中文摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
1 前言 | 第12-24页 |
·脂肪生成机制及候选基因研究 | 第12-18页 |
·脂肪生成机制 | 第12-13页 |
·影响脂肪沉积的因素 | 第13-15页 |
·脂肪沉积候选基因的研究 | 第15-18页 |
·miRNA的研究进展 | 第18-23页 |
·miRNA的发现 | 第19-21页 |
·miRNA的生物合成 | 第21页 |
·miRNA的作用机制 | 第21-22页 |
·翻译抑制 | 第21-22页 |
·mRNA降解 | 第22页 |
·转录调控 | 第22页 |
·miRNA的检测 | 第22-23页 |
·本研究的目的意义 | 第23-24页 |
2 材料与方法 | 第24-37页 |
·试验材料 | 第24-26页 |
·试验动物及样品采集 | 第24页 |
·主要数据库 | 第24-25页 |
·生物分析软件 | 第25页 |
·主要试剂 | 第25页 |
·主要仪器 | 第25-26页 |
·试验方法 | 第26-37页 |
·样品总RNA的提取 | 第26页 |
·Total RNA样品检测 | 第26-27页 |
·small RNA文库的构建 | 第27-30页 |
·3’端接头连接 | 第27-28页 |
·5’端接头连接 | 第28页 |
·反转录以及扩增反应 | 第28-29页 |
·cDNA纯化 | 第29-30页 |
·文库质检及上机测序 | 第30页 |
·small测序数据分析 | 第30-32页 |
·有效数据的获得 | 第31页 |
·比对注释 | 第31页 |
·样品间差异表达分析 | 第31-32页 |
·数字基因表达谱文库构建 | 第32页 |
·mRNA的分离 | 第32页 |
·mRNA建库及测序 | 第32页 |
·数字基因表达谱测序数据分析 | 第32-33页 |
·测序数据质量评估及处理 | 第32-33页 |
·基因表达定量 | 第33页 |
·差异表达miRNA的靶基因预测 | 第33页 |
·靶基因的GO注释和KEGG-PATHWAY分析 | 第33-34页 |
·差异表达miRNAs的qRT-PCR验证 | 第34-37页 |
·肝脏组织总RNA的提取及质量检测 | 第34-35页 |
·miRNA反转录 | 第35-36页 |
·qRT-PCR | 第36-37页 |
3 结果与分析 | 第37-54页 |
·RNA质量检测 | 第37-39页 |
·small RNA测序数据分析 | 第39-43页 |
·测序数据总览 | 第39-40页 |
·序列长度统计 | 第40页 |
·测序原始数据质控 | 第40-41页 |
·miRNA的差异表达分析 | 第41-43页 |
·数字基因表达谱结果分析 | 第43-49页 |
·原始序列质控 | 第43-44页 |
·Reads比对数据结果 | 第44-45页 |
·Gene比对数据结果 | 第45-46页 |
·测序饱和度分析 | 第46-47页 |
·显著性差异表达基因的分布散点图 | 第47-48页 |
·差异表达基因分析 | 第48-49页 |
·差异表达miRNA靶基因与差异显著mRNA关联分析 | 第49-50页 |
·靶基因的GO注释和KEGG分析 | 第50-52页 |
·差异表达miRNA的qRT-PCR验证 | 第52-54页 |
4 讨论 | 第54-57页 |
·Solexa测序数据质量的可靠性 | 第54-55页 |
·miRNA与其靶基因之间关系的研究及对脂肪沉积的调控 | 第55-57页 |
5 结论 | 第57-59页 |
参考文献 | 第59-69页 |
致谢 | 第69页 |