摘要 | 第1-9页 |
ABSTRACT | 第9-11页 |
英文缩略语 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-24页 |
1 几丁质 | 第12-13页 |
·几丁质的种类 | 第12页 |
·几丁质的分布 | 第12页 |
·几丁质的结构与功能 | 第12-13页 |
2 几丁质酶 | 第13-14页 |
3 昆虫几丁质酶 | 第14-17页 |
·不同昆虫种类的几丁质酶 | 第14页 |
·几丁质酶基因的cDNA克隆和特征分析 | 第14-16页 |
·几丁质酶的表达规律 | 第16页 |
·几丁质酶基因的组织表达特异性和龄期表达特异性 | 第16-17页 |
·不同几丁质酶基因的功能特异性 | 第17页 |
4 昆虫几丁质酶的应用 | 第17-19页 |
·几丁质酶可以降解产物 | 第18页 |
·几丁质酶可以与生物杀虫剂产生协同作用 | 第18页 |
·几丁质酶抑制剂可以用于害虫防治 | 第18-19页 |
·几丁质酶可以应用于转基因植物 | 第19页 |
5 本文所应用的主要实验方法 | 第19-23页 |
·PCR | 第19-20页 |
·qRT-PCR | 第20-21页 |
·RNAi | 第21-23页 |
6 本论文的研究对象及研究内容 | 第23-24页 |
·二化螟及其危害 | 第23页 |
·研究内容及目的 | 第23-24页 |
第二章 二化螟几丁质酶基因及其他RNAi致死基因的序列验证 | 第24-40页 |
摘要 | 第24页 |
1 材料与方法 | 第24-29页 |
·昆虫饲养及试虫材料提取 | 第24页 |
·主要试剂和仪器 | 第24-25页 |
·总RNA提取和cDNA合成 | 第25-27页 |
·PCR反应 | 第27页 |
·分子克隆 | 第27-28页 |
·序列测定与分析 | 第28页 |
·二化螟RNAi致死基因序列验证的引物 | 第28-29页 |
2 结果与分析 | 第29-37页 |
·片段验证分析 | 第29-32页 |
·验证后的基因序列信息 | 第32-37页 |
3 讨论 | 第37-40页 |
第三章 二化螟四个几丁质酶基因的表达分析 | 第40-50页 |
摘要 | 第40页 |
1 材料与方法 | 第40-46页 |
·供试材料 | 第40页 |
·试验仪器及试剂 | 第40-41页 |
·总RNA提取和cDNA合成 | 第41-42页 |
·定量PCR引物序列及扩增效率 | 第42-46页 |
2 结果与分析 | 第46-48页 |
·Cs-Cht1在蛹末期高表达 | 第46页 |
·Cs-Cht2在3L幼虫期高表达 | 第46-47页 |
·Cs-Cht3在幼虫-蛹过渡期高表达 | 第47-48页 |
·Cs-Cht4在幼虫期高表达 | 第48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
第四章 二化螟四个几丁质酶基因的RNA干扰 | 第50-64页 |
摘要 | 第50页 |
1 材料与方法 | 第50-55页 |
·供试材料 | 第50页 |
·主要试剂和仪器 | 第50-51页 |
·总RNA提取和cDNA合成 | 第51页 |
·定量PCR引物 | 第51页 |
·dsRNA合成 | 第51-54页 |
·二化螟Chitinase基因的定量PCR分析 | 第54-55页 |
2 结果与分析 | 第55-61页 |
·dsCs-Chtl注射后Cs-Cht1不同时间的表达量情况 | 第55-56页 |
·dsCs-Cht2注射后Cs-Cht2不同时间的表达量情况 | 第56-57页 |
·dsCs-Cht3注射后Cs-Cht3不同时间的表达量情况 | 第57-58页 |
·dsCs-Cht4注射后Cs-Cht4不同时间的表达量情况 | 第58-59页 |
·Cs-Cht1与二化螟羽化有密切关系 | 第59页 |
·Cs-Cht3在幼虫化蛹时有重要的作用 | 第59-61页 |
·Cs-Cht2和Cs-Cht4调控幼虫发育时期蜕皮 | 第61页 |
3 讨论 | 第61-64页 |
第五章 MIRNA基因在几丁质代谢通路中的靶标分析 | 第64-70页 |
摘要 | 第64页 |
1 数据库与软件 | 第64页 |
2 结果与分析 | 第64-66页 |
·几丁质合成和降解通路 | 第64-66页 |
·二级结构预测和保守性分析 | 第66页 |
3 讨论 | 第66-70页 |
全文总结 | 第70-72页 |
参考文献 | 第72-80页 |
攻读硕士学位期间学术论文的发表情况 | 第80-82页 |
致谢 | 第82-83页 |