| 摘要 | 第6-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 1 绪论 | 第15-28页 |
| 1.1 引言 | 第15页 |
| 1.2 谷氨酰胺转胺酶概述 | 第15-20页 |
| 1.2.1 谷氨酰胺转胺酶的来源 | 第15-16页 |
| 1.2.2 微生物谷氨酰胺转胺酶的结构 | 第16页 |
| 1.2.3 微生物谷氨酰胺转胺酶的成熟机制 | 第16-17页 |
| 1.2.4 微生物谷氨酰胺转胺酶的催化机制 | 第17-18页 |
| 1.2.5 微生物谷氨酰胺转胺酶的理化性质 | 第18页 |
| 1.2.6 微生物谷氨酰胺转胺酶的应用 | 第18-20页 |
| 1.3 微生物谷氨酰胺转胺酶的稳定性 | 第20-23页 |
| 1.3.1 不同稳定性微生物谷氨酰胺转胺酶的筛选 | 第20-21页 |
| 1.3.2 微生物谷氨酰胺转胺酶结构与稳定性的关系 | 第21页 |
| 1.3.3 影响微生物谷氨酰胺转胺酶稳定性的因素 | 第21-23页 |
| 1.4 微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化 | 第23-25页 |
| 1.4.1 常见的蛋白质分离纯化方法 | 第23页 |
| 1.4.2 微生物谷氨酰胺转胺酶的分离纯化方法 | 第23-25页 |
| 1.5 本文的立题目的和意义 | 第25-26页 |
| 1.6 本文主要研究内容 | 第26-28页 |
| 2 不同稳定性的微生物谷氨酰胺转胺酶的检测及筛选 | 第28-46页 |
| 2.1 材料与方法 | 第28-32页 |
| 2.1.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 2.1.2 实验方法 | 第29-32页 |
| 2.2 结果与分析 | 第32-43页 |
| 2.2.1 固体条件下微生物谷氨酰胺转胺酶的保存稳定性 | 第32-33页 |
| 2.2.2 液体条件下微生物谷氨酰胺转胺酶的保存稳定性 | 第33-34页 |
| 2.2.3 微生物谷氨酰胺转胺酶中蛋白酶含量检测 | 第34-35页 |
| 2.2.4 电泳法检测微生物谷氨酰胺转胺酶稳定性方法建立 | 第35-36页 |
| 2.2.5 37℃保存加速法检测微生物谷氨酰胺转胺酶稳定性方法建立 | 第36-38页 |
| 2.2.6 不同稳定性微生物谷氨酰胺转胺酶的筛选 | 第38-39页 |
| 2.2.7 电泳检测法的验证 | 第39-41页 |
| 2.2.8 37℃保存加速法的验证 | 第41-43页 |
| 2.3 讨论 | 第43-45页 |
| 2.4 本章小结 | 第45-46页 |
| 3 微生物谷氨酰胺转胺酶异构体的分离及其与稳定性的关系 | 第46-62页 |
| 3.1 材料与方法 | 第46-48页 |
| 3.1.1 实验材料 | 第46-47页 |
| 3.1.2 实验方法 | 第47-48页 |
| 3.2 结果与分析 | 第48-58页 |
| 3.2.1 微生物谷氨酰胺转胺酶异构体的发现 | 第48-49页 |
| 3.2.2 缓冲体系pH优化 | 第49-51页 |
| 3.2.3 洗脱液离子强度的优化 | 第51-52页 |
| 3.2.4 洗脱体积的优化 | 第52-54页 |
| 3.2.5 不同上样量条件下分离方法稳定性的检测 | 第54-55页 |
| 3.2.6 分离方法可重复性检测 | 第55-57页 |
| 3.2.7 不同批号微生物谷氨酰胺转胺酶异构体的分离 | 第57-58页 |
| 3.3 讨论 | 第58-61页 |
| 3.4 本章小结 | 第61-62页 |
| 4 微生物谷氨酰胺转胺酶异构体性质的研究 | 第62-84页 |
| 4.1 材料与方法 | 第62-65页 |
| 4.1.1 实验材料 | 第62-63页 |
| 4.1.2 实验方法 | 第63-65页 |
| 4.2 结果与分析 | 第65-79页 |
| 4.2.1 异构体分子量的测定 | 第65-67页 |
| 4.2.2 异构体等电点的测定 | 第67页 |
| 4.2.3 异构体N端测序 | 第67-69页 |
| 4.2.4 异构体最适反应温度和温度稳定性 | 第69-70页 |
| 4.2.5 异构体最适反应pH和pH稳定性 | 第70-71页 |
| 4.2.6 异构体酶动力学 | 第71-73页 |
| 4.2.7 pH对异构体比例的影响 | 第73-74页 |
| 4.2.8 吐温对异构体比例的影响 | 第74-75页 |
| 4.2.9 EDTA对异构体比例的影响 | 第75-76页 |
| 4.2.10 异构体之间的转化关系 | 第76-77页 |
| 4.2.11 微生物谷氨酰胺转胺酶阳离子交换层析后阴离子交换层析 | 第77-78页 |
| 4.2.12 微生物谷氨酰胺转胺酶阴离子交换层析后阳离子交换层析 | 第78-79页 |
| 4.3 讨论 | 第79-82页 |
| 4.4 本章小结 | 第82-84页 |
| 5 微生物谷氨酰胺转胺酶的精细纯化及其纯化后稳定性的检测 | 第84-100页 |
| 5.1 材料与方法 | 第85-86页 |
| 5.1.1 实验材料 | 第85页 |
| 5.1.2 实验方法 | 第85-86页 |
| 5.2 结果与分析 | 第86-96页 |
| 5.2.1 缓冲体系pH优化 | 第86-88页 |
| 5.2.2 缓冲体系离子强度的优化 | 第88-89页 |
| 5.2.3 上样量的优化 | 第89-91页 |
| 5.2.4 纯化方法可重复性检测 | 第91-92页 |
| 5.2.5 微生物谷氨酰胺转胺酶酶粉成品的制备 | 第92-93页 |
| 5.2.6 不同稳定性微生物谷氨酰胺转胺酶分离纯化比较 | 第93-94页 |
| 5.2.7 不同稳定性微生物谷氨酰胺转胺酶纯化后纯度及稳定性检测 | 第94-96页 |
| 5.2.8 阴离子交换层析纯化工艺的放大 | 第96页 |
| 5.3 讨论 | 第96-98页 |
| 5.4 本章小结 | 第98-100页 |
| 全文总结与展望 | 第100-104页 |
| 参考文献 | 第104-112页 |
| 附录 | 第112-113页 |
| 致谢 | 第113页 |
