡的影响 | 第65页 |
4.2.4 免疫组化法测双香豆素体内对SKOV3细胞p-PDH的表达水平 | 第65-67页 |
4.2.5 TUNEL法测双香豆素体内对SKOV3细胞的凋亡影响 | 第67页 |
4.2.6 统计学分析 | 第67-68页 |
4.3 结果与讨论 | 第68-71页 |
4.3.1 皮下肿瘤动物模型给药后体重,肿瘤体积和肿瘤肿瘤的改变 | 第68-69页 |
4.3.2 双香豆素体内对卵巢癌细胞PDK1活性的影响 | 第69-70页 |
4.3.3 双香豆素体内对卵巢肿瘤细胞凋亡的影响 | 第70-71页 |
4.4 本章结论 | 第71-73页 |
第5章 结论和创新点 | 第73-75页 |
5.1 本文结论 | 第73-74页 |
5.2 创新点 | 第74-75页 |
参考文献 | 第75-87页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第87-89页 |
致谢 | 第89-90页 |