| 符号说明 | 第4-8页 |
| 中文摘要 | 第8-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 1 前言 | 第12-32页 |
| 1.1 植物传粉与受精的细胞识别 | 第12页 |
| 1.2 花粉与雌蕊组织的相互作用 | 第12-14页 |
| 1.3 粘附和水合过程中花粉—柱头乳突细胞互作 | 第14-16页 |
| 1.4 ROS的产生及其对于植物生长发育的作用 | 第16-24页 |
| 1.4.1 ROS的种类 | 第16-17页 |
| 1.4.2 ROS的生化特性 | 第17-18页 |
| 1.4.3 ROS的作用 | 第18-19页 |
| 1.4.4 植物细胞中ROS的来源和功能 | 第19-24页 |
| 1.4.4.1 叶绿体 | 第20-21页 |
| 1.4.4.2 线粒体 | 第21页 |
| 1.4.4.3 过氧化物酶体 | 第21-22页 |
| 1.4.4.4 内质网 | 第22页 |
| 1.4.4.5 质外体 | 第22页 |
| 1.4.4.6 质膜 | 第22-23页 |
| 1.4.4.7 细胞壁 | 第23-24页 |
| 1.5 植物中ROS的抗氧化清除系统 | 第24-28页 |
| 1.5.1 ROS的酶促清除系统 | 第25-26页 |
| 1.5.1.1 过氧化氢酶 | 第25页 |
| 1.5.1.2 抗坏血酸过氧化物酶 | 第25页 |
| 1.5.1.3 愈创木酚过氧化物酶 | 第25页 |
| 1.5.1.4 超氧化物歧化酶 | 第25-26页 |
| 1.5.2 ROS的非酶促清除系统及相关分子 | 第26-28页 |
| 1.5.2.1 抗坏血酸 | 第26页 |
| 1.5.2.2 谷胱甘肽 | 第26-27页 |
| 1.5.2.3 生育酚 | 第27页 |
| 1.5.2.4 类胡萝卜素 | 第27页 |
| 1.5.2.5 类黄酮 | 第27-28页 |
| 1.6 ROS参与植物的生殖过程 | 第28页 |
| 1.7 ROS参与花粉—柱头互作 | 第28-29页 |
| 1.8 K~+通道的基因SPIK在有性繁殖过程中的作用 | 第29-30页 |
| 1.9 本研究的目的及意义 | 第30-32页 |
| 2 材料与方法 | 第32-45页 |
| 2.1 实验材料 | 第32-33页 |
| 2.1.1 实验材料及其生长环境 | 第32页 |
| 2.1.2 菌株及质粒 | 第32页 |
| 2.1.3 各种酶及生化试剂 | 第32-33页 |
| 2.1.3.1 酶类 | 第32-33页 |
| 2.1.3.2 基本化学药剂 | 第33页 |
| 2.2 实验方法 | 第33-45页 |
| 2.2.1 表达载体的构建 | 第33-37页 |
| 2.2.1.1 PCR引物设计 | 第33页 |
| 2.2.1.2 PCR扩增目的片段 | 第33-34页 |
| 2.2.1.3 PCR产物的电泳检测及回收 | 第34页 |
| 2.2.1.4 目的片段与克隆载体的连接 | 第34页 |
| 2.2.1.5 大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第34-35页 |
| 2.2.1.6 大肠杆菌感受态细胞的转化（热激法） | 第35-36页 |
| 2.2.1.7 大肠杆菌的菌落PCR鉴定 | 第36页 |
| 2.2.1.8 质粒DNA的提取 | 第36页 |
| 2.2.1.9 质粒DNA的酶切验证 | 第36-37页 |
| 2.2.1.10 DNA片段的回收 | 第37页 |
| 2.2.1.11 目的DNA片段与质粒DNA片段的连接 | 第37页 |
| 2.2.2 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备与转化 | 第37-38页 |
| 2.2.2.1 根癌农杆菌GV3101感受态细胞的制备 | 第37-38页 |
| 2.2.2.2 冻融法转化农杆菌 | 第38页 |
| 2.2.3 拟南芥的种植与转化 | 第38-39页 |
| 2.2.3.1 拟南芥的种植 | 第38-39页 |
| 2.2.3.2 拟南芥的转化 | 第39页 |
| 2.2.4 植物总DNA的提取 | 第39-40页 |
| 2.2.5 花粉的冲洗实验 | 第40页 |
| 2.2.6 花粉的水合实验 | 第40页 |
| 2.2.7 花粉的亚历山大染色 | 第40-41页 |
| 2.2.8 花粉萌发实验 | 第41页 |
| 2.2.9 花粉的CM-H_2DCFDA染色 | 第41页 |
| 2.2.10 花粉的收集 | 第41-42页 |
| 2.2.11 花粉RNA的提取 | 第42页 |
| 2.2.12 花粉RNA的反转录 | 第42-43页 |
| 2.2.13 Real-time PCR分析 | 第43页 |
| 2.2.14 测定花粉中的钾含量 | 第43-45页 |
| 3 结果与分析 | 第45-55页 |
| 3.1 过表达CAT3抑制花粉在柱头表面的水合 | 第45-47页 |
| 3.1.1 过表达CAT3植株的获得 | 第45-46页 |
| 3.1.2 过表达CAT3降低花粉的活性氧水平 | 第46页 |
| 3.1.3 过表达CAT3抑制花粉在柱头表面的水合 | 第46-47页 |
| 3.2 fis1A花粉活性氧水平降低且部分不能水合 | 第47-48页 |
| 3.3 kinβγ-2/+花粉的RNA-seq数据分析 | 第48-51页 |
| 3.4 SPIK在kinβγ 突变体花粉中表达降低 | 第51-52页 |
| 3.5 SPIK参与花粉在柱头表面的水合 | 第52-54页 |
| 3.6 kinβγ 突变体花粉钾含量降低 | 第54-55页 |
| 4 讨论 | 第55-58页 |
| 5 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-70页 |
| 附录 | 第70-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表的论文及成果 | 第82页 |
