FSTL3基因在绵羊常年发情中的功能研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 1. 文献综述 | 第11-20页 |
| ·动物的季节性繁殖 | 第11-13页 |
| ·季节性繁殖的定义 | 第11页 |
| ·季节性繁殖的调控机理 | 第11-13页 |
| ·颗粒细胞的研究进展 | 第13-16页 |
| ·颗粒细胞的生物学作用 | 第13-15页 |
| ·影响颗粒细胞增殖与凋亡的因素 | 第15-16页 |
| ·FSTL3的研究进展 | 第16-18页 |
| ·FSTL3的结构 | 第16页 |
| ·FSTL3的生物学机制 | 第16-18页 |
| ·本实验的研究内容和意义 | 第18-20页 |
| ·研究内容 | 第18页 |
| ·研究意义 | 第18-20页 |
| 2. 材料和方法 | 第20-32页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·试验时间与地点 | 第20页 |
| ·主要试剂 | 第20-21页 |
| ·主要仪器设备 | 第21-22页 |
| ·试验方法 | 第22-32页 |
| ·卵巢颗粒细胞原代培养 | 第22-23页 |
| ·siRNA的设计与合成 | 第23页 |
| ·RNAi | 第23-24页 |
| ·细胞免疫荧光染色 | 第24页 |
| ·细胞总RNA和蛋白质提取 | 第24-26页 |
| ·RNA提取 | 第24-25页 |
| ·RNA浓度与质量检测 | 第25页 |
| ·蛋白质提取 | 第25-26页 |
| ·蛋白质浓度测定 | 第26页 |
| ·反转录 | 第26-27页 |
| ·荧光实时定量检测 | 第27-29页 |
| ·引物设计合成 | 第27-28页 |
| ·标准品的稀释 | 第28页 |
| ·荧光实时定量 | 第28-29页 |
| ·Western-blot | 第29-31页 |
| ·SDS-PAGE电泳 | 第29-30页 |
| ·转膜 | 第30页 |
| ·免疫反应 | 第30页 |
| ·化学发光 | 第30-31页 |
| ·放射免疫分析 | 第31-32页 |
| 3. 结果与分析 | 第32-47页 |
| ·标准曲线的构建 | 第32-35页 |
| ·FSTL3基因表达分析 | 第35-36页 |
| ·卵巢颗粒细胞原代培养结果 | 第36-38页 |
| ·颗粒细胞形态学观察 | 第36-37页 |
| ·FSHR免疫荧光染色检测 | 第37-38页 |
| ·RNAi实验结果 | 第38-47页 |
| ·RNA浓度与质量检测结果 | 第38-40页 |
| ·蛋白质浓度与质量检测结果 | 第40-41页 |
| ·FSTL3基因的siRNA筛选结果 | 第41-43页 |
| ·FSTL3蛋白表达分析 | 第43-45页 |
| ·FSTL3对颗粒细胞激素分泌影响的检测 | 第45-47页 |
| 4. 讨论 | 第47-52页 |
| ·小尾寒羊颗粒细胞原代培养的建立 | 第47-48页 |
| ·RNAi抑制FSTL3基因的表达 | 第48-50页 |
| ·FSTL3对常年发情的调控作用 | 第50页 |
| ·FSTL3对颗粒细胞激素分泌的影响 | 第50-52页 |
| 5. 结论 | 第52-53页 |
| 6. 参考文献 | 第53-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第62页 |