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Slug与c-Met的新型调控方式在高转移卵巢癌治疗中的作用研究

致谢第4-5页
中文摘要第5-9页
ABSTRACT第9-13页
缩略词表第14-18页
1 前言第18-21页
2 实验材料与仪器第21-24页
    2.1 细胞株第21页
    2.2 动物第21页
    2.3 仪器第21页
    2.4 药物和主要试剂第21-24页
        2.4.1 药物第21-22页
        2.4.2 质粒第22页
        2.4.3 主要试剂第22页
        2.4.4 Western Blot实验中部分试剂的配制第22-24页
3 实验方法第24-31页
    3.1 细胞培养第24页
    3.2 高转移卵巢癌细胞株的构建第24页
    3.3 划痕损伤修复实验检测细胞运动能力第24页
    3.4 Transwell小室实验检测细胞迁移能力第24-25页
    3.5 鸡胚尿囊膜实验模型检测细胞血管内扩散能力第25页
    3.6 siRNA基因沉默第25页
    3.7 质粒转染第25-26页
    3.8 免疫荧光实验第26页
    3.9 免疫组化实验第26-27页
    3.10 Western blot检测相关蛋白表达第27-28页
        3.10.1 提取总蛋白第27页
        3.10.2 Western blot第27-28页
    3.11 Real-Time PCR检测相关基因表达第28-29页
        3.11.1 总mRNA提取(Trizol一步法)第28页
        3.11.2 逆转录为cDNA第28页
        3.11.3 PCR(聚合酶链反应)第28-29页
    3.12 Elisa试剂盒检测相关蛋白分泌第29页
    3.13 SRB法测定细胞生存率第29-30页
    3.14 体内实验检测不同细胞的荷瘤小鼠模型对药物敏感性第30页
    3.15 数据分析第30-31页
4 实验结果第31-60页
    4.1 SKOV3/T4细胞株的构建第31-34页
        4.1.1 SKOV3/T4细胞株的构建第31页
        4.1.2 SKOV3/T4细胞株运动能力的检测第31-34页
    4.2 SKOV3/T4细胞中EMT相关特征蛋白的检测第34-37页
        4.2.1 SKOV3/T4细胞形态变化第34页
        4.2.2 SKOV3/T4细胞中EMT相关特征蛋白的检测第34-36页
        4.2.3 SKOV3/T4细胞中EMT相关重要转录因子的检测第36-37页
    4.3 转录因子Slug在SKOV3/T4细胞高转移性状维持中的作用第37-39页
        4.3.1 SKOV3亲本细胞中Slug过表达对EMT相关特征蛋白表达的影响第37-38页
        4.3.2 SKOV3亲本细胞中Slug过表达对细胞运动能力的影响第38-39页
    4.4 转录因子Slug与c-Met蛋白磷酸化之间相关性研究第39-44页
        4.4.1 SKOV3/T4细胞中酪氨酸激酶EGFR、VEGFR和c-Met的激活情况第39-40页
        4.4.2 转录因子Slug与c-Met蛋白磷酸化存在相关性第40-42页
        4.4.3 卵巢癌临床样本中转录因子Slug与c-Met磷酸化水平的相关性第42-44页
    4.5 SKOV3/T4细胞中c-Met信号通路以HGF配体非依赖的方式激活第44-46页
        4.5.1 SKOV3/T4细胞中c-Met与HGF mRNA表达水平的检测第44-45页
        4.5.2 SKOV3/T4细胞中HGF蛋白表达水平的检测第45页
        4.5.3 SKOV3/T4细胞中HGF蛋白分泌水平的检测第45-46页
    4.6 Slug通过Fibronectin调控c-Met蛋白磷酸化第46-50页
        4.6.1 IntegrinaV参与SKOV3/T4细胞c-Met蛋白磷酸化第46-48页
        4.6.2 Slug通过Fibronectin调控c-Met蛋白磷酸化第48-50页
    4.7 c-Met抑制剂对Slug过表达细胞运动能力的影响第50-52页
    4.8 转录因子Slug对细胞药物敏感性的影响第52-54页
        4.8.1 SKOV3/T4细胞药物敏感性的检测第52-53页
        4.8.2 转录因子Slug对细胞药物敏感性的影响第53-54页
    4.9 Slug和c-Met调控通路对SKOV3/T4细胞药物敏感性的影响第54-60页
        4.9.1 SKOV3/T4及Slug过表达细胞对c-Met抑制剂敏感性检测第54-56页
        4.9.2 不同细胞株中Slug的表达水平与对c-Met抑制剂敏感性的相关性第56-57页
        4.9.3 干扰Slug和c-Met调控通路对SKOV3/T4细胞药物敏感性的影响第57-58页
        4.9.4 SKOV3/T4细胞对ADR及XL184药物敏感性差异的体内验证第58-60页
5 讨论第60-65页
参考文献第65-72页
综述第72-89页
    参考文献第81-89页
硕士期间论文及会议摘要第89-90页
参与科研项目第90页
作者简介第90页

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