| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 符号说明 | 第9-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-34页 |
| ·骨骼肌的发育 | 第13-21页 |
| ·胚胎发育中骨骼肌的形成 | 第13页 |
| ·骨骼肌的胚后发育 | 第13-14页 |
| ·骨骼肌的形成相关调控因子 | 第14-15页 |
| ·肌纤维类型 | 第15-21页 |
| ·MicroRNA 概述 | 第21-26页 |
| ·MicroRNA的定义 | 第21页 |
| ·MicroRNA的形成与作用机制 | 第21-22页 |
| ·现代生物学技术在miRNA研究中的应用 | 第22页 |
| ·miRNA靶基因的预测与验证方法的研究 | 第22-24页 |
| ·肌肉发育过程中miRNAs的作用 | 第24-26页 |
| ·miR143、miR145的研究现状 | 第26页 |
| ·WNT信号 | 第26-30页 |
| ·WNT家族 | 第27页 |
| ·Wnt信号通路 | 第27-28页 |
| ·Wnt/β-catenin信号通路在骨骼肌发育中的研究 | 第28-30页 |
| ·细胞转染技术 | 第30-33页 |
| ·本实验的研究内容和意义 | 第33-34页 |
| 2 实验材料和方法 | 第34-42页 |
| ·试验材料 | 第34-36页 |
| ·实验试剂 | 第34页 |
| ·主要仪器设备 | 第34-35页 |
| ·细胞 | 第35页 |
| ·引物合成 | 第35-36页 |
| ·试验方法 | 第36-39页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第36-37页 |
| ·RNA质量检测 | 第37页 |
| ·mRNA反转录 | 第37-38页 |
| ·miRNA反转录 | 第38页 |
| ·Real-time PCR | 第38-39页 |
| ·C2C12细胞培养 | 第39-41页 |
| ·C2C12细胞分化液的配制 | 第39页 |
| ·C2C12细胞的复苏 | 第39页 |
| ·C2C12细胞的传代 | 第39-40页 |
| ·C2C12细胞铺板 | 第40页 |
| ·C2C12细胞转染 | 第40-41页 |
| ·免疫荧光 | 第41页 |
| ·数据处理 | 第41-42页 |
| 3 结果与分析 | 第42-56页 |
| ·C2C12分化过程中MIR-143和MIR-145表达水平的变化 | 第42页 |
| ·MIR-143和MIR-145转染效率检测 | 第42-43页 |
| ·过表达或抑制MIR-143和MIR-145表达对成肌分化因子的影响 | 第43-48页 |
| ·miR-143和miR-145对C2C12细胞成肌分化早期调节因子的影响 | 第43-46页 |
| ·miR-143和miR-145对C2C12细胞成肌分化后期调节因子的影响 | 第46-47页 |
| ·miR-143和miR-145对C2C12细胞成肌分化标志基因的影响 | 第47-48页 |
| ·过表达或抑制MIR-143和MIR-145对肌纤维类型分化的影响 | 第48-51页 |
| ·过表达或抑制miR-143对肌纤维类型分化的影响 | 第48-50页 |
| ·过表达或抑制miR-145对肌纤维类型分化的影响 | 第50-51页 |
| ·过表达或抑制MIR-143和MIR-145对WNT信号通路重要基因的影响 | 第51-56页 |
| ·过表达或抑制miR-143对Wnt信号通路重要基因的影响 | 第52页 |
| ·过表达或抑制miR-145对Wnt信号通路重要基因的影响 | 第52-56页 |
| 4 讨论 | 第56-59页 |
| ·细胞培养与转染 | 第56页 |
| ·过表达和低表达MIR143和MIR145对C2C12细胞分化的影响作用。 | 第56-57页 |
| ·生肌调节因子家族 | 第57-58页 |
| ·Wnt信号通路 | 第58页 |
| ·下一步实验设计 | 第58-59页 |
| 5 结论 | 第59-60页 |
| 6 参考文献 | 第60-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
